全 文 ：植物生理学通讯 第 40 卷 第 1期，2004 年 2 月 37
牡丹花水提液对氧自由基的清除作用
郭香凤1 史国安2,*
河南科技大学1食品与生物工程系, 2农学院, 洛阳 471003
提要 牡丹花水提液加入 O2-.和.OH 的产生及检测系统中，能显著降低介导的氮兰四唑（NBT）的光化学还原和.OH 作
用下的水杨酸羟基化作用。这提示牡丹花水提液具有显著的清除氧自由基的活性，红色牡丹花水提液清除氧自由基的效
能高于浅色花。
关键词 牡丹花水提液; 超氧自由基（O2-.）; 羟自由基（.OH）; 清除作用
The Scavenging of Oxygen Free Radical by the Water Extracts of Peony Flowers
GUO Xiang-Feng1, SHI Guo-An2,*
1Department of Food and Bio-engineering, 2College of Agriculture, Henan University of Science & Technology, Luoyang 471003
Abstract When added to the generating and detecting systems of superoxide radical (O2
-.) and hydroxyl radical
(O2
-.) ,the water extract of peony flowers inhibited light chemical reduction of nitroblue tetrazolium (NBT)
mediated by O2
-. and reduced hydroxylation of salicylate at .OH condition. It shows that the water extract of
peony flowers presented scavenging of oxygen free radical, the water extract of deep red colored flower was
more effective than that of a light colored flower.
Key words water extract of Paeonia suffruticosa flower; superoxide radical (O2
-.); hydroxyl radical (.OH);
scavenging effect
收稿 2003-02-18 修定　 2003-06-13
资助　 河南省重大科技攻关项目（991050048）。
* 通讯作者（E-mail:shiguoan@haust.edu.cn, Tel:379-
4 2 8 3 5 5 2）。
自由基是生物体内生化反应的普遍中间介质
或称非特异性调节剂。在正常生理情况下，活性
氧的产生与清除可维持在一个无害的极低水平，
但在衰老、应激、疾病的情况下却发生活性氧对
重要生物分子的损伤[1]。所以适当补充外源性抗
氧化剂或给予机体内源性抗氧性物质再生，可以
改善这一状况。各种水果、蔬菜、花卉的清除
自由基作用已多有报道[2～6]。
牡丹是原产我国的名贵花卉，具有较高的观
赏和药用价值。《本草纲目》记载牡丹花是清热
解毒的传统药材，其味苦、性平，具有和血、
生血、凉血之功效，主治血中伏火、除烦热。
现代药理学研究表明，牡丹花含紫云英苷、丹皮
花苷、缔纹天竺苷以及多种人体必需的氨基酸、
微量元素和维生素。牡丹花初放时采收，鲜品或
晒干泡茶饮用，其对自由基的清除作用未见报
道。本文测定了牡丹花水提液对氧自由基的清除
效能，以期为进一步利用牡丹花提供参考。
材料与方法
材料为牡丹（Paeonia suffruticosa）的花，
有白（凤丹白）、浅粉（青龙卧粉池）、粉红
（迎日红）、红（洛阳红）、紫红（藏枝红）
5种。准确称取 10 g 鲜花花瓣，加 100 mL 去离
子水，加热回流提取 20 min，冷却后过滤，滤
液即为牡丹花的水提取液（以鲜样计每毫升提取
液相当0.1 g鲜花），存冰箱备用。所用试剂氮蓝
四唑（N B T）、甲硫氨酸（M e t）、核黄素（R F）、
H2O 2、FeSO 4、水杨酸钠等均为国产生化试剂或
分析纯。 所用仪器: 755B型紫外-可见光分光光度
计为上海分析仪器厂产品，pHS-3C型数字酸度计
为上海第二分析仪器厂产品。
O2-.的产生和检测按Stewart和Bewley[7]的方法
进行。3 mL 反应体系中含13 mmol.L-1 Met、75
μ mol.L-1 NBT、100 mmol.L-1 EDTA、2 μ mol.
L-1 RF、50 mmol.L-1 PBS（pH 7.8）及不同体积
的牡丹花水提液。25℃下照光20 min 后，测 560
nm 处的吸光值。实验重复4次。以牡丹花水提液
抑制NBT 光还原的效应表示其清除O2-.的能力。
.OH的产生与检测按Smirnoff和Cumbes[8]的
方法并加以改进。3 mL反应体系中含0.15 mmol.
L-1 FeSO4、6 mmol.L-1 H2O2、2 mmol.L-1 水杨酸
钠及不同体积的牡丹花水提液。加入 H2O2 启动反
应，37℃保温 1 h 后，加 0.12 mL 11.0 mol.L-1
H C l 终止反应。水杨酸羟基化产物萃取入乙醚
中，测定 510 nm 处的吸光值。实验重复 4 次。
以牡丹花水提液竞争性抑制.OH 引发的水杨酸羟
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率随水提液用量的增加而升高。
本文结果表明，5 种颜色的牡丹花水提液对
氧自由基O2-.和.OH有显著清除作用，对O2-.的清除
活性强于对.OH 的清除作用。其中红色牡丹花水
提液清除氧自由基活性优于浅色牡丹花水提液。
表明牡丹花可能成为一种新的高效自由基清除剂，
其清除氧自由基的性能可能与其药用作用相关。
这一结果对于人们综合利用牡丹花[9]，发挥其保
健功能具有一定的指导意义。
参考文献
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食品工业科技，2002，23(7):10～12
表1 牡丹花水提取液对O2-.的清除效应
Table 1 The scavenging effect of water extract from peony flowers on O2-.
不同体积牡丹花水提液对O2-.的清除效应/%
品种 CI50/μL
20 μL 40 μL 80 μL 120 μL 160 μL 200 μL
凤丹白 － 8.5 40.7 72.7 82.9 84.5 117.6
青龙卧粉池 － 13.5 46.6 74.7 81.5 84.8 106.6
迎日红 23.1 63.8 88.2 88.6 87.3 － 37.5
洛阳红 31.5 79.2 90.6 92.8 90.5 － 26.5
藏枝红 8.5 40.5 82.0 85.0 86.0 － 71.3
表2 牡丹花水提取液对.OH的清除效应
Table 2 The scavenging effect of water extract from peony flowers on .OH
不同体积牡丹花水提液对.OH的清除效应/%
品种 CI50/μL
40 μL 80 μL 160 μL 240 μL 320 μL 400 μL
凤丹白 11.1 14.4 32.2 40.0 47.8 56.7 332.7
青龙卧粉池 10.2 20.5 25.0 35.2 37.5 46.6 433.5
迎日红 18.9 21.1 33.3 45.6 51.1 60.6 303.9
洛阳红 13.3 20.2 23.3 30.0 48.3 62.2 338.1
藏枝红 15.9 20.5 43.2 46.6 60.2 71.6 251.7
基化作用的效应表示其清除.OH 的能力。
CI50 表示牡丹花水提液清除 O2-.、.OH 达到最
大活性一半时的用量。
结果与讨论
1 对O2-.的清除作用
分别向O2-.分析体系中加入不同体积的牡丹花
水提液，测定体系的吸光值变化。表 1 结果表
明，5种不同颜色的牡丹花水提液对O2-.表现出较
强的清除作用，随着反应体系中牡丹花水提液用
量的增加，清除 O2-.的能力也随之提高。
2 对.OH的清除作用
从表2 可以看出，牡丹花水提取液用量与其
对.OH 清除效率之间也呈量效关系，对.OH 抑制
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