全 文 ：植物生理学通讯 第 44卷 第 5期，2008年 10月 957
东北对开蕨的组织培养
顾德峰 *, 王蕾, 赵和祥, 董然
吉林农业大学园艺学院, 长春 130118
Tissue Culture of Phyllitis japonica Kom.
GU De-Feng*, WANG Lei, ZHAO He-Xiang, DONG Ran
College of Horticulture, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
收稿 2008-07-07 修定 2008-07-16
资助 吉林省科技厅青年基金(20000556-2)和吉林省科技厅重
大项目(2 00 50 41 63 )。
* E-mail: gu.df@163.com; Tel: 0431-84551863
1 植物名称 东北对开蕨(Phyllitis japonica Kom.)。
2 材料类别 含有成熟孢子囊的孢子叶。
3 培养条件 孢子萌发培养基: 1/2MS。原叶体继
代增殖培养基: (1) MS+6-BA 0.2 mg·L-1 (单位下同);
(2) MS+KT 0.2。上述培养基均添加 2.0%蔗糖和 7
g·L-1琼脂, pH 5.5。光照强度 5~10 µmol·m-2·s-1, 光
照时间 12 h·d-1; 白天温度 25~26 ℃, 晚间 20~22 ℃。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取东北对开蕨含有成熟孢子
囊的孢子叶, 在实验室中切成 1 cm×1 cm大小。
无菌条件下用 0.1% HgCl2溶液灭菌 5 min, 无菌水
冲洗6次, 滤纸吸干后接种到孢子萌发培养基中(图
1)。培养 100 d左右的孢子开始萌发, 产生原叶体
团, 130 d后原叶体展开(图 2)。
4.2 原叶体增殖 将原叶体团分切成约 0.5 cm×
0.5 cm大小的小块, 每小块约含原叶体 5~10片,
分别接种到培养基(1)、(2)中, 60 d后又有大量
的原叶体形成(图3), 原叶体的增殖倍数达5倍以
上。
4.3 孢子体植株诱导 由原叶体向孢子体植株的转
化, 是东北对开蕨组织培养过程的一个关键环节。
孢子体植株很难在试管内直接产生, 因此采用试管
外诱导。将增殖后的原叶体分成20片左右的小块,
图 1 东北对开蕨孢子叶接种
图 2 东北对开蕨的原叶体
图 3 增殖后的东北对开蕨原叶体
图 4 东北对开蕨原叶体产生孢子体
植物生理学通讯 第 44卷 第 5期，2008年 10月958
图 6 移栽后的东北对开蕨幼苗
图 5 东北对开蕨孢子体植株
出瓶移栽置以草炭为基质的花盆中。盆上覆盖塑
料膜保湿, 于温室内散射光下进行诱导培养。90 d
后有孢子体幼芽形成(图 4), 140 d后长成完整植株
(图 5), 此时可进行分株移栽(图 6)。
5 意义与进展 东北对开蕨别名日本对开蕨、对
开蕨, 属铁角蕨科(Aspleniaceae)对开蕨属(Phyllitis),
仅一属一种, 为国家二级珍稀濒危保护植物。分布
范围十分狭窄, 主要分布在我国长白山区、日本
及朝鲜北部, 自然贮量极少, 是世界稀有物种。既
具有观赏价值, 又有药用价值。有关东北对开蕨
的研究甚少, 其组织培养的研究尚未见报道。本
研究为东北对开蕨的保护和利用有一定的参考价
值。