全 文 ：植物生理学通讯 第 45卷 第 10期，2009年 10月 1001
收稿 2009-07-06 修定 　2009-07-27
资助 贵州省科技厅农业和社会发展科技攻关项目(黔科合 NY
字[2 00 6]30 62 号)。
* 通讯作者(E-mail: gzwanglianhui@163.com; Tel: 0851-
3 9 2 1 0 3 8 )。
长唇羊耳蒜的组织培养与快速繁殖
王莲辉, 姜运力, 余金勇, 罗在柒, 陈景艳 *
贵州省林业科学研究院生物技术中心, 贵阳 550005
Tissue Culture and Rapid Propagation of Liparis pauliana Hand.-Mazz.
WANG Lian-Hui, JIANG Yun-Li, YU Jin-Yong, LUO Zai-Qi, CHEN Jing-Yan*
Center of Biological Technology, Guizhou Academy of Forestry, Guiyang 550005, China
1 植物名称 长唇羊耳蒜(Liparis pauliana Hand.-
Mazz.)。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发培养基: (1 ) 1/2MS+100
mL·L-1椰乳。芽增殖培养基: (2) 1/2MS+6-BA 0.2
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1+100 mL·L-1椰乳; (3)
1/2MS+6-BA 0.2+NAA 0.5+100 mL·L-1椰乳。壮苗
及生根培养基: (4) 1/2MS+IBA 0.2+2 g·L-1活性炭。
以上培养基均加 3.0%蔗糖和 0.6%琼脂, pH 5.2~5.4,
培养温度为(25±2) ℃, 光照强度为 40 μmol·m-2·s-1,
光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 取人工授粉 120 d成熟的种
子, 经自来水洗净后, 置于 10%次氯酸钠溶液中消
毒 20 min, 用 70%的酒精表面消毒 30 s, 再以 0.1%
升汞溶液消毒 15 min, 最后用无菌水冲洗 5次。将
洗净的成熟种子置于灭菌滤纸上吸干水分, 用解剖
刀切开荚果, 将种子散落到培养基中。
4.2 种子萌发 播种后的种子先进行暗培养, 再转到
光下培养。在黑暗培养中, 接种到培养基(1)上的
种子, 7周左右可见白色原球体; 移至光下培养5周
左右, 原球茎转绿, 继续培养 3周左右, 原球茎开始
分化出叶原基(图 1)。
4.3 原球茎继代增殖 将初代培养的原球茎和芽的
混合体分别在培养基(2)和(3)上继代增殖培养, 原球
茎迅速萌发出大量的芽(图2), 在芽的基部又有新的
原球茎产生。培养基(2)上原球茎大多形成植株,
芽较粗壮, 长势好; 培养基(3)上形成的芽有部分呈
现玻璃化现象。
图 1 长唇羊耳蒜的原球茎诱导
图 2 长唇羊耳蒜的继代增殖
4.4 生根培养 将较大的无根苗转入生根培养基(4)
上培养, 生根率达 90%以上, 植株生长旺盛, 根系
发达, 7周后形成 3~5 cm的小苗(图 3)。
图 3 长唇羊耳蒜的诱导生根
植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture
植物生理学通讯 第 45卷 第 10期，2009年 10月1002
4.5 移栽 将培养瓶置于温室中炼苗2周后, 从培养
瓶中取出生根苗, 洗去附着的培养基。将苔藓用
1 000倍多菌灵溶液浸泡 1 h, 挤干水分, 包裹出瓶
苗的根部, 种植于穴盘中(图 4)。温度保持在 20 ℃
以上, 置于阴凉通风处。在此期间不浇水, 以利新
根生长和防止病害发生。5周后移入温室中栽培,
按常规进行水、肥、药管理, 成活率可达 90%以
上。
图 4 长唇羊耳蒜的炼苗移栽
5 意义与进展 长唇羊耳蒜属兰科羊耳蒜属植物,
分布于浙江、江西、湖北、湖南、广东北部、
广西北部和贵州东部。地生种类, 假鳞茎卵形或卵
状矩圆形; 叶通常 2~3枚; 花葶直立, 圆柱状, 总状
花序通常疏生数花; 花直径 2~3 cm (图 5), 通常萼
图 5 长唇羊耳蒜开花株
片淡黄绿色, 花瓣和唇瓣为淡紫色。花期 5月, 生
于海拔 600~1 200 m的林下荫蔽处或岩石缝隙中,
具有观赏价值, 是盆花的好材料, 有一定的开发前
景。长唇羊耳蒜通常用种子或分株法繁殖, 其种子
在自然条件下极难萌发, 自然繁殖率低, 采用组织
培养方法, 可以提供大量种苗, 对其扩大繁殖有一
定的参考价值, 与其同属的北方羊耳蒜的组培快繁
已有过报道(纪春艳2008), 但长唇羊耳蒜的组培和
快繁的报道尚未见。
参考文献
纪春艳(2008). 北方羊耳蒜的组织培养与植株再生. 植物生理学
通讯, 44 (2): 288