全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第1期，2006年2月 169
提高卷叶贝母组织培养的植株再生率的研究
刘帆 倪苏* 李方安
四川农业大学农学院，四川雅安625014
收稿 2005-01-31 修定 　 2006-01-04
资助　 四川农业大学农学院基金(001060)。
*通讯作者(E-mail: ns13@163.com, Tel: 0835-2882449)。
卷叶贝母(Fritllaria cirrhosa D. Don.)，别名
川贝母。
以卷叶贝母种胚作外植体，MS 为基本培养
基。将卷叶贝母种子先用 0.1% 升汞溶液消毒 15
min后，放入10 mg·L-1 GA3 溶液中浸种48 h，破
除休眠。取出种子，在超净工作台上，用 A 字
夹除去种皮，按常规表面灭菌(李文生等 2005)
后，用解剖针小心取出种胚，将其接入愈伤组织
诱导培养基(1)~(6)中：(1) MS+6-BA 2.0 mg·L-1 (单
位下同)+NAA 1.0；(2) MS+6-BA 2.0+NAA 0.5；
(3) MS+6-BA 2.0+NAA 0.25；(4) MS+2,4-D 2.0+
KT 1.0；(5) MS+2,4-D 2.0+KT 0.5；(6) MS+2,4-
D 2.0+KT 0.25。每种培养基共接种50个种胚(每
个处理10瓶，每瓶接种5个种胚)。经 35 d培养
后，将培养基(2)中得到的黄绿色愈伤组织转入丛
生芽诱导培养基(7)、(8)中：(7) MS+6-BA 2.0+
NAA 0.5；(8) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2。每种培
养基共接种20块(每个处理10瓶，每瓶接种2块
0.5 cm×0.5 cm的愈伤组织)，30 d后统计丛生苗
发生率。待分化苗长至 4~5 cm 高时，以 2~3 苗
为一丛转入生根培养基(9)~(11)中：(9) 1/2MS+
NAA 0.2；(10) MS+IBA 0.2；(11) MS+IAA 0.2。
15 d后统计每种处理50株小苗的生根情况。培养
基(1)~(6)中添加100 mg·L-1的水解乳蛋白；所有
培养基中均加30 g·L-1蔗糖和8 g·L-1琼脂，pH 5.4~
5.8。培养温度(18±2)℃，光强1 500 mmol·m-2·s-1，
光照时间10~12 h·d-1。
试管苗移栽前先将瓶口敞开，置于室温下炼
苗 3~5 d。取出苗，洗净培养基，假植于装有基
质为蛭石和珍珠岩(1∶3)的小纸杯中(基质用0.3%
多菌灵混合搅拌消毒10 min)，每隔5 d喷洒1次
1/2MS 营养液，在20℃左右条件下生长20 d 后，
统计每种处理50株小苗成活率。得到如下结果(表
1~3):
表1 不同培养基上的种胚愈伤组织诱导率
编号 培养基 接种数/个 愈伤组织诱导率 /% 愈伤组织生长状况
1 MS+6-BA 2.0+NAA 1.0 50 77bB 黄绿色，较致密
2 MS+6-BA 2.0+NAA 0.5 50 95aA 黄绿色，致密
3 MS+6-BA 2.0+NAA 0.25 50 80bB 黄绿色，致密
4 MS+2,4-D 2.0+KT 1.0 50 90abA 淡黄色，致密
5 MS+2,4-D 2.0+KT 0.5 50 75bB 黄白色，较疏松
6 MS+2,4-D 2.0+KT 0.25 50 56cC 黄白色，疏松
　　数据经方差分析后，用 SSR 法多重比较。小写字母表示在 0.05 水平上差异显著，大写字母表示在 0.01 水平上差异显著。表
3 同此。
·小经验·
1. 卷叶贝母种胚愈伤组织诱导率为 56%~
9 5 %，不同培养基存在显著差异，以附加 6-BA
2.0+NAA 0.5的 MS 培养基上的诱导率最高，愈伤
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组织生长最好。在附加2,4-D 2.0+KT 0.25的 MS
培养基上诱导率最低(表 1)。
2. 6-BA和NAA 配合使用有利于小鳞茎的诱导
与增殖，以培养基(8)的诱导和增殖效果较好(表
2)。
3. 0.2 mg·L-1 的 IBA、IAA 和 NAA 均能促进
卷叶贝母试管苗的生根(刘金郎 2005)，其中 IBA
效果最好，小苗成活率可达 80%，而 IAA 和 NAA
诱导生根的小苗成活率仅为 50% 和 35% (表 3)。
4. 目前，卷叶贝母组织培养的外植体多采用
鳞茎。不同时间采集的鳞茎，其再生鳞茎的频率
不同，如生根期采集的鳞茎再生率为 7.8%，出
苗盛期为 48.3%，开花期为 15.9%，果熟期为
0.1% (蔡朝晖等1998)。本文以卷叶贝母种胚作外
植体建立起的快繁体系，繁殖系数高，其鳞茎再
生率可达 60%~65%，比出苗盛期鳞茎的再生率高
出 12%~15%。不经低温处理，在(18±2)℃下即
表3 不同培养基上的生根诱导率和小苗成活率
编号 培养基 生根率/% 平均根长/cm 小苗成活率 /%
9 1/2MS+NAA 0.2 80cC 3.5NS 35c
10 MS+IBA 0.2 95aA 3.7NS 80a
11 MS+IAA 0.2 90bAB 3.7NS 50b
表2 不同培养基上的小鳞茎再生和增殖
编号 培养基 小鳞茎诱导率 /% 增殖系数 小鳞茎生长状况
7 MS+6-BA 2.0+NAA 0.5 90NS 4.5NS 出芽快，分化较多，健壮
8 MS+6-BA 2.0+NAA 0.2 95NS 5.0NS 出芽快，分化多，健壮
　　增殖周期为 20 d。数据经平均数差异显著性检验不显著。
图1 卷叶贝母的生根苗
可诱导生根(图 1)。
参考文献
李文生, 牛爱国, 闫国华, 张晓明, 周宇, 姜立杰, 张开春(2005). 樱
桃种间杂交种的幼胚培养. 植物生理学通讯, 41 (2): 196
刘金郎(2005). 植物生长调节剂在彩色马蹄莲组培与快繁中的生
理效应. 植物生理学通讯, 41 (2): 185
蔡朝晖, 李萍, 高山林(1998). 中药贝母的组织培养研究概况. 中
草药, 29 (4): 274~277