全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 2期,2007年 4月 311
克里克特寿的组织培养与快速繁殖
左志宇 1,李建希 1,安晓云 1,*,尹晓爽 1,杨雪 2
1天津市 102中学生物教研室,天津 300161;2中国农业大学农学与生物技术学院,北京 100094
Tissue Culture and Rapid Propagation of Haworthia bayeri J. D. Venter & S.
A. Hammer
ZUO Zhi-Yu1, LI Jian-Xi1, AN Xiao-Yun1,*, YIN Xiao-Shuang1, YANG Xue2
1Teaching and Research Section of Biology, Tianjin 102 Middle School, Tianjin 300161, China; 2College of Agriculture and
Technology, China Agricultural University, Beijing 100094, China
收稿 2006-11-13 修定 2007-01-19
* 通讯作者(E-mai l:br isk air@gmail .com;Tel:02 2-
2 45 56 16 1 -8 11 1)。
1 植物名称 克里克特寿(Haworthia bayeri J. D.
Venter & S. A. Hammer)。
2 材料类别 成年克里克特寿的春生花茎子房部
位。实验材料来源于日本奈良多肉植物研究会。
3 培养条件 (1)启动培养基:MS+6-BA 1 mg·L-1
(单位下同)+KT 1+NAA 0.2;(2)分化培养基:
MS+6-BA 1+NAA 0.1;(3)继代与增殖培养基:
MS+6-BA 0.5+KT 0.5+NAA 0.1;(4)复壮与生根培
养基:1/2MS+NAA 0.1。以上培养基均加入 3%
蔗糖和 0.7% 琼脂,pH 5.8。培养温度为(25±
2) ℃,光照时间 8 h·d-1,光强约为 40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 尽量选取温室内栽种植株的
新生花茎,取下后经流水冲洗 30 min以上,在
超净台上,以 0.1% HgCl2溶液(加入 Tween-20数
滴) 消毒 6 min,无菌水再冲洗 7~8次。将消毒
过的材料置于无菌滤纸上,分离每个花蕾的子房
组织作为外植体。
4.2 启动培养 将克里克特寿的外植体接入启动培
养基(1)上,14 d后,花子房部或花茎截面膨大;
30 d后,膨胀形成球状愈伤组织,增殖速度较
快,周边可见淡绿色或黄色愈伤组织长出。愈伤
组织中绿色较深的部位具有较强的增殖能力,分
离该处组织用于后期分化培养。
4.3 分化培养 将上述培养物转入分化培养基(2 )
中,20~30 d后愈伤组织上绿色较深部位开始分
化,逐渐形成单个幼芽;再经过 15 d后,该幼
芽周边形成大量丛生芽(图 1),将其分割后可用于
继代培养。
4.4 芽的增殖 将上述培养物转入增殖培养基(3)
上,大约 25 d后,各瓶都可以形成丛生苗。将苗
丛分割后转入新培养基,可实现快速增殖,芽基
部几无愈伤组织,植株易分离,每瓶可形成有确
定形态的苗 10~20个。继代周期为 25 d,此时苗
的繁殖系数可达到 3 ~4 倍。这样得到的苗较健
壮,利于出瓶(图 2 )。
图 1 克里克特寿的分化培养
图 2 克里克特寿的继代培养
植物生理学通讯 第 43卷 第 2期,2007年 4月312
4.5 壮苗与生根 在增殖培养基(3)上得到的大苗可
以不经生根直接进行移栽,较幼嫩的苗最好先转
入生根培养基(4)中培养 1~2个月,这样,苗生长
较快并健壮,此时幼苗的新生叶片顶端可以形成
此品种所特有的“窗”,表明壮苗成功。在转入
生根培养基后,需要增大光强到 60 µmol·m-2·s-1,
最好用散射阳光,生根率可达 90% 以上(图 3)。
座状排列,叶顶端透明并有形状奇特的花纹,形
成美丽的“窗”,此品种不同于其他十二卷属多
肉植物的是其生长点处的叶片较周边为凹。此品
种是百合科多肉植物中著名的品种,形态奇特,
具有极高的观赏和收藏价值,也是植物园和园艺
植物爱好者喜欢收集的珍贵品种。由于此品种繁
殖率很低,传统的繁殖方法大多用分株、叶插和
种子繁殖,不易成活且生长缓慢,采用组织培养
方法可能是解决克里克特寿等十二卷属植物繁殖与
普及的途径之一。与其同属的厚叶莲花掌(戴策刚
和谭文澄 1987)、康平寿(孙涛等 2003)、截形十
二卷(孙涛和李德森 2002)、条纹十二卷(蒯娟和谭
文澄2001)和万象(黄清俊等2003)的组织培养和快
速繁殖已有过报道,而克里克特寿的组织培养和
快速繁殖还未见报道。
参考文献
戴策刚, 谭文澄(1987). 厚叶莲花掌的组织培养和植株再生. 植物
生理学通讯, (2): 55~56
黄清俊, 丁雨龙, 杨祎敏(2003). 万象的组织培养和植株再生. 植
物生理学通讯, 39 (6): 642
蒯娟, 谭文澄(2001). 条纹十二卷的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 37 (1): 36
孙涛, 金蕊, 李德森(2003). 康平寿的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 39 (3): 232
孙涛, 李德森(2002). 截形十二卷的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 38 (6): 586
图 3 克里克特寿的生根培养
4.6 移栽 采用纯蛭石作为基质,经高压灭菌后装
入苗钵,距顶端大约 2 cm。将开口炼苗 2 d的出
瓶苗取出,置于暗处风干 3 d (此时新生的须根部
分干枯,但根原基仍保留,新根会很快萌发,这
一特点也与多肉植物的特性符合),然后均匀插入
基质中,放在塑料棚中保湿。用低浓度的多菌灵
溶液浇灌,逐渐见光。用散射的太阳光代替日光
灯,可大大提高成活率。其中,不经生根的苗,
其成活期很长(4~6周),而经生根的苗仅 2周即可
见生长。出瓶苗适当风干(干法移栽)对新根萌发有
一定的促进作用,并且可以缓解多肉植物组织培
养苗的生理性腐烂,此种移栽方法不同于传统的
湿法移栽。移栽成活率可达 90%以上(图 4)。
5 意义与进展 克里克特寿是百合科十二卷属的小
型肉质植物,原产于南非。植株较矮,叶呈莲
图 4 克里克特寿组织培养苗的移栽