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植物组织培养简报摘编



全 文 :植物生理学通讯 第 41卷 第 1期,2005年 2月68
植物材料和外植体 培养条件 结果 作者(单位)
收稿 2004-01-05
修定   2004-11-18
*E-mail: qin-
ying_zhang
@sina.com,
Te l : 0 2 2 -
87402171
梅花抗寒品种“花
蝴蝶”(Prunus mume
‘Hua Hudie’)
不同时期的一年生
枝条
  培养基(1)~(9)以
W P M 为基本培养
基。丛生芽诱导培
养基: (1)6-BA 0.5
mg ·L-1(单位下同)+
NAA 0.01; (2)6-BA
1+NAA 0.1; (3)6-BA
2+NAA 0.2; (4)6-BA
3+NAA 0.3; 增殖培
养基: (5)6-BA 0.5+
NAA 0.05; (6)6-BA
0.5+NAA 0.1; (7)6-
BA 0.5+NAA 0.5;
(8)6-BA 1+NAA 0.1;
(9)6-BA 0.5+NAA
0.05。生根培养基:
(10)1/2MS+IBA 0.5;
(11)1/2MS+IAA 0.5;
(12)1/2MS+NAA 1;
( 1 3 ) 1 / 2 M S + N A A
0 . 5。培养基加 30
g·L-1葡萄糖、6 g·L-1
琼脂,pH 5.8。培
养温度(2 3 ±2 )℃,
光照度1 500 lx左右,
光照14 h·d-1。
  分别在春季以嫩梢(室内萌发)、略萌动的带芽茎段、新
梢(室外生长)为外植体,采用 0.1% 升汞消毒 1~4 min,室
内培养萌发的嫩梢容易消毒(升汞消毒时间为1.5 min),诱导
生长情况最好。外植体接种 7 d 左右开始萌发,其中培养基
(2)~(4)中的诱导率最高。后两种培养基诱导的试管苗玻璃化
严重,不能继代培养,故用(2)为诱导培养基。将丛生芽分
成单株或 2 个苗一同接种于继代培养基中,增殖系数均在 4
以上,但试管苗的高度差异很大,其中 M S 中试管苗高于
W P M ,6 - B A 对增殖系数影响显著,浓度越高增殖系数越
高,但若长期使用培养基( 8 )的试管苗会出现严重玻璃化。
6-BA 与 NAA 的比例对增值系数影响不显著,但明显影响茎
段基部愈伤组织的生长,二者比例为 5∶1 以上时,茎段基
部会出现大量愈伤组织,从而严重影响试管苗的质量。综
合考虑,较适合的培养基是(5 )。用 MS 培养几代后,改用
WP M 继代 1 ~ 2 次,对试管苗生长有利,另外用“( 5 )培养
3代 +(8)培养 1代”的循环继代方式可提高整体的增殖系数。
生长素种类对生根影响显著,N A A 的效果最佳,生根率达
到96%。培养基(12)的生根茎段基部长出愈伤组织较多;培
养基(13)上也有少量愈伤组织,对炼苗移栽影响不大。试管
苗出瓶前7 d,打开瓶盖。移栽基质用珍珠岩、草炭和沙(1∶
1∶1 )的混合物,并经高温消毒。定时喷含有 W P M 大量元
素的 800 倍的百菌清(江苏新沂,利民化工责任有限公司生
产)溶液。移栽后温度控制在 23℃左右,湿度为80 %~ 9 0 %。
30 d 后的成活率为 92%。
张秦英1,* 陈俊愉2(1天
津大学农业与生物工
程学院, 天津300072;
2 北京林业大学园林
学院,北京 100083)
收稿 2004-02-26
修定 2004-11-08
资助 国家“十五”
科技攻关课题
(2004BA713B
09-05)。
* 通讯作者(E-
mail:hetaobian-
tao@ 163.com,
Te l: 02 9-
88103505)。
普通扁桃(Prunus
amygdalus)美国品
种“Missio n”
六年生新梢顶芽或
茎段
  芽诱导培养基:
(1)G+6-BA 2.0 mg·L-1
(单位下同)+IBA 1.0;
不定芽增殖培养基:
(2)G+6-BA 1.0; 壮
苗培养基: (3)MS+6-
BA 0.5+IBA 0.125,
(4)G+6-BA 0.5+IBA
0 . 1 2 5;生根培养
基:(5)B5+IBA 120+
