全 文 :植物生理学通讯 第 46卷 第 9期, 2010年 9月 969
收稿 2010-07-13 修定 2010-07-29
资助 云南省科技厅社会发展科技计划项目。
* 通讯作者(E-ma il: xuerg166@sohu.com; Tel: 0888-
5 1 0 9 7 0 1 )。
金蝉兰的组织培养与植株再生
和寿星, 薛润光 *, 李兆光, 郭承刚, 李国庆, 李帆
云南省农业科学院高山经济植物研究所, 云南丽江 674100
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Cymbidium gaoligongense Z. J.
Liu et J. Y. Zhang
HE Shou-Xing, XUE Run-Guang*, LI Zhao-Guang, GUO Cheng-Gang, LI Guo-Qing, LI Fan
Alpine Economic Plants Research Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Lijiang, Yunnan 674100, China
1 植物名称 金蝉兰(Cymbidium gaoligongense Z. J.
Liu et J. Y. Zhang)。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 (1)种子萌发培养基: MS+6-BA 1 mg·L-1
(单位下同)+NAA 5+活性炭1 g·L-1+椰乳100 mL·L-1;
(2)芽和根分化培养基: MS+6-BA 2+NAA 0.5; (3)壮
苗培养基: MS+6-BA 0.25+NAA 1+活性炭 1 g·L-1+
香蕉泥 100 g·L-1。上述培养基均附加 8 g·L-1琼脂
和 30 g·L-1蔗糖, pH 5.4。培养温度为(25±2) ℃, 光
照强度为 20~25 μmol·m-2·s-1, 光照时间为 14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 取果龄超过 300 d且尚未开
裂的蒴果, 切除花梗和残留的柱头和花瓣, 用 70%
酒精擦拭干净后浸入 0.1% HgCl2溶液中消毒 20
min, 无菌水清洗4~5次后剖开蒴果, 将种子直接撒
播于种子萌发培养基(1)上, 播种密度以大致铺满培
养基、种子间不相互重叠为宜。
4.2 种子萌发 播种20 d后即能看到有少数胚膨大
变绿并突破种皮, 开始萌发形成原球茎(图 1)。金
蝉兰种子萌发速度差异较大, 播种后 180 d内均有
种子陆续萌发, 经抽样统计, 播种 90 d后种子平均
萌发率达 74.5%。
4.3 芽和根的分化培养 将开始分化出芽的原球茎
转入芽和根分化培养基(2)内, 培养 60 d后, 种子萌
发形成的原球茎表现为3种生长发育方式: 形成一
个芽、形成多个芽、原球茎增殖后形成团块状。
前2种形成芽(图2)的原球茎逐渐分化出根, 后一种
原球茎则大多丧失芽和根分化功能。经统计, 接种
90 d后在培养基(2)内原球茎平均芽分化率为78%,
平均芽分化数为 2.4个, 平均根分化率为 46%。
图 1 金蝉兰种子无菌播种萌发
图 2 金蝉兰萌发种子芽分化
4.4 壮苗培养与驯化移栽 在根和芽分化培养基上
培养约 90 d后, 选取健壮新苗转入壮苗培养基(3)
内, 促进新芽和新根生长(图 3)。约 60 d后, 新苗
生长到 8~10 cm高, 根基本长满培养基, 可逐渐揭
开瓶盖, 炼苗 3~5 d后取出组培苗, 洗净培养基, 以
浸泡过的水苔包裹根部, 10~15株合栽于9 cm×9 cm
(口径 ×高)营养钵中(图 4)。栽种好后, 以 2 000倍
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图 3 金蝉兰无菌苗生根壮苗
图 4 金蝉兰炼苗移栽
80%代森锰锌溶液喷施定根水, 置炼苗棚内培养, 棚
内温度控制在 15~25 ℃, 空气湿度 80%左右, 初期
遮去自然光的 90%左右, 每周喷洒 0.1%磷酸二氢
钾和 0.05%尿素混合溶液一次, 每月喷 1 000倍
70%多菌灵溶液 2次, 180 d后统计移栽成活率达
7 6 %。
5 意义与进展 金蝉兰为近年才正式定名的兰科兰
属植物新种(刘仲健等 2003), 形态与西藏虎头兰
(Cymbidium tracyanum L. Castle)较相近, 但本种花
(图 5)较小, 花朵直径仅 7 cm左右, 且唇瓣上没有
紫点或紫斑, 二者区别明显。金蝉兰产于云南西部
保山、高黎贡山等地海拔 1 500 m左右的林中, 花
期 9~12月, 花香味浓郁。金蝉兰蒴果(图 6)内含种
子数十万粒, 在自然条件下需要适宜的温湿度条件
并被某些种类真菌侵染后才能萌发, 故成苗率极
低。由于近些年气候变化及国内外对兰属植物野
生资源的毁灭性采集, 导致金蝉兰野生资源总量迅
图 5 金蝉兰开花
图 6 金蝉兰蒴果(果龄 12个月)
速减少。采用人工无菌播种方式可得到大量实生
苗, 是快速、大量繁殖金蝉兰的一个有效方法。
本文研究结果对金蝉兰规模化栽培和新优品种的选
育有一定的参考意义。与金蝉兰同属的其他种兰
花组织培养已有报道(和寿星等 2009; 王莲辉等
2009), 但金蝉兰种子无菌培养的报道迄今未见。
参考文献
和寿星, 薛润光, 李兆光, 和加卫, 李燕(2009). 兰属新种昌宁兰的
组织培养及植株再生. 植物生理学通讯, 45 (1): 41~42
刘仲健, 张建勇, 李利强(2003). 金蝉兰, 中国云南兰科一新种. 武
汉植物学研究, 21 (4): 316~318
王莲辉, 姜运力, 于金勇, 罗在柒, 陈景艳(2009). 西藏虎头兰的组
织培养与快速繁殖. 植物生理学通讯, 45 (1): 51~52