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银莓的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第43卷 第1期,2007年2月 115
银莓的组织培养与快速繁殖
田敏*,李纪元,李辛雷,范正琪
中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳311400
Tissue Culture and Rapid Propagation of Elaeagnus commutata Bernh
TIAN Min* , LI Ji-Yuan, LI Xin-Lei, FAN Zheng-Qi
Research Institute of Subtropical Forestry, Chinese Academy of Forestry, Fuyang, Zhejiang 311400, China
收稿 2006-09-01 修定  2006-12-18
资助 国家林业局引进国际先进农业科学技术计划(2002-22)。
*E-mail:tmin115@163.com;Tel:0571-63105093
1 植物名称 银莓(Elaeagnus commutata Bernh),
英文名为silverberry。
2 材料类别 下胚轴。
3 培养条件 以 MS 为基本培养基。诱导愈伤组织
和芽分化培养基:(1) MS+6-BA 2.0 mg·L-1 (单位
下同)+NAA 0.2;(2) MS+6-BA 1.5+NAA 0.2;(3)
MS+6-BA 1.0+NAA 0.2。增殖培养基:(4) MS+6-
BA 0.5+NAA 0.05。诱导生根培养基:(5) 1/2
MS+NAA 0.5。上述培养基中均添加30 g·L-1 蔗糖
和8.0 g·L-1 琼脂,pH 5.6。培养温度为23~25 ℃,
光照强度为 30~40 mmol·m-2·s-1,光照时间为 16
h ·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取当年新采集的种子,用
80 ℃水浸泡过夜后,播种于细沙中,10 d 后即
可萌发。25 d左右,可长出株高3~4 cm的幼苗,
剪取下胚轴作为外植体。将外植体用自来水冲洗
2 h,然后用 70% 乙醇表面消毒 20 s,用 0.1%
HgCl2溶液浸泡消毒10~15 min,无菌水冲洗5次,
切成0.5 cm 的小段。
4.2 愈伤组织及不定芽的诱导 下胚轴接种到培养
基(1)~(3)上,1周后,下胚轴变得粗大;3周后,
下胚轴两端切口处产生大量绿色、颗粒状的愈伤
组织,中部与培养基接触部分产生少量愈伤组
织。继续培养,愈伤组织逐渐长成较大的愈伤组
织团,将愈伤组织团从外植体上剥离下来,置于
新配制的培养基(1)~(3)上进行培养。5 d左右,在
愈伤组织团表面分化产生大量的绿色芽点,芽点
逐渐分化成小芽,继而形成丛生苗。实验发现,
培养基(1)~(3)对愈伤组织的形成及不定芽的诱导
没有显著影响。
4.3 增殖培养 将刚分化产生大量丛生芽的愈伤组
织团切割成小块,接种于培养基(4)上,3周后即
可形成大量的丛芽。将丛芽切割后,在相同的培
养基上继代培养,又可获得大量的丛芽,芽生长
健壮旺盛(图 1),可直接进行不定根的诱导。
4.4 生根及移栽 不定芽长至3 cm左右,即可切
下转接到生根培养基(5)上,进行不定根的诱导。
培养约 3 周,可长出 2 ~ 6 条不定根,生根率达
90%。待生根苗长到 5~6 cm 时,打开瓶盖,炼
苗 2~3 d,洗去小苗根部的培养基,移栽入营养
土中,成活率可达 9 5 % 。
5 意义与进展 银莓是加拿大和美国大部分地区
的乡土树种,是胡颓子科胡颓子属的落叶丛枝状
灌木,具有抗风沙、抗旱、耐瘠薄、耐盐碱和
耐寒等多项优良特性,可用于水土保持、防沙造
林,是荒漠化治理和生态工程建设的一种较为理
想的灌木树种。银莓常用播种繁殖,种子需用混
沙低温层积或温水浸泡处理。采用组织培养的方
法进行快速繁殖,可提供大量种苗,有一定的潜
在应用前景。银莓的组织培养尚未见报道。
图1 银莓的增殖培养