柠檬酸 2 0 0 + A C
0.1%, (6)B5。培养
基均含0.56% 琼脂,
pH 5.8, 培养基(1)~
(4)含 3% 蔗糖,培
养基(5)、(6)含 2%
蔗 糖 。 培 养 温 度
26~28℃,光照 14
h ·d -1,芽的诱导与
增殖、壮苗培养时
光照度2 000 lx,转
入生根培养基后光照
度3 000 lx。
  将采集的六年生新梢顶芽或茎段在流水中冲洗 3 0 ~ 6 0
m in,在无菌条件下用 75% 酒精溶液浸 30 s,放入 0.1%
HgCl2 溶液灭菌 15 min,用无菌水冲洗 5~6 次,剥取 0.2 cm
茎尖或切取 0.3~0.5 cm 茎段接种于芽诱导培养基(1)上。培
养 7 d 后,顶芽及腋芽开始萌动生长;30 d 后,芽伸长至
1~2 cm,产生 2~3 个丛生芽。将上述丛生芽分割,转接到
培养基(2)上继代增殖。30 d 后,每个茎段或芽可分化产生
6~10 个不定芽。将其转入壮苗培养基(3)、(4)中进行交替培
养,在(3)或(4)中培养 30 d 后叶色浓绿,茎秆较粗壮,可
用作诱导生根。采用培养基(3)或(4)单一继代培养,继代 3
次后,培养至20~25 d,组培苗生长变缓,茎秆变细,叶片发
黄,发展为黄化苗,若不及时转瓶会延缓生长甚至死亡。
随培养代数的增加,黄化苗出现时间提前,数量增多。在
培养基(3)、(4)中交替一代培养可有效延迟黄化苗发生时间至
40 d 后,并提高繁殖系数,试管苗生长健壮,整齐度好。
在培养基(3)、(4)中培养的试管苗长至 2 cm 左右时,将较健
壮的无根苗分成单株,转至生根培养基(5)中,暗培养9 d后再
转入生根培养基(6)中。4~7 d 后开始生根,每株4~6条根,根
色白且粗壮,生根率可达 90 % ~ 9 5 %。2 周后在自然光下开
瓶炼苗 6~8 d,然后将试管苗基部琼脂洗净,栽植至经冲洗
过的蛭石中,浇透水后置于 26~28℃、空气相对湿度保持在
80 % 以上的温室中,初期用 1/ 2M S 营养液浇洒,新叶长出
后移入大田。移栽成活率可达 8 5 % 以上。
马玉华 郭春会*(西北
农林科技大学园艺学
院,杨凌 712100)
植物组织培养简报摘编
植物生理学通讯 第 41卷 第 1期,2005年 2月68
植物材料和外植体 培养条件 结果 作者(单位)
收稿 2004-01-05
修定   2004-11-18
*E-mail: qin-
ying_zhang
@sina.com,
Te l : 0 2 2 -
87402171
梅花抗寒品种“花
蝴蝶”(Prunus mume
‘Hua Hudie’)
不同时期的一年生
枝条
  培养基(1)~(9)以
W P M 为基本培养
基。丛生芽诱导培
养基: (1)6-BA 0.5
mg ·L-1(单位下同)+
NAA 0.01; (2)6-BA
1+NAA 0.1; (3)6-BA
2+NAA 0.2; (4)6-BA
3+NAA 0.3; 增殖培
养基: (5)6-BA 0.5+
NAA 0.05; (6)6-BA
0.5+NAA 0.1; (7)6-
BA 0.5+NAA 0.5;
(8)6-BA 1+NAA 0.1;
(9)6-BA 0.5+NAA
0.05。生根培养基:
(10)1/2MS+IBA 0.5;
(11)1/2MS+IAA 0.5;
(12)1/2MS+NAA 1;
( 1 3 ) 1 / 2 M S + N A A
0 . 5。培养基加 30
g·L-1葡萄糖、6 g·L-1
琼脂,pH 5.8。培
养温度(2 3 ±2 )℃,
光照度1 500 lx左右,
光照14 h·d-1。
  分别在春季以嫩梢(室内萌发)、略萌动的带芽茎段、新
梢(室外生长)为外植体,采用 0.1% 升汞消毒 1~4 min,室
内培养萌发的嫩梢容易消毒(升汞消毒时间为1.5 min),诱导
生长情况最好。外植体接种 7 d 左右开始萌发,其中培养基
(2)~(4)中的诱导率最高。后两种培养基诱导的试管苗玻璃化
严重,不能继代培养,故用(2)为诱导培养基。将丛生芽分
成单株或 2 个苗一同接种于继代培养基中,增殖系数均在 4
以上,但试管苗的高度差异很大,其中 M S 中试管苗高于
