全 文 ：植物生理学通讯 第 40卷 第 6期，2004年 12月 1
日本牵牛茎段的离体培养及植株再生
张晓军* 张永乐
牡丹江师范学院生物系，黑龙江 牡丹江 157012
In vitro Culture and Plantlet Regeneration of Stem Segment of Pharbitis nil
ZHANG Xiao-Jun*, ZHANG Yong-Le
Department of Biology,Mudanjiang Normal college, Mudanjiang Heilongjiang 157012
收稿 2004-05-31 修定 　 2004-09-26
资助　
* 通信作者E-mail：zxj898@eyou.com，Tel:0453-6511268
1 植物名称 日本牵牛(Pharbitis nil)。
2 材料类别 带叶柄幼嫩茎段。
3 培养条件 以MS为基本培养基。(1)丛生芽诱导
培养基：MS+KT 2.0 mg·L-1 (单位下同)+IBA 0.01；
(2)增殖培养基：MS+KT 1.0 +IBA 0.01；(3)生根
培养基：1 ／ 2MS+NAA 0.5。以上培养基均添加
30 g·L-1 蔗糖、6 g·L-1 琼脂，pH 5.8。接种后先
在培养箱中暗培养 7 d，然后置于光下培养，培
养温度为(25±1)℃，光照时间为12 h·d-1，光照度
为2 000 lx 左右。
4 生长与分化情况
4.1 无菌外植体材料的获得 选取生长健壮的新生
幼苗，剪去叶片留下一段 0.5 cm 长的叶柄，用
流水冲洗 30 min。在超净工作台上，用 70% 酒
精浸泡 30 s 后，放入 0.2% 的升汞溶液中，加入
几滴吐温，振荡灭菌 7 min，然后用无菌水冲洗
5 次，再用无菌滤纸将材料表面水分吸干，并将
材料切成0.8 cm左右的带有叶柄的单节茎段作为
供试外植体进行丛生芽的诱导。
4.2 丛生芽的诱导 将无菌外植体接种于培养基(1)
上进行丛生芽的诱导，接种后至少在25℃培养箱
中暗培养 7 d，否则外植体白化死亡。而后置于
光下培养，5 d后外植体明显膨大两端切口处形成
浅绿色愈伤组织，但未见分化；10 d 后叶腋处形
成小突起,腋芽开始萌动、分化；培养 25 d 左右
形成2~3个丛生芽,同时有些外植体上同步分化出
根。在诱导过程中形成的丛生芽中有的形成花
芽，并且作蕾开花。在丛生芽的诱导过程中我们
曾经使用过添加有不同质量浓度和不同配比的6-
B A、K T、Z T 和 N A A、I B A 组合的 M S 培养基
进行试验的结果表明KT诱导丛生芽的效果明显优
于 6-BA 和 ZT；KT 与 IBA 的组合优于 KT 与 NAA
的组合。
4.3 继代增殖培养 当丛生芽长成不定苗后，再将
其切成带一个腋芽的单节，分别转接到新鲜的 2
号培养基上进行增殖培养，每次继代时间为25 d
左右，芽丛的发生力保持相当长的时间。
4.4 生根与移栽 选取生长健壮具有3~4片叶的组
培苗从基部切下转移到培养基(3)中进行生根诱
导，5 d 后开始生根，15 d 根系发达健壮，生根
率达 100%。当苗高 4 cm 左右时，打开培养瓶口
炼苗 2 d。然后取出小植株，用清水洗净根部，
移栽到事先经过开水灭菌的富含腐殖质、疏松肥
沃、保水透气的土壤中，同时要注意保温、保
湿和适度的光照即可，成活率可达 9 0 % 以上。
5 意义与进展 日本牵牛为旋花科牵牛属一年生草
本植物，花形大，色泽艳丽，有紫、蓝、红、
白、深红及镶白边品种。日本牵牛原产于美洲热
带，适应性强，现在我国各地均有栽培，适宜
于阳台或窗台栽培、棚架也可盆栽，是一种具观
赏价值的园林花卉。日本牵牛离体再生培养困
难，用其子叶、茎尖、幼叶和胚轴离体培养形
成胚性愈伤组织较容易，但难以进一步发育成
熟，我们曾用其真叶、子叶和叶柄进行植株再生
试验均未成功,我们发现这种材料虽然极易形成愈
伤组织和分化出根，但却难以诱导分化出芽，而
且在诱导过程中对细胞分裂素和生长素的类似物之
间的比例要求不遵循模式植株的一般规律[1]。本
文结果对建立日本牵牛甚至整个旋花科植物的体外
再生系统可能都有一定的参考价值。日本牵牛的
组培快繁尚未见报道。
参考文献
1 张晓军，李振山，张永乐.日本牵牛组织离体培养的器官分
化初报.牡丹江师范学院学报(自然科学版)，1998，(1)：
10~11
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