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大头橐吾的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 10期,2009年 10月 1003
收稿 2009-07-28 修定  2009-08-05
资助 浙江省新苗人才计划(21 00 0 03 2)。
* 通讯作者(E-mail: linxz100@sohu.com; Tel: 0571-63740918)。
大头橐吾的组织培养与快速繁殖
朱丽, 林夏珍 *
浙江林学院园林学院, 浙江临安 311300
Tissue Culture and Rapid Propagation of Ligularia japonica (Thunb.) Less.
ZHU Li, LIN Xia-Zhen*
College of Landscape Architecture, Zhejiang Foresty University, Lin’an, Zhejiang 311300, China
1 植物名称 大头橐吾[Ligularia japonica (Thunb.)
Less. ]。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发培养基: (1) MS。芽增殖培
养基: (2) MS+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同); (3) MS+6-
BA 2.0; (4) MS+6-BA 1.0+NAA 0.2; (5) MS+6-BA 1.0+
NAA 0.5。生根培养基: (6) 1/2MS+IBA 2.0; (7) 1/2
MS+NAA 2.0。上述培养基均附加3%蔗糖和0.7%
琼脂, pH 5.8~6.0。培养温度为(25±2) ℃, 光照强
度为 40~50 μmol·m-2·s-1, 光照时间为 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 挑选大头橐吾饱满种子, 用自
来水冲洗 2 h。在超净工作台下, 用 0.1%的HgCl2
消毒 5 min, 然后以无菌水冲洗 5次后备用。用无
菌手术刀剥去种皮, 将种胚接种到培养基(1)上。7
d后种子开始萌动, 先长出胚根, 后再长出子叶和真
叶。30 d后, 可长成完整的无菌苗。
4.2 丛生芽的诱导及增殖 将无菌苗切除胚根, 转接
至增殖培养基(2)~(5)中。20 d后芽基部形成小芽,
培养 30 d后, 芽丛可生长形成苗丛。4种增殖培
养基均可使单芽诱导形成丛芽, 但不同浓度生长调
节物质的增殖率和生长情况不同, 培养基(2)增殖倍
数达 1.87, 叶色浓绿, 苗健壮, 长势好(图 1); 培养基
(3)增殖倍数为 1.81, 叶色失绿, 有黄化现象, 长势
较好; 培养基(4)和(5)增殖倍数分别为 0.96和 1.08,
增殖效果较差, 苗的长势较慢。
4.3 生根 当芽长2.0~3.0 cm时, 从丛生芽中切分长
势良好的单芽, 接种于生根培养基上, 以诱导生根,
培养基(6)和(7)都可以诱导生根。30 d后, 培养基
(6)上每株苗生出根3~4条, 平均根长为1.65 cm, 生
根率达100% (图2); 培养基(7)上每株苗生根数2~3
条, 平均根长为 1.12 cm, 生根率为 95%。
4.4 炼苗与移栽 将生根后的试管苗移至实验室窗
台上, 在自然室温和散射光条件下炼苗3 d, 再打开
瓶盖炼苗 3 d。取出试管苗, 洗去基部培养基, 移
至用多菌灵消毒过的泥炭:蛭石:珍珠岩(1:1:1)混合
基质中, 用塑料袋套住花盆, 保温保湿, 7 d后除去
塑料袋, 10 d后小苗长出新叶, 成活率达 90%以上
(图 3 )。
5 意义与进展 大头橐吾为菊科橐吾属多年生草本
植物。叶掌状 3~5全裂, 花黄色, 头状花序在顶端
排列伞房状, 花期长达 1个月, 是优良的观叶观花
和切花植物, 且喜阴湿环境, 已逐渐作为园林弱光
图 1 大头橐吾的增殖培养
图 2 大头橐吾的生根培养
植物生理学通讯 第 45卷 第 10期,2009年 10月1004
图 3 大头橐吾的移栽
照环境中地被植物而应用。其根或全草可药用, 有
舒筋活血、解毒消肿等功能, 民间常用于治疗跌打
损伤、腰腿疼痛和痈肿(檀爱民等 2001)。大头橐
吾主要用播种及分株进行繁殖, 播种繁殖的成苗率
较低, 分株繁殖易感染病虫害, 且增殖速度较慢。
采用组织培养技术可加快繁殖速度, 提高繁殖系数,
有一定的应用前景。与其同属的糙叶大头橐吾和
蹄叶橐吾的组织培养已有研究和报道(吴迪瑶2006;
杜娟等 2006), 但大头橐吾的组织培养及再生植株
尚未见报道。
参考文献
杜娟, 杨伯明, 李彦舫(2006). 蹄叶橐吾的组织培养及植株再生.
植物生理学通讯, 42 (4): 687
檀爱民, 黄剑峰, 张勉, 王峥涛, 沈月毛, 郝小江(2001). 大头橐吾
中生物碱的研究.中国药科大学学报, 32 (4): 250~252
吴迪瑶(2006). 黄亮橐吾化学成分研究及糙叶大头橐吾组织培养
方法研究[硕士论文]. 杭州: 浙江大学