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蕊帽忍冬的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 4 4 卷 第 l期 , 2 00 8 年 2 月
蕊帽忍冬的组织培养和快速繁殖
孙朝晖 ’,* , 尹会荣 2
, 河北省林业科学研究院 , 石家庄 0 5 0 0 6 1 ; 2 石家庄市园林规划设计研究院 , 石家庄 0 5 0 0 1
T issu e C u ltu r e a n d R aPid P r o Pa g a tio n o fLo
n ic era Pile a ta O liv
·
SU N Zhao

H u il
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R o n g Z
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Sh ijia zh u a n g 仍0 011 , Ch in a
1 植物名称 蕊帽忍冬(L o n ic e ra 尸ile a ta o liv . )。
2 材料类别 带腋芽的茎段 。
3 培养条件 芽诱导培养基 : (l ) 1/2 M s + 6 一B A 1 . 0
m g. L

,
(单位下同)+I B A 0 . 1 ; 芽增殖培养基 : (2)
M S+ 6

B A 1
.
5 + IB A 0
.
3 ; (3)M S+ 6

B A 2
.
0+ IB A 0
.
3 ;
(4 )M S + 6

B A 3
.
0 + IB A 0
.
3 ; (5)M S + 6

B A 3
.
0 + IB A
0
.
1 ; (6 ) M S + 6

B A 4
.
0 + IB A 0
.
1 ; 生根培养基 :
(7 ) l/ZMS
; (8 ) 1/ZMS + IB A 0
.
2 ; (9 ) l/ ZM S + N AA
0
.
2
。 上述培养基中均添加 0 . 5 % 琼脂 , 芽诱导 、
芽增殖培养基均添加 3 % 蔗糖 , 生根培养基添加
2 % 蔗糖 , pH 5 . 8 。 光照强度 50 林m o l·m 一, · s 一’, 光
照时间 10 h ·d 一 , 。 培养温度 2 0 一 2 7 oC 。
4 生长与分化情况
4. 1 无菌材料的获得 春季取蕊帽忍冬当年生嫩枝 ,
去除叶片和嫩尖 , 将茎段截成 5 c m 左右长 , 放
入容器 , 洗洁精水浸泡 10 m in , 轻轻摇动 , 自
来水冲洗干净 ; 置超净工作台上 , 用 0 . 1% 升汞
消毒 1 m in , 无菌水冲洗 2 次 , 切除两端接触药
液的部分 1~2 r o n比, 再截成带 1砚对腋芽的 1一1 . 5 c m
长的茎段 , 接入培养基(l) 中 。 s d 时即有对生腋
芽萌动 , 40 d 时腋芽可伸长至 3 c m , 将伸长 1 c m
以上的腋芽切割为 1一 1 . 5 c m 的茎尖和带 1科 对腋
芽的茎段接种于培养基(2 )一(6) 中 。
4. 2 增殖培养 茎段在培养基(2 )一(6 )中 , 10 d 左
右 , 茎的下切 口膨大形成愈伤组织 , 随着培养时
间的延长 , 愈伤组织随之生长 , 但不能分化 出
芽 ; 巧 d 时基部腋芽萌生 3 m m 长的单芽或 2 个
对生芽 , 继续培养 , 具有多对叶腋的茎段其它腋
芽部位也萌生单芽或对生芽 ; 4 5 d 时 , 腋芽可伸
长至 4 c m 。 培养基(2 )上的腋芽粗壮 , 叶片大 ,
有枯尖现象 , 增殖系数为 2 ; 培养基(3 )上枯尖现
象较严重 , 枯尖发生后 , 下面未枯的叶腋则萌生
单芽或对生芽 , 增殖系数为 1 . 7 5 ; 培养基(4) 一(6)
上枯尖现象极少 , 偶有发生 , 增殖系数分别为
2
.
6

