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十萼花组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第3期,2005年6月 349
十萼花组织培养与快速繁殖
薛媛1 朱忠荣1,* 王涛2
1 贵州大学林学院,贵阳 550025;2 贵州省龙里林场,贵州龙里 551209
Tissue Culture and Rapid Propagation of Dientcdon sinicus
XUE Yuan1, ZHU Zhong-Rong1,*, WANG Tao2
1College of Forestry, Guizhou University, Guiyang 550025, China; 2Longli Forestry Center of Guizhou Province, Longli, Guizhou
551209, China
收稿 2005-03-11
资助  贵州省林业科学技术研究项目(200206)。
*通讯作者(E-mail: yuanxue1977@sohu.com, Tel: 0851-
3853986)。
1 植物名称 十萼花(Dientcdon sinicus),别名十齿
花。
2 材料类别 成年树带叶柄的叶片、腋芽。
3 培养条件 (1)叶片诱导丛生芽培养基:MS+6-BA
1.0~2.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1 ;(2)腋芽诱导
丛生芽培养基 :MS+6-BA 1.0+NAA 0.2;(3)继代
培养基:MS+6-BA 0.5+NAA 0.1;(4)生根培养基:
1/2MS+IBA1.0+NAA 0.1。所有培养基均附加
0.8% 琼脂和 3% 的蔗糖,pH 5.8~6.0。培养温度
(23±1)℃,光照度2 000 lx左右,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 芽诱导培养 将叶片、腋芽用饱和洗衣粉浸泡
20 min后,再用自来水冲洗10 min,在无菌室用
70%酒精浸泡1 min,再用0.1% HgCl2消毒5 min,
无菌水冲洗6次。把带叶柄叶片接种在培养基(1)
上,培养10 d 后,叶片膨大,叶边沿凸起;15 d
后先在叶柄处出现绿色突起;25 d 后绿色突起伸
长为许多绿色小芽;35 d 后芽伸长为4~8 片叶子
的小植株,每个叶片诱导出 2~4 个芽。将腋芽切
成长1~1.5 cm的单芽枝段,接种在培养基(2)中,
7 d 后芽萌动开始伸长;25 d 后叶片展开为 3~4
片,将绿色的腋芽切割下来,转接到新鲜培养基
(2)上;25 d 后基部膨大并出现许多淡绿色小芽
点;45 d后小芽伸长4~8株无根苗(图1)。
4.2 芽继代培养 将培养基(1)、(2)上产生的无根小
苗,剪成1~2个节的切段转接到培养基(3)中。10 d
后茎切段上的腋芽萌发生长,茎基部开始膨大;
25 d后,茎基部出现许多绿色不定芽;35 d后芽
伸长为 3~8 cm,10~20 个无根苗。随继代次数
增加,增殖倍数增多,第 8 代后增殖 50 倍以上。
4.3 生根培养与移栽 将培养基(3)中长3 cm以上的
无根苗转接在培养基( 4 )上,其余小芽继代培
养。1 0 d 后开始长出乳白色根4 ~ 8 条,根长约
0.2 cm,生根率40%。30 d左右根伸长为2~4 cm
时,炼苗 3~4 d,根变成乳红色时,即可移栽。
移栽时洗去附着在根上的培养基,将苗移入由腐
殖土和珍珠岩以 3∶1 的比率混合的基质中,浇
透水,盖上复有遮阳网的塑料小拱棚中。棚中温
度保持在 16℃左右,湿度 80% 以上。约 2 周后,
新芽伸长即可成活,成活率 9 0 % 以上。
5 意义与进展 十萼花系单科属植物,是稀有种,
在系统发育上较孤立,对研究中国喜马拉雅植物
区系特点、成分以及系统发育等均有重要的学术
价值。已列为国家二级保护植物。其木材色白、
质轻、细致,是良好的家具、箱板材。入秋红
叶片片,可给大地增添一色,用作庭园绿化树
种。由于十萼花分布区资源稀少,种质衰退,有
趋于濒危的可能。本文结果对该树种资源保存及
工厂化育苗提供了一条可能途径。十萼花离体培
养成苗尚未见报道。
图1 十萼花腋芽诱导丛生芽