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巴巴拉百合的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 2期,2004 年 4 月 205
收稿 2003-06-02 修定   2003-12-08
* E-mail:chunming863@163.com, Tel:0576-8389983
* * 大专园艺 2000 级实习生。
巴巴拉百合的组织培养和快速繁殖
郑春明* 温立治** 罗丽蓉**
台州职业技术学院九峰分院,黄岩 318020
Tissue Culture and Rapid Propagation of Lilium barbaresco
ZHENG Chun-Ming*, WEN Li-Zhi**, LUO Li-Rong**
Jiufeng Branch of Taizhou Vocational & Technical College, Huangyan 318020
1 植物名称 巴巴拉百合(Lilium barbaresco)。
2 材料类别 带盘鳞叶、叶片。
3 培养条件 诱导丛生芽培养基:(1)MS+NAA
0.03 mg.L-1(单位下同)+6-BA 0.1~0.5+2%蔗糖+
0.8% 琼脂粉;(2) MS+6-BA 0~4+NAA 0.2+2% 蔗
糖 +0.7% 琼脂粉。增殖培养基:(3)MS+6-BA 1+
生长抑制剂(PP333 和 B9) 1~5+NAA 0.08+3% 蔗
糖 +0.7% 琼脂粉。生根培养基:(4) MS+6-BA
0.5+IBA 1.5+3% 蔗糖 +0.7% 琼脂粉 +0.3%活性
炭。培养温度(23 ± 1)℃,相对湿度 60%~70%,
光照度15 00~2 000 lx,光照时间12 h.d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 首先将冷藏2个多月的巴巴
拉百合鳞茎用自来水冲洗干净;过饱和洗衣粉浸
泡20 min,蒸馏水洗4遍(每遍4 min); 95%酒精
浸泡30 s,蒸馏水洗4遍(每遍4 min); 0.1%新洁
尔灭浸泡10 min,蒸馏水洗4遍(每遍4 min)。在
无菌操作台上用0.7%次氯酸钠浸7 min,用无菌
水洗5遍(每遍4 min)。将外植体倒入无菌纱布上
吸干水分,切成约0.8 cm × 1.0 cm 小块。
4.2 丛生芽的诱导 将上述切块材料接种到培养基
(1)上,约经过5 d,鳞叶上表皮已开始突起,12
d后形成健壮的丛生芽。用不同浓度的6-BA 对鳞
叶进行不定芽的诱导,发现6-BA为 0.1~0.4 mg.L-1
时,诱导的丛生芽比对照(不加6-BA)多且健壮。
另外,将巴巴拉百合的叶片切割成约1.2 cm长
切段,接种在培养基(2)上,约过20 d,在叶片切
口处长出愈伤组织,再过约1周,愈伤组织再分化
为不定芽。比较不同浓度6-BA 对不定芽诱导的影
响,不加6-BA 的长得最快,但芽的质量比较差;
6-BA为 1 mg.L-1 的不定芽长得最健壮;6-BA 2 mg.
L-1 次之;6-BA 4 mg.L-1 最差,只长愈伤组织。
4.3 继代扩大繁殖培养 将上述丛生芽在无菌操作
下切割成含 1~2 个芽小块作为一个外植体,接种
到培养基(3)上。PP333 的增殖效果比较明显,在
0~2 mg.L-1 范围内,增殖系数随浓度的增加而增
加,浓度为 2 mg.L-1 的增殖系数最高,但超过这
个范围反而下降。如PP333 和 B9 的浓度为5 mg.L-1
时,它们的增殖系数分别为3.1和 2.6,反而小于
不加生长延缓剂的。此外,在浓度1~5 mg.L-1 范
围内,不同生长延缓剂的效应也不同。PP333 的最
高增殖系数为 5,而 B9 的最高增殖系数为 3.6。
4.4 诱导生根与移栽 将扩大繁殖后的丛生芽切割
成含1~2个小块接种到培养基(4)上,培养约5 d,
加活性炭的,根长得细长,每芽生根约 9 条,生
根率为 1 0 0 %;不加活性炭的,根几乎不生长。
说明活性炭促进百合生根,但根太细长对以后的
试管苗移栽不利,如出瓶清除根上的琼脂易使根
伤断。根长到约 3 cm 左右时,移植到珍珠岩和
腐殖土(1∶1)混合的基质中,再用 400 倍液的托
布津喷湿叶片,浇透基质,由病原菌造成百合的
软腐病下降 30 % 左右,成活率达到 60 % 以上。
4.5 意义与进展 百合品种非常繁多,荷兰及其它国
家每年都有几十个新品种问世。现在市场上流行的
百合分为四大类:亚洲系、东方系、铁炮系、L /
A杂交系。其中东方系(即平常所谓的东方百合)在花
卉栽培中所占的比例最大,常见的品种有acapulco、
barbaresco、alliance、berlin、casacade、egypt、
kissproof、mediterannee、sorbonne等。这些品种花
色、花型、株型各异。本文所用barbaresco(中文译
为“巴巴拉”),花色鲜红,花瓣基部呈黄色三角
星,看上去雍容华贵。本品种来自北京神州克劳沃
园艺技术有限责任公司,目前,主要靠小鳞茎进行
分株繁殖,1株百合每年只能得到1~3个小鳞茎,繁
殖速度慢;有些品种虽然可用小鳞片扦插,但易腐
烂。本文以不同浓度和配比的各种植物生长调节剂
诱导丛生芽、增殖以及生根,效果优于已有报道。
如用6-BA 0.4诱导丛生芽的时间比已有报道缩短约20
d,且芽粗壮有活力;用2 mg.L-1浓度的PP333可提高
诱导芽的增殖系数。这些结果对今后大规模生产巴
巴拉百合小苗和鳞茎都有一定的参考价值。