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大花细辛的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第6期,2005年12月784
大花细辛的组织培养
李洪林 付志惠 康强胜 杨波*
中国科学院武汉植物园,武汉 430074
Tissue Culture of Asarum maximum Hemsl.
LI Hong-Lin, FU Zhi-Hui, KANG Qiang-Sheng, YANG Bo*
Wuhan Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430074, China
收稿 2004-11-17 修定  2005-04-19
*通讯作者(E-mail: yangbo@rose.whiob.ac.cn,Tel:
027-87510054)。
1 植物名称 大花细辛(Asarum maximum Hemsl.)。
2 材料类别 茎段。
3 培养条件 基本培养基为 MS。芽增殖培养基:
(1) MS+6-BA 1.0~2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;
壮苗培养基:(2) MS+6-BA 0.5+NAA 0.1;生根
培养基:(3) 1/2MS+IBA 1.0+NAA 0.2。以上培养
基蔗糖浓度(1)和(2)为3.0%,(3)为2.0%;琼脂7.0
g·L-1,pH 5.4~5.6。培养温度为(25±2)℃,连续
光照12 h·d-1,光强 40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 剪取带腋芽的茎段,用毛刷
沾少许洗衣粉将表面刷洗干净,再用自来水漂洗
3~5 次。置超净工作台上,于无菌条件下,先用
75%酒精浸泡30 s,再用0.1%升汞浸泡12 s,无
菌水冲洗 3 次,每次 3~5 min,无菌滤纸吸干表
面水分。将带有1~2个节的茎段接种到培养基(1)
中,培养 20~30 d 后,在腋芽处长出丛生芽。
4.2 快速增殖 将获得的无菌丛生芽切开(2~4个芽
一丛),转接入培养基(1)中继代培养。经过30~40 d
培养,可长出 10~20 个丛生芽(图 1)。反复分切
丛生芽,在培养基(1)中进行增殖培养,可以获得
大量的丛生芽。
4.3 壮苗 将增殖的丛生芽接到培养基(2),丛生芽
逐渐长大,30 d 时可转入生根培养。
4.4 生根和移栽 将带3片叶的无根苗切下,接入
培养基(3)中培养。15 d左右开始长出不定根,25 d
左右生根率达到95%,平均每株苗有2.5条根,根
长且粗壮。移栽前,将瓶盖打开,室温下炼苗1~2
d 后,取出试管苗,洗净其根部培养基,移栽到
事先准备好的苗床(2/3土加1/3河沙)上。保持环境
温度 20~25℃,湿度 85%~90 %,适当遮荫,成
活率达95% 以上。4~5 周后即可带土移栽(图 2)。
5 意义与进展 大花细辛属马兜铃科细辛属多年生
草本植物,是名贵的中草药,具有解表散寒、祛
风止痛、镇咳祛痰等功效,主治感冒、咳嗽、
哮喘、风湿性关节痛、鼻炎、胃炎等。此外,
大花细辛叶型美观、花型特别,可用作观赏植
物。目前一般采用种子播种和分株两种方式繁
殖。用种子繁殖后代性状容易发生分离,不易保
持母株的优良特性;而分株繁殖速度太慢,难以
满足市场需要。如果采用组培快繁技术,可在短
时间内获得大量性状一致的种苗,可能有助于缓
解野生资源遭受严重破坏的压力。大花细辛的组
织培养尚未见报道。
图1 大花细辛丛生芽增殖
图2 大花细辛移栽成活苗