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虎颜花的无菌播种和试管育苗



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第6期,2006年12月 1135
收稿 2006-07-27 修定  2006-10-23
资助 广州市重大科技攻关计划项目(2004Z1-E0041)。
* 通讯作者(E-mail: zengsongjun@scib.ac.cn, Tel: 020-
37252990)。
虎颜花的无菌播种和试管育苗
李龙娜1,2 曾宋君1,* 吴坤林1 陈之林1 段俊1
1 中国科学院华南植物园,广州 510650;2 中国科学院研究生院,北京 100039
Asepsis Sowing and in vitro Propagation of Tigridiopalma magnifica C. Chen
LI Long-Na1,2, ZENG Song-Jun1,*, WU Kun-Lin1, CHEN Zhi-Lin1, DUAN Jun1
1South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China; 2Graduate University of the Chinese
Academy of Sciences, Beijing 100039, China
1 植物名称 虎颜花(Tigridiopalma magnifica C.
Chen)。
2 材料类别 种 子 。
3 培养条件 种子萌发培养基:(1) MS;(2) 1/2MS
(大量元素用量减半); (3) 1/4MS (大量元素用量为
1/4); (4) 1/8MS (大量元素用量为1/8); (5) 1/4MS+
NAA 0.5 mg·L-1 (单位下同); (6) 1/4MS+100 mL·L-1
椰子乳。丛生芽增殖培养基:(7) MS+6-BA 10.0+
NAA 1.0;(8) MS+6-BA 5.0+NAA 0.5。壮苗培养
基:(9) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2;(10) MS+6-BA
1.0+NAA 0.1。生根培养基:(11) MS+NAA 0.5;
(12) MS+NAA 0.5+0.1%活性炭;(13) MS+NAA 0.5+
0.2% 活性炭。以上培养基均附加 MS 培养基的维
生素和肌醇成分、20 g·L-1蔗糖和6 g·L-1琼脂,pH
5.6~5.8,培养温度为(25±2)℃,光照强度27~36
mmol·m-2·s-1,光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 开花时交叉授粉,取授粉后
5 个月成熟而未开裂的果实,自来水洗净后,用
70% 酒精表面消毒30 s,0.1% 升汞消毒10 min,
无菌水冲洗5次。将荚果吸干水分后,切开荚果,
将种子散落到培养基上。
4.2 种子萌发 播种到培养基(1)~(6)上的种子,其
萌发率在(3)上最高,40 d 时达到 75% 以上;在
(4)中次之,50 d 时约为 70%;萌发后小苗长势
差;在(5)、(6)中稍差,50 d 时约为 50%,但小
苗长势较好;在(2)中更差,50 d 时约为 20%;在
(1)中最差,60 d 时仅为 10% 左右。
4.3 丛生芽增殖 将诱导出的小苗切根后,培养在
增殖培养基(7)和(8)中。培养基(7)中增殖速度
快,增殖倍数约为 3.5,但多次继代后芽生长较
密;(8)中的增殖倍率约为 2.8,芽长势较好。
4.4 壮苗培养 将较细弱的芽转移到培养基(9)、
(10)中均有较好的壮苗效果,但(9)中不定芽仍能
进行少量增殖,最好采用培养基(10)。
4.5 生根培养 将经过壮苗培养、1.5~2.5 cm高的
丛生芽切成单芽后,转入培养基(11)~(13)上。
(11)中生根率约为 75%,但长出根后膨化,不伸
长,无根毛;(12)中为 95% 以上;(13)中为 90%
左右,根部生长正常。
4.6 试管苗的移栽 生根培养30 d后,转移到自然
光下炼苗5 d,将小苗从瓶中取出,洗净培养基,
移入泥炭、蛭石和河沙(3:3:1)的混合基质中,保
持适当通风和足够的湿度。1 周左右,试管苗可
恢复生长,(12)、(13)中根系生长正常的小苗,成
活率达 95% 以上,而(11)中根系生长不正常的成
活率约为 7 5 %,无根的约为 2 0 %。
5 意义与进展 虎颜花又名大蓬莲、熊掌等,是野
牡丹科虎颜花属唯一的种,主要分布在广东省阳
春鹅凰嶂自然保护区一带,分布狭窄。虎颜花叶
片硕大,叶形美观,耐阴性强,花蕾小巧玲珑,
是一种优良的观叶花卉。虎颜花数量极为稀少,
是我国广东省特有的珍稀濒危植物,已列入中国
稀有濒危植物保护名录。虎颜花结实少,种子细
小,难萌发;人工栽培靠分株繁殖,繁殖速度
慢;而用叶片进行组织培养时,极易褐变。我
们用无菌种子播种和试管育苗已获得了大量的试管
苗,这对虎颜花的资源保护和商业化生产开发可
能有些参考价值。虎颜花的无菌播种和试管育苗
尚未见报道。