全 文 ：植物生理学通讯 第 45卷 第 11期，2009年 11月 1105
收稿 2009-08-27 修定 　2009-09-24
资助 国家科技支撑计划课题(2008BAC39B05)。
* 通讯作者 ( E - m a i l : z e n g s o n g j u n @ s c i b . a c . c n ,
honglisha ng 05 07@16 3.com; Tel: 020-372529 90,
02 8-89 04 06 39 )。
接瓣兰的离体快速繁殖
陈希 1,2, 陈之林 1, 吴坤林 1, 段俊 1, 商宏莉 2,*, 曾宋君 1,*
1中国科学院华南植物园, 广州 510650; 2四川师范大学生命科学学院, 成都 610068
In vitro Rapid Propagation of Zygopetalum maculatum (Kunth) Garay
CHEN Xi1,2, CHEN Zhi-Lin1, WU Kun-Lin1, DUAN Jun1, SHANG Hong-Li2,*, ZENG Song-Jun1,*
1South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China; 2College of Life Science, Sichuan
Normal University, Chengdu 610068, China
1 植物名称 接瓣兰[Zygopetalum maculatum
(Kunth) Garay], 又名轭瓣兰。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发培养基: (1) 1/2MS+100 mL·L-1
椰子乳+1 g·L-1活性炭; (2) VW+100 mL·L-1椰子乳+
1 g·L-1活性炭。原球茎或类原球茎增殖培养基:
(3) 1/2MS+0.5 g·L-1活性炭 +6-BA 2.0 mg·L-1 (单位
下同)+NAA 0.5; (4) 1/2MS+0.5 g·L-1活性炭 +50
mL·L-1椰子乳 +6-BA 2.0+NAA 0.5。原球茎或类
原球茎分化培养基: (5) 1/2MS+1 g·L-1活性炭 +
6-BA 0.5+NAA 1.0; (6) 1/2MS+1 g·L-1活性炭+6-BA
0.1+NAA 2.0。生根与壮苗培养基: (7) 1/2MS+2
g·L-1蛋白胨 +1.5 g·L-1活性炭 +NAA 0.5+50 mL·L-1
椰子乳 +50 g·L-1香蕉汁; (8) 2 g·L-1花宝 1号 +2 g·L-1
蛋白胨 +1.5 g·L-1活性炭 +NAA 0.5+50 mL·L-1椰子
乳 +50 g·L-1香蕉汁。以上培养基均附加 20 g·L-1
蔗糖, 6.5 g·L-1琼脂固化, pH 5.2~5.4。培养温度为
(25±2) ℃; 光照强度 30~40 μmol·m-2·s-1, 光照时间
12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 将接瓣兰进行人工授粉, 人工
授粉 150 d的荚果呈黄绿色, 在超净工作台上用
75%的酒精棉球擦拭干净蒴果表面, 接着于75%酒
精中浸泡 30 s, 再用 0.1%升汞消毒 15 min, 无菌水
冲洗 5次。用无菌滤纸吸干蒴果表面水分, 剪除上
下两端, 纵向切开蒴果, 将白色粉沫状的种子散落
到培养基(1)上。
4.2 种子萌发 在光照培养中, 15 d后膨大, 35 d后
转绿形成原球茎, 70 d后原球茎上端出芽。培养
基(1)和(2)的萌发率均可在 85%以上, 但(2)上的种
子萌发后的小苗生长稍差, 其原因可能与1/2MS培
养基比 VW 培养基含有的矿物质更为完全有关。
在暗培养条件下, 30 d后培养基(1)和(2)上种子的
萌发率也可达 90%以上, 60 d时原球茎上端就能
出芽, 但在随后的增殖和分化培养时, 部分白色原
球茎和小芽会死亡, 不利于随后的培养。
4.3 原球茎或类原球茎的增殖 将初代培养的原球
茎转接到培养基(3)和(4)中, 均能形成类原球茎, (4)
的效果明显比(3)好, 可能是椰子汁中含有适合原球
茎增殖的营养成分和植物生长调节剂。在培养基
(4)中, 40 d的继代周期内原球茎可增殖到3倍左右;
将培养基(3)和(4)中形成的类原球茎再转接到培养
基(4)中, 类原球茎的增殖倍数可达 4倍以上。在
原球茎或类原球茎增殖的过程中, 有部分原球茎或
类原球茎会分化出芽形成原球茎或类原球茎和芽的
混合体(图 1)。
图 1 接瓣兰原球茎增殖和分化
4.4 原球茎或类原球茎的分化 将原球茎或类原球
茎和芽的混合体转接到分化培养基(5)和(6)中, (6)
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的分化效果比(5)好, (5)中在原球茎或类原球茎分化
出芽的同时, 还有大量类原球茎的形成; 而(6)原球
茎或类原球茎分化出芽的数量较多, 分化率可达
85 % 以上。
4.5 生根与壮苗 将分化出具有1~2片叶长1.0~1.5
cm的小芽转入培养基(7)和(8)上培养, 20 d左右开
始生根, 生根率均可达 100%, 每株有 3~4条根, 但
培养基(8)上的植株生长更为健壮, 根系更为发达(图
2)。
图 2 接瓣兰的生根壮苗
4.6 炼苗与移栽 当苗长至 4~5 cm高时, 将培养瓶
置于温棚中炼苗 1周后, 取出生根苗, 洗净根部附
着的培养基, 移入兰石、树皮、陶粒配比为 2:1:1
的混合基质中, 种植于 5 cm小塑料营养杯中。保
持适宜湿度, 置于阴凉通风处, 1周内不浇水, 成活
率可达 98%以上, 2周后可进行正常的水、肥、药
管理(图 3)。
图 3 移栽成活的接瓣兰试管苗
5 意义与进展 接瓣兰为兰科接瓣兰属植物, 原产
于巴西等美洲热带和亚热带地区, 近年来在我国元
宵花卉市场上十分畅销且价格昂贵, 其产品主要来
自国外和我国台湾等地。近年, 我园从国外引进了
本属植物的多个原生种和杂交种, 其中接瓣兰株形
美观, 花腊质、色泽艳丽、有芳香、花期长, 栽
培管理容易, 自然花期又正值我国的春节, 是值得
在我国推广的高档盆花和切花新品种。接瓣兰的
常规繁殖主要靠分株, 但繁殖速度慢, 难以满足市
场需要; 种子在自然状态下需与真菌共生才能萌发,
萌发率极低。采用无菌播种培养, 能够在短时间内
获得大量种苗, 对接瓣兰规模化生产来说, 是值得
考虑的一种途径, 我们采用此途径已生产出大量的
试管苗。接瓣兰的离体快速繁殖未见报道。