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岩生肥皂草的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 4期,2009年 4月 395
岩生肥皂草的组织培养与快速繁殖
王金刚 1,2, 齐广勋 1, 杨涛 1, 车代弟 1,*, 杨传平 2,*
1东北农业大学园艺学院, 哈尔滨 150030; 2东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室, 哈尔滨 150040
Tissue Culture and Rapid Propagation of Saponaria ocymoides L.
WANG Jin-Gang1,2, QI Guang-Xun1, YANG Tao1, CHE Dai-Di1,*, YANG Chuan-Ping2,*
1College of Horticulture, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China; 2Key Laboratory of Forest Tree Genetic
Breeding and Biotechnology, Ministry of Education, Northeast Forestry University, Harbin 150040, China
收稿 2009-01-09 修定  2009-02-13
资助 中国博士后基金(20080430871)、黑龙江省博士后经费
(20-415037)和黑龙江省教育厅项目(1151103)。
* 通讯作者(E-mail: daidiche@yahoo.com.cn, yangcp@nefu.
edu.cn; Tel: 0451-55190563, 0451-82190006)。
1 植物名称 岩生肥皂草(Saponaria ocymoides L.)。
2 材料类别 茎尖和节间茎段。
3 培养条件 以MS为基本培养基, 另加3%蔗糖和
0.7%琼脂粉, pH 5.85。分化、增殖培养基为: (1)
MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1; (2) MS+6-
BA 1.0+NAA 0.1; (3) MS+6-BA 0.5+NAA 0.2; (4) MS+
6-BA 1.0+NAA 0.2。生根培养基为: (5) MS+IBA 0.2;
(6) MS+IBA 0.4。培养温度(25±2) ℃; 光照强度 25
μmol·m-2·s-1, 日光灯补光, 光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体消毒 取幼嫩枝条, 摘除叶片, 用洗衣粉
液洗除污物, 再用自来水浸泡 30 min, 反复冲洗干
净。在超净工作台上用 75%的酒精浸泡 20 s, 无
菌水冲洗1次, 然后用5%的NaClO浸泡10~12 min,
再用无菌水冲洗 4~5次, 将NaClO残液冲洗干净。
放置到无菌培养皿上以备接种处理。
4.2 初代培养 把茎尖切成 0.3 cm左右, 带节茎段
切成0.5 cm左右作为外植体, 接种到培养基(1)~(4)
中。外植体培养 7 d后, 茎尖发出两片幼叶; 腋芽
从茎段叶腋处抽出(图1-a), 茎段基部切口处脱分化
形成淡黄色愈伤组织。初代培养 14 d后, 生长迅
速, 顶芽发出 4~6片嫩叶(图 1-b); 茎段基部愈伤组
织膨大成块状, 腋芽发出嫩叶。
4.3 增殖培养 把初代培养 21 d后的幼苗切割 0.5
cm左右, 转移到新鲜培养基(1)~(4)中进行扩繁。4
d后顶芽和腋芽出现萌动现象, 切口基部膨大产生
愈伤组织, 均比初代培养生长迅速。增殖培养 14
d后, 腋芽发出的幼苗茎节较细长(图 2-a); 顶芽发
出的幼苗生长较健壮(图 2-b), 并抑制腋芽生长。
扩繁系数呈几何倍数增殖, 增殖系数可达 3以上。
4.4 生根培养 幼苗展叶 6~8片时, 将其转移到生根
培养基(5)和(6)中进行生根诱导。培养 7 d左右, 在
幼苗基部愈伤组织处长出白色毛状物(图3-a), 逐渐生
成 8~10条白色细根。在生根培养基中培养 14 d后,
生根率在 80%左右, 幼根长至 3~4 cm, 颜色由白色
渐渐变为淡黄色(图 3-b), 此时即可进行驯化移栽。
4.5 炼苗和移栽 首先将培养瓶口打开, 使幼苗逐渐
图 3 生根培养 7 d (a)和 14 d (b)后的状况
图 2 增殖培养 14 d后茎段(a)和茎尖(b)的生长状况
图 1 初代培养 7 d (a)和 14 d (b)后的状况
植物生理学通讯 第 45卷 第 4期,2009年 4月396
适应外界环境。3 d后幼苗出瓶, 洗净根系附着的
培养基, 用滤纸将根系水擦拭干净。栽植到灭过菌
的基质(园土:珍珠岩:木屑=2:1:1)中, 最初用塑料薄
膜扣棚保温保湿, 并注意遮光, 经常通风换气。炼
苗7 d后, 幼苗叶片颜色发绿, 正常直立生长(图4)。
炼苗 14 d后可进行换盆移栽, 成活率达 85%以上。
5 意义与进展 岩生肥皂草为石竹科肥皂草属宿根
草本花卉。植株低矮多分枝, 株高 10~20 cm, 茎
近蔓延。花鲜粉红色, 花萼红紫色, 花期 7~9月。
原产欧洲及西亚, 我国北方有栽培品种。生长健
壮, 耐寒, 耐旱, 喜光, 耐半荫, 一般环境均能良好生
长。岩生肥皂草可用作花坛、花境或布置野生
园、岩石园, 亦可作地被植物, 是林下或护坡种植
图 4 驯化 7 d后的幼苗状态
的好材料, 在园林绿化中具有广阔的应用前景, 其
根也有很高的药用价值。本文结果对其扩繁生产
可能有一定的参考价值。岩生肥皂草的组织培养
尚未见报道。