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紫毛野牡丹的无菌播种与试管繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 12期,2009年 12月 1199
收稿 2009-09-28 修定  2009-10-27
资助 中华人民共和国环境保护部全国生物物种资源调查课题
(物种 08-二 -3-1)和福建省教育厅课题 (JA07071)。
* 通讯作者(E-mail: zqx@bjfu.edu.cn; Tel: 010-62338376)。
紫毛野牡丹的无菌播种与试管繁殖
彭东辉 1, 邵伟丽 2, 陈龙菊 1, 张启翔 3,*
1福建农林大学园林学院, 福州 350002; 2浙江林学院园林学院, 浙江临安 311300; 3北京林业大学园林学院, 北京 100083
Asepsis Sowing and in vitro Propagation of Melastoma penicillatum Naud.
PENG Dong-Hui1, SHAO Wei-Li2, CHEN Long-Ju1, ZHANG Qi-Xiang3,*
1College of Landscape Architecture, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China; 2Faculty of Landscape
Architecture, Zhejiang Forestry College, Lin’an, Zhejiang 311300, China; 3College of Landscape Architecture, Beijing Forestry
University, Beijing 100083, China
1 植物名称 紫毛野牡丹(Melastoma penicillatum
Naud.)。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发培养基: (1) MS。复壮培养
基: (2) MS+6-BA 1.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.5。
诱导培养基: (3) MS+6-BA 1.0+NAA 0.1。继代增
殖培养基: (4) MS+6-BA 2.0+NAA 0.1; (5) MS+6-BA
3.0+NAA 0.1。生根培养基: (6) 1/2MS+IBA 0.2; (7)
1/2MS+NAA 0.2。以上培养基都附加 30 g·L-1蔗糖
和 6.5 g·L-1琼脂粉, pH为 5.5~5.8。培养温度为
(25±2) ℃, 光照强度为 40~50 μmol·m-2·s-1, 光照时
间为 14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 用软刷蘸肥皂水轻刷紫毛野
牡丹果实表面, 用流水冲洗 2 h, 再用超纯水冲洗
2~3遍后转到接种室。在超净工作台上, 剖开果皮,
收集种子, 先以 70%酒精浸泡 30 s, 无菌水冲洗 3
次; 继以升汞消毒 8 min, 无菌水冲洗 5次。接种
到种子萌发培养基(1)上。
4.2 种子萌发与壮苗培养 接种10 d后, 陆续有种子
萌发, 25 d后大部分种子均萌发(图 1), 将萌发植株
的胚根切除, 转接到壮苗培养基(2)上, 30 d后, 植
株高度达到 4~6 cm。
4.3 不定芽诱导 在超净工作台上取出复壮的植株,
将其切成 1.0~1.5 cm的带芽茎段, 接种到诱导培养
基(3)上, 20 d后不定芽分化。试验发现带顶芽茎
段诱导率较低, 仅为2.5, 不带顶芽茎段不定芽诱导
率达到 3 . 7。
4.4 继代增殖 将丛生芽分离, 分别接种于增殖培养
基(4)和(5)上, 约 25 d后每个芽可分化出 4~5个芽,
35 d后在培养基(4)和(5)上分别继代一次, 均可生成
大量丛生芽(图 2)。2种培养基比较来看: 培养基
(5)增殖系数较高, 达到 5.3, 但其基部出现大量愈
伤组织, 芽较弱, 生长较慢; 培养基(4)上的芽生长
图 1 紫毛野牡丹的无菌播种
图 2 紫毛野牡丹的增殖
植物生理学通讯 第 45卷 第 12期,2009年 12月1200
较快且粗壮, 增殖系数达到 4.5。
4.5 生根与移栽 将继代后的不定芽切成约3 cm的
小段, 分别转接到生根培养基(6)和(7)上进行生根培
养。15 d后基部分化出 3~5条白色根(图 3), 平均
生根率分别达到 94.0% 和 92.3%。当根长达到
2.5 cm时, 采取逐步开口炼苗法, 炼苗 8 d后, 出瓶
洗去培养基, 将试管苗移栽到灭过菌的基质中, 保
持适宜湿度, 成活率达到 80.2%。
生境的恶化, 紫毛野牡丹的生存受到极大的威胁, 种
群数量急剧减少(车秀芬等2006; 彭东辉2009)。野
牡丹科植物越来越受到人们的关注, 其园林开发也
有进展, 已有一些野牡丹科植物的组培技术报道, 如
野牡丹及地菍(马国华等 2000)、多花野牡丹(马国
华等 2004)、毛菍(何长信等 2009)、印度野牡丹
(伍成厚等 2006)和虎颜花(李龙娜等 2006)等。紫
毛野牡丹的研究仅见种子萌发与贮藏特性研究(彭
东辉等2008), 而无菌播种与试管繁殖尚未见报道。
参考文献
车秀芬, 杨小波, 岳平, 欧芷阳, 李东海, 吴庆书(2006). 铜鼓岭国
家级自然保护区植物多样性. 生物多样性, 14 (4): 292~299
何长信, 代色平, 马国华(2009). 毛菍组织培养和植株再生. 植物
生理学通讯, 49 (1): 49~50
李龙娜, 曾宋君, 吴坤林, 陈之林, 段俊(2006). 虎颜花的无菌播
种和试管育苗. 植物生理学通讯, 42 (6): 1135
马国华, 林有润, 简曙光, 刘念(2000). 野牡丹和地稔的组织培养
及植株再生. 植物生理学通讯, 36 (3): 233~234
马国华, 张静峰, 刘念, 林有润, 胡玉姬(2004). 从多花野牡丹和
野牡丹花柄直接诱导出芽. 植物生理学通讯, 40 (6): 719
彭东辉(2 00 9) . 福建、海南野牡丹科植物资源评价与利用研究
[博士学位论文]. 北京: 北京林业大学
彭东辉, 张启翔, 董建文, 黄启堂, 邵伟丽(2008). 紫毛野牡丹种
子萌发与贮藏特性研究. 中国观赏园艺研究进展, 北京: 中
国林业出版社, 197~201
伍成厚, 冯毅敏, 陈妙贤, 朱纯, 谈凤笑, 叶振华(2006). 印度野牡
丹茎段的培养与快速繁殖. 植物生理学通讯, 42 (6): 1145~
1146
图 3 紫毛野牡丹的生根
5 意义与进展 紫毛野牡丹是野牡丹科(Melastoma-
taceae)野牡丹属的一种灌木, 花瓣紫红色, 花大, 叶
片密布红色长毛, 花叶俱佳, 是野牡丹属中最具观
赏价值和最具开发前景的种类之一。近年来随着