全 文 ：植物生理学通讯 第46卷 第12期, 2010年12月 1261
收稿 2010-10-12 修定 　2010-10-19
资助 国家环境保护部项目(20061A0013)。
* 通讯作者(E-mail: yangboyun@163.com; Tel: 0791-
3969519)。
短距风兰的无菌播种和快速繁殖
李婧嫄, 张小燕, 孔令杰, 彭德镇, 杨柏云 *
南昌大学生命科学与食品工程学院, 南昌330031
Asepsis Sowing and in vitro Propagation of Neofinetia richardsiana Christenson
LI Jing-Yuan, ZHANG Xiao-Yan, KONG Ling-Jie, PENG De-Zhen, YANG Bo-Yun*
School of Life Sciences and Food Engineering, Nanchang University, Nanchang 330031, China
1 植物名称 短距风兰(Neofinetia richardsiana
Christenson)。
2 材料类别 成熟未开裂蒴果中的种子。
3 培养条件 (1)种子萌发培养基: 1/2B5+6-BA 1.0
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.2; (2)原球茎增殖培养基:
B5+6-BA 1.0+NAA 1.5+0.1% AC; (3)分化成苗培养
基: B5+6-BA 1.0+NAA 0.2+0.05% AC; (4)壮苗和生
根培养基: 1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.3+0.03% AC。
以上培养基含4.0%蔗糖和0.7%琼脂, pH 5.6~5.8。
培养温度为(25±2) ℃, 光照强度为36 mmol·m-2·s-1,
光照时间为12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 取2009年11月从福建省武
夷山采回的短距风兰成熟的未开裂的蒴果, 经自来
水洗净, 用70%酒精消毒30 s, 0.1%升汞溶液消毒
8 min, 无菌水冲洗3~4次, 再用无菌滤纸吸干水分,
用消毒刀成十字状纵切果实, 移到培养瓶口, 轻轻
敲打果实, 种子均匀散落到培养基(1)上, 再在培养
基上加入适量无菌水(约1 mm高度), 盖好瓶盖放
于培养室中培养。
4.2 种子萌发 接种到培养基(1)上的种子(图1), 20
d左右可见种子吸水膨胀, 并由黄褐色变成淡黄绿
色(图2), 30 d左右形成原球茎(图3)。
4.3 原球茎增殖和分化成苗 将原球茎转移至培养
基(2)上进行增殖培养, 原球茎增殖较快。将增殖
的原球茎转移至培养基(3)上进行分化培养, 50 d后
可生长成小苗(图 4)。
4.4 壮苗和生根培养 将分化后的小苗分成单株转
移到培养基(4)上培养, 一周后生根(图5)。45 d后
观察苗高2~4 cm, 每株生根2~6条, 根长2~4 cm。
4.5 移栽 将培养瓶置于温棚中炼苗1周后, 取出苗
图1 短距风兰种子
图2 短距风兰种子萌发
图3 短距风兰原球茎增殖
植物生理学通讯 第46卷 第12期, 2010年12月1262
高于5 cm以上生根苗, 洗净培养基, 用0.1%的高
锰酸钾溶液浸泡5 min。种植基质采用已用水浸泡
并用1 000倍多菌灵液消毒的树皮和火山石的混合
基质。将苗定植于穴盘中, 保持温度18~25 ℃, 空
气湿度70%~90%, 光照强度87~110 mmol·m-2·s-1。
置于阴凉通风处, 15 d内不要浇水, 25 d后植株能
产生新的根系, 此时可移入温棚进行正常水、肥、
药管理(图 6)。
5 意义与进展 短距风兰为兰科(Orchidaceae)风兰
属的附生兰, 仅见于我国, 已引入欧洲栽培。短距
风兰植株簇生, 花白色、较小, 萼片长6~7 mm, 株
图4 短距风兰分化成苗
图5 短距风兰壮苗生根培养
型优雅, 花型奇特, 花期较长, 具有较高的观赏与研
究价值。短距风兰通常用分株方法繁殖, 增殖率
低, 属于中国物种红色名录中处于濒危(EN)等级的
濒危物种。风兰属的组织培养报道很少, 只有风兰
(Neofinetia falcata)的组织培养有报道(杨柏云和杨
宁生1997; Ichihashi和Islam 1999; Islam和Ichihashi
1999; Mitsukuri等2009)。短距风兰的组织培养国
内外尚未见报道。
参考文献
杨柏云, 杨宁生(1997). 风兰的离体繁殖. 植物生理学通讯, 33
(2): 125
Ichihashi S, Islam MO (1999). Effects of complex organic addi-
tives on callus growth in three orchid genera, Phalaenopsis,
Doritaenopsis, and Neofinetia. J Jpn Soc Hort Sci, 68 (2):
269~274
Islam MO, Ichihashi S (1999). Effects of sucrose, maltose and
sorbitol on callus growth and plantlet regeneration in
Phalaenopsis, Doritaenopsis and Neofinetia. J Jpn Soc Hort
Sci, 68 (6): 1124~1131
Mitsukuri K, Mori G, Johkan M, Mishiba K, Morikawa T, Oda M
(2009). Effects of explant source and dark-preconditioning
on adventitious bud formation in Neofinetia falcata H. H. Hu
in vitro. J Jpn Soc Hort Sci, 78 (2): 252~256
图6 短距风兰移栽成活