全 文 ：植物生理学通讯 第 45卷 第 1期，2009年 1月 4 3
美丽豹子花的离体快繁和瓶内结球
吴丽芳, 张艺萍, 崔光芬, 吴学尉 *, 康超勇
云南省农业科学院花卉研究所, 昆明 650205
Rapid Propagation and Bulb Introduction in vitro Culture of Nomocharis
basilissa Farrer. ex W. E. Evans
WU Li-Fang, ZHANG Yi-Ping, CUI Guang-Fen, WU Xue-Wei*, KANG Chao-Yong
Flower Research Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming 650205, China
收稿 2008-10-14 修定 2008-10-22
资助 2 0 0 7 年国家农业科技支撑项目( 2 0 0 7 B A D 4 5 B 0 1、
2007BAD45B02)和云南省人才培引项目(2006PY04)。
* 通讯作者(E-mai l: wxw23 23 @1 63 .com; Tel: 0 87 1-
5 8 9 5 3 2 0 )。
1 植物名称 美丽豹子花(Nomocharis basilissa Farrer.
ex W. E. Evans)。
2 材料类别 鳞片切片。
3 培养条件 (1)鳞片切片诱导培养基: MS+BA 0.1
mg·L-1 (单位下同)+IBA 1.0+糖 60 g·L-1; (2)无菌鳞
片增殖培养基: MS+KT 0.5+NAA 0.1+糖 30 g·L-1;
(3)籽球生长培养基: MS+IBA 0.5+糖 80 g·L-1。在
培养基(1)和(3)进行小籽球的诱导和培养时, 需暗培
养, 并在培养基中添加 0.2%的活性炭; 在(2)中进
行小鳞片的增殖时, 需光培养, 光照强度为 4 0
µmol·m-2·s-1, 光照时间为 8~10 h。在上述所有培
养中加 6.5 g·L-1琼脂, 培养基的 pH值为 5.8, 培养
温度为 25 ℃。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 八月中旬收集野生美丽豹子
花鳞茎, 清洗干净, 剥去外层鳞片, 取中层和内层鳞
片在洗涤剂溶液中浸泡并摇洗3~5 min后用清水漂
洗, 之后在 0.2%升汞溶液中消毒 20 min, 再用 3%
次氯酸钠溶液消毒 15 min, 无菌水漂洗 3次。
4.2 小鳞茎的诱导 将已消毒的鳞片横切成0.2 mm
的片断, 基部朝下接种在诱导培养基(1)中, 在黑暗
条件下培养18~20 d时, 在切口处形成小突起(图1),
继续培养到 45~50 d时, 形成 2~4 mm的小鳞茎, 平
均每个鳞片片断可形成2~3个小鳞茎, 最多的可达
7个, 继续培养到 70 d时, 多数小鳞茎长成 5 mm的
小籽球(图 2)。
4.3 快速繁殖 将在培养基(1)中诱导获得的小籽球
剥鳞片后在培养基(2)进行继代增殖培养, 培养12 d
时, 基部有小突起产生, 25 d时形成小苗(图 3), 诱
导率达到 90%以上, 每个鳞片的增殖率为 2.2倍。
4.4 瓶内小籽球的培育 将在培养基(1)和(2)中诱导
出的小鳞茎分成单个, 去叶片后接种在结球培养基
图 2 美丽豹子花鳞片切片诱导培养产生小鳞茎
(3)中, 在黑暗条件下培养 60~70 d, 小籽球的直径
可达到 10~12 mm (图 4), 此时可以出瓶, 洗去琼脂
后在 5 ℃条件下冷藏 60~80 d, 打破休眠后可直接
下地种植, 成活率达 92%。
图 1 美丽豹子花鳞片切片诱导 20 d产生小突起
植物生理学通讯 第 45卷 第 1期，2009年 1月4 4
5 意义与进展 美丽豹子花是百合科豹子花属植物,
原产云南西北部, 主要分布在中旬、丽江等地, 其
花大美丽, 适于庭园、岩石园栽植观赏。由于人
为采集和生境的破坏严重, 野外自然分布越来越少,
有濒危的可能。本文采用切片诱导、小鳞片增殖
图 3 美丽豹子花无菌小鳞片诱导小苗
和瓶内结球的方法, 不仅对繁育和保护云南特有
的野生美丽豹子花资源有意义, 而且还可能形成
规模化生产。美丽豹子花的组培繁殖未见报
道, 百合科植物中利用切片快繁的技术也未见报
道。
图 4 瓶内产生的美丽豹子花籽球