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黄花小山菊的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第5期,2006年10月 907
收稿 2006-04-03 修定  2006-05-17
资助 北京市自然科学基金(6022014)、国家自然科学基金
(30271103)、北京林业大学研究生培养基金。
* 现工作单位:北京 21 世纪城市生态研究院(E-mail:
jillyfly@163.com)。
黄花小山菊的组织培养和快速繁殖
尹佳蕾* 赵惠恩
北京林业大学园林学院,北京 100083
Tissue Culture and Rapid Propagation of Dendranthema hypargyrum (Diels)
Ling et Shih
YIN Jia-Lei*, ZHAO Hui-En
College of Landscape Architecture, Beijing Foresty University, Beijing 100083, China
1 植物名称 黄花小山菊[Dendranthema hypargyrum
(Diels) Ling et Shih]。
2 材料类别 茎尖。
3 培养条件 基本培养基为 MS。丛生芽诱导和增
殖培养基:MS+6-BA 1 mg·L-1 (单位下同)+NAA
0.01;MS+6-BA 3+NAA 0.01;MS+6-BA 5+NAA
0.01。生根培养基:1/2MS+NAA 0.01;1/2MS+
NAA 0.03;1/2MS+NAA 0.05。以上各培养基均
含 3% 蔗糖和 0.6% 琼脂,培养温度为(25±1)℃,
光照时间14 h·d-1,光强 20~40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体的灭菌与接种 取黄花小山菊茎尖,长
约1 cm,流水冲洗2~3 h,70% 酒精消毒30 s,
无菌水冲洗4次,再经0.1% HgCl2消毒 4~5 min,
无菌水冲洗4次,备用。切取茎尖组织,长0.5~
0.6 cm,接种于丛生芽诱导和增殖培养基中,每
瓶接种 3 个外植体,每种培养基接种 10 瓶。
4.2 丛生芽的诱导与增殖 接种大约2周后,可长
出愈伤组织,1 个月后,可分化出大量的丛生
芽。将丛生芽接种于诱导和增殖培养基上,每种
培养基接种 10 瓶,使其增殖,一般 15 d 后可长
出丛生芽;取丛生芽转接于新的诱导和增殖培养
基上,使之扩繁到所需数量。3 种诱导和增殖培
养基均可分化出丛生芽,但不同浓度的生长调节
物质诱导和增殖率不同:MS+6-BA 1+NAA 0.01
对黄花小山菊的诱导分化最好,达到 95%,且丛
生芽多,生长健壮,叶色绿;而 6-BA 浓度为 3
和 5 mg ·L-1 时,诱导率分别为 80% 和 40%,且
丛生芽较少,叶色黄。增殖培养基效果与诱导分
化培养基相同,因此,MS+6-BA 1+NAA 0.01 为
丛生芽诱导和增殖较适宜的培养基。
4.3 诱导生根 将丛生芽分成单株,分别接种于生
根培养基上,进行生根诱导,20 d后可长出大量
根。3 种添加不同浓度 NAA 的生根培养基上都可
诱导黄花小山菊生根,但诱导生根的情况不同:
NAA浓度为 0.05 mg·L-1 时生根长而多,生根率为
96%,且生长健壮;NAA 为 0.03 和 0.01 mg·L-1
的培养基生根率分别为 9 0 % 和 8 2 %,根生长健
壮。
4.4 炼苗和移栽 将生根后的试管苗瓶于中午移至
温室内,封口炼苗3 d,再把封口膜的皮套松开,
3 d后把封口膜打开,再炼苗3 d。用清水洗净根
部琼脂,栽种至灭过菌的河沙中,浇透水,喷施
0.5%绿亨2号(北京北农绿亨科技发展有限公司产
品),以促进生根和防止烂根,按常规管理,10 d
后,移栽成活率达 96%,扩繁数量约为 150 株。
5 意义与进展 从狭义上讲,全球菊属植物约有39
种,除紫花野菊间断分布在欧亚大陆山区外,其
它种类多分布在我国和日本以及前苏联,我国菊
属植物种类约有 22 种。目前,我们已经收集到
绝大多数的国产野生种类,发现其中高海拔地区
原产的菊属植物,尤其是高山植物如黄花小山
菊、紫花野菊在北京地区露地栽培适应性很差,
尤其是越夏很难,这就增加了菊属植物基因库的
保存难度,有时不得不多次到原产地再引种收
集。黄花小山菊组培快繁的成功,为今后黄花小
山菊甚至更多的菊属植物的进一步保存、研究和
利用提供了有益的借鉴。黄花小山菊的组织培养
与快繁技术尚未见报道。