W P M ,6 - B A 对增殖系数影响显著,浓度越高增殖系数越
高,但若长期使用培养基( 8 )的试管苗会出现严重玻璃化。
6-BA 与 NAA 的比例对增值系数影响不显著,但明显影响茎
段基部愈伤组织的生长,二者比例为 5∶1 以上时,茎段基
部会出现大量愈伤组织,从而严重影响试管苗的质量。综
合考虑,较适合的培养基是(5 )。用 MS 培养几代后,改用
WP M 继代 1 ~ 2 次,对试管苗生长有利,另外用“( 5 )培养
3代 +(8)培养 1代”的循环继代方式可提高整体的增殖系数。
生长素种类对生根影响显著,N A A 的效果最佳,生根率达
到96%。培养基(12)的生根茎段基部长出愈伤组织较多;培
养基(13)上也有少量愈伤组织,对炼苗移栽影响不大。试管
苗出瓶前7 d,打开瓶盖。移栽基质用珍珠岩、草炭和沙(1∶
1∶1 )的混合物,并经高温消毒。定时喷含有 W P M 大量元
素的 800 倍的百菌清(江苏新沂,利民化工责任有限公司生
产)溶液。移栽后温度控制在 23℃左右,湿度为80 %~ 9 0 %。
30 d 后的成活率为 92%。
张秦英1,* 陈俊愉2(1天
津大学农业与生物工
程学院, 天津300072;
2 北京林业大学园林
学院,北京 100083)
收稿 2004-02-26
修定 2004-11-08
资助 国家“十五”
科技攻关课题
(2004BA713B
09-05)。
* 通讯作者(E-
mail:hetaobian-
tao@ 163.com,
Te l: 02 9-
88103505)。
普通扁桃(Prunus
amygdalus)美国品
种“Missio n”
六年生新梢顶芽或
茎段
  芽诱导培养基:
(1)G+6-BA 2.0 mg·L-1
(单位下同)+IBA 1.0;
不定芽增殖培养基:
(2)G+6-BA 1.0; 壮
苗培养基: (3)MS+6-
BA 0.5+IBA 0.125,
(4)G+6-BA 0.5+IBA
0 . 1 2 5;生根培养
基:(5)B5+IBA 120+
柠檬酸 2 0 0 + A C
0.1%, (6)B5。培养
基均含0.56% 琼脂,
pH 5.8, 培养基(1)~
(4)含 3% 蔗糖,培
养基(5)、(6)含 2%
蔗 糖 。 培 养 温 度
26~28℃,光照 14
h ·d -1,芽的诱导与
增殖、壮苗培养时
光照度2 000 lx,转
入生根培养基后光照
度3 000 lx。
  将采集的六年生新梢顶芽或茎段在流水中冲洗 3 0 ~ 6 0
m in,在无菌条件下用 75% 酒精溶液浸 30 s,放入 0.1%
HgCl2 溶液灭菌 15 min,用无菌水冲洗 5~6 次,剥取 0.2 cm
茎尖或切取 0.3~0.5 cm 茎段接种于芽诱导培养基(1)上。培
养 7 d 后,顶芽及腋芽开始萌动生长;30 d 后,芽伸长至
1~2 cm,产生 2~3 个丛生芽。将上述丛生芽分割,转接到
培养基(2)上继代增殖。30 d 后,每个茎段或芽可分化产生
6~10 个不定芽。将其转入壮苗培养基(3)、(4)中进行交替培
养,在(3)或(4)中培养 30 d 后叶色浓绿,茎秆较粗壮,可
用作诱导生根。采用培养基(3)或(4)单一继代培养,继代 3
次后,培养至20~25 d,组培苗生长变缓,茎秆变细,叶片发
黄,发展为黄化苗,若不及时转瓶会延缓生长甚至死亡。
随培养代数的增加,黄化苗出现时间提前,数量增多。在
培养基(3)、(4)中交替一代培养可有效延迟黄化苗发生时间至
40 d 后,并提高繁殖系数,试管苗生长健壮,整齐度好。
在培养基(3)、(4)中培养的试管苗长至 2 cm 左右时,将较健
壮的无根苗分成单株,转至生根培养基(5)中,暗培养9 d后再
转入生根培养基(6)中。4~7 d 后开始生根,每株4~6条根,根
色白且粗壮,生根率可达 90 % ~ 9 5 %。2 周后在自然光下开
瓶炼苗 6~8 d,然后将试管苗基部琼脂洗净,栽植至经冲洗
过的蛭石中,浇透水后置于 26~28℃、空气相对湿度保持在
80 % 以上的温室中,初期用 1/ 2M S 营养液浇洒,新叶长出
后移入大田。移栽成活率可达 8 5 % 以上。
马玉华 郭春会*(西北
农林科技大学园艺学
院,杨凌 712100)
植物组织培养简报摘编