全 文 ：植物生理学通讯 第41卷 第5期，2005年10月644
梳唇石斛成熟胚的离体培养和植株再生
孔琼* 袁盛勇 查应洪 袁寒 薛春丽
红河学院生物系，云南蒙自 661100
In vitro Tissue Culture and Plant Regeneration from Mature Embryos of
Dendrobium strongylanthum Rchb. f.
KONG Qiong*, YUAN Sheng-Yong, ZHA Ying-Hong, YUAN Han, XUE Chun-Li
Department of Biology, Honghe College, Mengzi, Yunnan 661100, China
收稿 2004-11-03 修定 　 2005-04-29
资助　 红河学院校级课题(XJ04021)。
*E-mail: kongqiong761127@yahoo.com.cn
1 植物名称 梳唇石斛(Dendrobium strongylanthum
Rchb. f.)。
2 材料类别 成熟种子。
3 培养条件 以MS和1/2MS为基本培养基。(1)种
子萌发培养基：MS+NAA 0.2 mg·L-1(单位下同)+6-
BA 0.4+马铃薯汁200 g·L-1；(2)原球茎诱导增殖培
养基：1/2MS+6-BA 0.5；(3)原球茎分化培养基：
1/2MS+6-BA 0.5+NAA 0.5+椰子汁200 g·L-1；(4)壮
苗及生根培养基：1/2MS+NAA 0.5+ 香蕉泥 100
g·L-1。上述培养基均附加20 g·L-1 蔗糖、8 g·L-1 琼
脂，pH 5.5~5.8。培养温度为(24±2)℃，光照时
间12 h·d-1，光照度1 000~2 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 无菌种子萌发 摘取成熟而未开裂的梳唇石斛
蒴果，自来水冲洗10 min后，用毛刷蘸洗衣粉轻
轻刷洗蒴果，再用自来水冲洗20 min。在超净工
作台上用75% 酒精消毒30 s，3% 次氯酸钠(附加
2~3滴吐温80)浸泡20 min，无菌水冲洗5~ 6 次。
把果实放在无菌滤纸上，用解剖刀切开果实，将
种子均匀抖落在培养基(1)上。接种10 d后，种子
开始萌动、膨大、变绿，逐渐萌发成圆锥状的原
球茎。20~23 d后原球茎可进行增殖培养。当原球
茎长到30 d，其顶端产生叶原基，如果不转接到
增殖培养基上，也可直接发育成幼叶而形成小苗。
4.2 原球茎诱导增殖培养 把上一阶段获得的原球
茎接种于培养基(2)中，10 d 后原球茎开始分化，
在其周围形成大量黄白色粒状原球茎。随着培养
时间的延长，原球茎逐渐变绿。增殖率达6~8倍。
4.3 原球茎分化培养 将增殖后的原球茎转接于培
养基(3)中，7~8 d后原球茎开始产生大量的叶原
基，25 d后可生长发育成具有一叶的小苗，叶长
0.3~0.5 cm。
4.4 壮苗及生根培养 将分化后高为1~2 cm的梳唇
石斛苗转接于培养基(4)上，6~8 d后苗基部产生
1~2 条白色根尖，30 d 后根长可达 1~2 cm，且
植株粗壮，生长健壮，叶片浓绿。诱导生根率达
9 5 % 。
4.5 炼苗移栽 当组培苗长至8~10 cm高、根长为
2~3 cm 时，敞开瓶盖，炼苗 5~6 d，取出小苗，
洗去根部残留的培养基后移入到珍珠岩和泥炭各半
的基质中，浇透水，并遮荫保湿，12~15 d 后移
植于富含腐殖质的培养土中，成活率可达 85%。
5 意义与进展 梳唇石斛属兰科石斛属，具有滋阴
清热、润肺止咳、养胃生津、明目强身等功效，
是很多中药的配方[1]。它主要分布于我国云南西
南部、印度东北部和缅甸[2]。1990 年，郑博仁[3]
报道此种植物是云南生产加工吊兰枫斗的原植物之
一，且是加工“龙头凤尾”枫斗的最好石斛属植
物。其种子小、无胚乳，自然条件下萌发率极
低，无性繁殖系数也低。近年来，药材市场对该
种石斛需求量大。本文结果对该种中药的种质资
源保护和有效利用提供种苗可能有一定的潜在应用
价值。梳唇石斛的组织培养未见报道。
参考文献
1 马继光. 神农本草经辑注. 北京: 人民卫生出版社, 1995
2 包雪声, 顺庆生, 陈立钻. 中国药用石斛. 上海: 复旦大学出
版社, 2001. 99
3 郑博仁. 云南石斛属药材现状及其原植物. 中国中药杂志,
1990, 15(1): 9~10