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冬寒菜的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 10期,2009年 10月 1015
收稿 2009-09-09 修定  2009-09-22
资助 福建省科技厅重点项目(2007N0005)和国家科技支撑计
划(20 07BAD 07B0 3)。
* 通讯作者(E-mail: lby3675878@163.com; Tel: 0591-83789379)。
冬寒菜的组织培养
林碧英 * , 钱昆, 吴路燕
福建农林大学园艺学院, 福州 350002
Tissue Culture of Malva verticillata L.
LIN Bi-Ying*, QIAN Kun, WU Lu-Yan
College of Horticulture, Fujian Agricultural and Forestry University, Fuzhou 350002, China
1 植物名称 冬寒菜(Malva verticillata L.), 又名冬
苋菜、马蹄菜、冬葵、滑菜、滑肠菜等。
2 材料类别 茎段、叶片和上胚轴。
3 培养条件 无菌苗萌发培养基为MS。诱导培养
基: (1) MS+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1+IBA
0.1; (2) MS+6-BA 3.0+NAA 0.1+IBA 0.1; (3) MS+6-
BA 3.0+NAA 0.5+IBA 0.2; (4) MS+6-BA 2.0+NAA 0.1;
(5) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2; (6) MS+6-BA 2.0+NAA
0.3; (7) MS+6-BA 3.0+NAA 0.1; (8) MS+6-BA 4.0+
NAA 0.1; (9) MS+6-BA 5.0+NAA 0.1。丛生芽增
殖培养基: (10) MS+6-BA 2.0+IAA 0.5; (11) MS+6-
BA 2.0+IAA 1.0; (12) MS+6-BA 3.0+IAA 0.5; (13)
MS+6-BA 3.0+IAA 1.0; (14) MS+6-BA 4.0+IAA 0.5;
(15) MS+6-BA 4.0 +IAA 1.0。根诱导培养基: (16)
1/2MS+NAA 0.1; (17) 1/2MS+NAA 0.3; (18) 1/2
MS+NAA 0.6。以上培养基均附加 8 g·L-1琼脂、
30 g·L-1蔗糖, pH值为 5.8。培养温度为 24~26 ℃,
光照强度为 30~40 μmol·m-2·s-1, 光照时间为 12~14
h· d - 1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 在超净工作台上对种子进行
5种不同灭菌处理后分别接种于MS基本培养基
上。处理方式分述如下: 处理 1, 用 0.1%升汞溶
液消毒 5 min; 处理 2, 用 0.1%升汞溶液消毒 8 min;
处理 3, 用 0.1%升汞溶液消毒 10 min; 处理 4, 用
10%次氯酸钠溶液消毒 15 min; 处理 5, 用 10%次
氯酸钠溶液消毒25 min。消毒后均用无菌水洗5~6
次。其中处理 1灭菌效果最佳, 播种后 20 d, 种子
的成苗率高达 92%, 且无污染。
4.2 芽的诱导 播种 20 d后取无菌苗茎段、叶片
及上胚轴分别接种到培养基(1)~(9)中进行培养。
带有腋芽的茎段在培养基(1)~(9)上均可生长, 但以
在培养基(9)上生长最好, 培养 7 d后茎段的腋芽开
始萌动, 20 d后苗高可达 5~6 cm, 茎段粗壮, 叶厚
色绿, 成芽率达 90%。以切成 1 cm×1 cm大小的
叶片和 1.0~1.5 cm长的上胚轴为外植体, 在培养基
(1)~(9)中大部分形成黄绿色愈伤组织后接着变褐
色, 未分化出不定芽。
4.3 丛生芽增殖培养 将茎段诱导出的丛生芽分别
接种于(10)~(15)增殖培养基中进行培养。在 IAA
浓度不变的情况下, 维持较低的6-BA浓度有利于丛
生芽的增殖, 最大增殖倍数可达 5.2。在 6-BA浓
度不变的情况下, 维持较低的IAA浓度有利于丛生
芽的增殖。综合考虑芽苗质量、生长速度和增殖
率等各方面因素, 采用培养基(10)可获得较好的增
殖效果。
4.4 生根及移栽 增殖培养 25 d后, 将高 3~5 cm的
无根幼苗接到生根培养基(16)~(18)上进行培养, 12
d后均可陆续生根(图 1)。其中培养基(16)生根效
果和试管苗长势最好, 20 d后生根率达 72%, 根长
4~6 cm, 每株生根 3~5条, 有根毛, 苗高约 5~7 cm。
图 1 冬寒菜的生根培养
植物生理学通讯 第 45卷 第 10期,2009年 10月1016
将生根试管苗移到与外界温度相同的室内靠窗处,
打开瓶盖, 于散射光下炼苗 3~5 d。移栽时, 苗从
瓶中取出, 用清水轻轻冲洗去根部表面的培养基, 植
于疏松的泥炭土中, 放于室内培养3~5 d, 保持一定
的温度和湿度。成活后移入大田, 成活率达 96%
以上。
5 意义与进展 冬寒菜是锦葵科(Malvaceae)锦葵属
二年生草本植物。冬寒菜全株性寒, 有利尿、催
乳、润肠通便等功效, 其生长期长, 是一种供应期
较长的绿叶蔬菜。近几年来, 在南方地区的栽培面
积越来越大, 其食用期由幼苗开始直至抽薹。采用
组织培养技术, 短期内可提供大量优质种苗, 有一
定的潜在应用价值。冬寒菜的组织培养尚未见报
道。