3
.
4

2
.
1
, 腋芽在培养基(6)中最细弱 , 叶片
也较小 。 茎尖在培养基(2 )代6) 中巧 d 时顶芽伸长到
2 e m
,
4 5 d 时伸长至 4 一6 e m , 培养基(2 )、 (3)有
5 0% 以上无腋芽萌生 , 培养基(4) 一(6) 有 90 % 以上
于中下部叶腋处萌生单芽或对生芽(图 1)。 初代培
养时 , 培养基(2) 中茎的下切 口愈伤组织处会生有
1 。m 左右的白色或浅绿色的不定根 1一2 条 , 培养
基(3) 偶有生根 , 培养基(4 )一(6 )不产生根 。 随着
继代次数的增加 , 培养基(2) 全部长 3 条以上 、
0
.
3 一2 。m 长的根 , 且生有须根(图 2 ) ; 培养基(3 )一
(5)也长出 0 . 2司 . 5 c m 的根 1一2 条 ; 培养基(6)未见
生 根 。
4. 3 瓶内生根 取高度 2 c m 左右的带顶芽茎段 , 接
于培养基(7 )一(9) 中诱导生根 , 培养基(7) 最早生
图 1 蕊帽忍冬的初代培养
收幢 2 0 0 7 一 1 1 一0 1 1曦足 2 0 0 7 一 1 2 一2 1E 一m a il: su n z ha o h u ih b O3 @ s o h u . e o m ; T e l : 0 3 1 1 -
8 7 6 8 4 9 8 0
植物生理学通讯 第科 卷第 1 期 , 20 0 8 年 2 月
图 3 蕊帽忍冬的瓶内生根培养
图 2 蕊帽忍冬的继代增殖
根 , 7 d 时即可见到白色的根原基 , 10 d 时根长
1~3 ~
, 生根率达 80 % 以上 。 巧 d 时培养基(7) 一
(9 )生根率均达 10 % , 至 4O d 时苗高可达 5 cm 以
上 , 培养基(7 )根较细 , 平均有 3 条根 , 长 3. 4 。m ;
培养基(8 )有 6 条根 , 长 2 . 4 c m ; 培养基(9 )根粗
壮 , 须根多 , 平均 6 条根 , 长 4 . 2 c m (图 3) 。
4. 4 瓶外生根 将未经过生根诱导的试管苗 , 经温
室 自然光下炼苗 3 d , 剪取高 3 c m 左右的芽苗 ,
速蘸 50 、 20 0 、 25 0 m g ·L 一 , 的 NA A 滑石粉浆扦插
在蛙石基质中 , 以试管苗直接扦插入蛙石为对
照 , 塑料薄膜搭成的拱棚中保湿 , 10 d 时即有植
株生根 , 3 5 d 后生根率分别为 10 0 % 、 9 1 . 1% 、
9 8
.
9 %

4. 5 炼苗与移栽 将生根的试管苗移出培养室 , 温
室炼苗 3 d 后 , 洗净培养基 , 栽入蛙石基质中 ,
覆盖塑料薄膜保湿 。 10 d 以后逐渐揭开薄膜 , 30 d
时成活率为 10 % , 移至装有营养土的营养钵中继
续炼苗 30 d 后 , 栽植入大田 。 瓶外生根苗在蛙
石中生长 3 5 d 后 , 移栽入营养钵 , 炼苗 30 d 栽
植入大 田 。
5 意义与进展 蕊帽忍冬属忍冬科忍冬属植物 , 分
布于陕西 、 湖北 、 湖南等地 , 直立灌木 , 常绿
或半常绿 。 叶色浓绿 , 密集 。 枝条萌发力强 ,
纤细柔软 。 对环境的适应性强 , 具有很好的观赏
价值 , 是很好的绿篱和盆景材料 , 又可供药用 。
采用组织培养快速繁殖技术 , 可为缺乏充足插穗
地区引进此种植物提供技术参考 。 蕊帽忍冬的组
织培养和快速繁殖尚未见报道 。