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银中斑凤尾蕨的组织培养与植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 4 4 卷 第 l期 , 2 00 8 年 2 月
银中斑凤尾蔗的组织培养与植株再生
梁硕 ‘,2 , 吴坤林 ’, 陈之林 ‘, 郑枫 ’, 曾宋君 ’,* , 段俊 ’
, 中国科学院华南植物园 , 广州 5 10 6 5 0 ; 2 中国科学院研究生院 , 北京 10 0 0 3 9
T issu e C u ltu r e a n d R a Pid P r o Pa g a tio n o fPt eris m
u lt诉da P o ir. ev . Va r ie g a ta
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B e ijin g 10 0仍9, Ch in a
1 植物名称 银中斑凤尾藏(P te ri 、m ul t访da Po ir. cv ·
v a rie g a ta )
, 又名银白凤尾蔗 。
2 材料类别 成熟抱子 。
3 培养条件 抱子萌发培养基 : (l ) l/ ZM s ; 原叶
体增殖培养基 : (2 ) M s + 6 一B A 2 . 0 m g ·L 一’(单位下
同)+ N AA 0 . 5 , (3 ) MS + 6 一B A 1 . 0 + N AA 0 . 2 ; 抱子
体形成和丛生芽增殖培养基 : (4) M S+I A A 0 . 05 ,
(5 ) MS + K T 0
.
0 12 5 + IA A 0
.
0 5
,
(6 ) M S + K T 0
.
02 5 +
IA A 0
.
0 5
,
(7 ) M s + K T 0
.
0 5 + IA A 0
.
0 5 ; 生根培养
基 : (8 ) l/ ZM S + N A A 0 . 1 , (9 ) 1 / ZM S + N A A 0 . 5 ,
(10 ) 1/ZM S + NA A 1
.
0
,
(1 1) l/2 M S + NA A 2
.
0
,
(12 )
1 / ZM S + IB A 2
.
0
。 以上培养基中均加入 2 . 0 % 蔗
糖 、 0 . 5 9 ·L 一’活性碳和 5 . 0 9 ·L 一’琼脂(M B CH IE M 公
司生产 ) , p H 5 . 8 。 培养温度为(2 5 土 2) ℃ , 光照
时间 1 2 h . d 一’, 光照强度为 3 0科。林m o l· m 一 , · s 一‘。
4 生长与分化情况
4. 1 无菌材料的获得 剪取已成熟 、 饱满且假囊群
盖未开裂的饱子叶为外植体 。 用 7 5 % 酒精浸泡消
毒 10 一 15 5 , 立即转入 0 . 1% 升汞(加 6 滴吐温 )消
毒 3 m in , 无菌水冲洗 4 次 , 切成 1 e m x l e m 的
小块 , 叶面朝下接种到抱子萌发培养基(l) 中 。
4. 2 袍子体萌发 经过 巧~2 o d 的培养 , 培养基(l)
中能见到由抱子萌发而来的绒毛状丝状体 , 较松
软 ; 再经过 1 0 ~ 2 0 d , 形成绿色的球状原叶体 ,
随着培养时间的延长 , 原叶体体积会增大 。
4. 3 原叶体的增殖 将抱子萌发来的原叶体用消过
毒的小刀切成直径 5 m m 的小团 , 接种到原叶体
增殖培养基 (2) 、 (3) 上 , 原叶体能快速增殖 , 培
养 15 d 后 , 原叶体的体积能扩大 6 一 8 倍 , 其中
(2) 的增殖速度比(3) 快 。 在整个原叶体增殖过程中
培养基(2 ) 、(3) 中都不 能形成抱子体 。
4. 4 袍子体的形成和增殖 将继代的原叶体切成 5
n llll x s
~ 的小团
, 接种到抱子体形成和丛生芽增
殖培养基 (4) 一(7 )上 。 4O d 左右 , 原叶体上能形成
具有茎叶的抱子体 , 其中在培养基(6 )中出现的抱
子体最多 , 培养基(7 )中形成的抱子体次之 , (4) 、
(5 )中有抱子体出现 , 但形成的抱子体的数量相对
于(6 )、 (7 )少很多。 可以采用分株的繁殖方式将抱
子体进行扩增 , 从而得到大量的无菌抱子体 。
4. 5 生根与移栽 将已分化出苗的抱子体接种到生
根培养基(8 )一(12) 上 , 培养 20 d 可生根出瓶 , 生
根率均可达 10 0 % , 可见抱子体的生根是相对容易
的 。 银中斑凤尾蔗瓶苗出瓶可不经过炼苗 , 直接
从培养瓶中取出 , 洗去附于根上的培养基 , 用泥
炭土种植 。 浇透定根水 , 放置阴凉处养护 , 注
意保湿和保温 。 1 周后小苗可定根生长 , 成活率
在 9 5 % 以上 。 3O d 后可分株上盆种植 。
5 意义与进展 银中斑凤尾藏属凤尾蔽科凤尾藏
属 , 是该属井栏边草的一个变种 。 原产热带地区
和印度中部 , 现 己广泛栽培 。 株形美观 , 其小
叶在淡绿色的羽 叶中央有银灰色白斑条 , 叶色奇
特 , 可作为观 叶植物栽培 , 具有极高的应用价
值 。 常规繁殖 多采用分株法 , 繁殖系数低 , 采
用植物组织培养可快速获得大量种苗 。 与其同属
的大叶凤尾藏(及华和赵玉芬 20 0 1) 、 娱蛤草(尹怀
约 19 90) 及其抱子(徐艳等 2 0 04) 的组织培养己有报
道 , 但银中斑凤尾威的组织培养与快速繁殖尚未
见报道 。
参考文献
及华 , 赵玉芬(2 0 0 1) . 大叶凤尾截的离体培养及植株再生 . 植物生
理学通讯 , 3 7 (4 ) : 3 0 8
徐艳 , 石雷 , 刘燕 , 李东(2 0 0 4) . 砷超富集植物—娱蚁草抱子的无菌培养 . 植物生理学通讯 , 4 0 (6) : 7 玛
尹怀约(1 9 9 0) . 娱蛤草的组织培养 , 四川师范学院学报(自然科学
版), 12 (l): 2 0一 2 2
收稿 2 0 0 7 一 1 1一 0 5 修定 2 0 0 8 一0 1 一0 8
资助 广东省科技攻关计划(2 0 0 4 B 2 0 9 0 1 0 0 8) 和广州市重大科
技攻关计划(2 0 0 4 2 1 一 E o 0 4 1 )。
通讯作者(E 一m a il : z e n g s o n g ju n @ s e b g . a e . e n : T e l :
0 2 0

3 7 2 5 2 9 9 0 )