全 文 ：植物生理学通讯 第 44卷 第 4期，2008年 8月 753
小叶地不容离体培养与植株再生
陈迪峰 1, 秦燕妮 2, 吴凤桃 2, 陈永勤 2,*
1湖北省武昌实验中学, 武汉 430061; 2湖北大学生命科学学院, 武汉 430062
In vitro Culture and Plantlet Regeneration of Stephania succifera H. S. Lo et Y.
Tsoong
CHEN Di-Feng1, QIN Yan-Ni2, WU Feng-Tao2, CHEN Yong-Qin2,*
1Wuchang Experimental Middle School of Hubei Province, Wuhan 430061, China; 2School of Life Sciences, Hubei University,
Wuhan 430062, China
收稿 2008-04-24 修定 2008-05-28
资助 湖北省中药生物技术重点实验室项目(20 05 0 10 2)。
* 通讯作者(E-mail: chenyongqin@hubu.edu.cn; Tel: 027-
5 0 8 6 5 6 1 4 )。
1 植物名称 小叶地不容(Stephania succifera H. S.
Lo et Y. Tsoong)。
2 材料类别 茎段。
3 培养条件 基本培养基含大量元素减半的MS (1/2
MS)。茎段培养基: (1) 1/2MS, (2) 1/2MS+6-BA 0.5
mg·L-1 (单位下同), (3) 1/2MS+6-BA 2.0, (4) 1/2MS+6-
BA 5.0, (5) 1/2MS+6-BA 0.5+NAA 0.2, (6) 1/2MS+6-
BA 2.0+NAA 0.2, (7) 1/2MS+6-BA 5.0+NAA 0.2; 侧
芽增殖培养基: (8) 1/2MS+6-BA 2.0+NAA 0.2+0.5
g·L-1活性炭; 生根培养基: (9) 1/2MS+IBA 1.0+0.5
g·L-1活性炭。所有培养基均添加 20.0 g·L-1蔗糖和
8.0 g·L-1琼脂, pH 5.8。培养温度为(24±2) ℃, 光照
时间为 14 h·d-1, 光照强度为 30~45 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 剪去茎段上的叶片、用自来
水和洗涤剂清洗后, 在10%次氯酸钠溶液中消毒15
min, 再用无菌水漂洗 3次, 然后将茎段切成长约
1.5 cm的小段, 每段带 1个侧芽, 随机接种在茎段
培养基(1)~(7)上。
4.2 侧芽生长与增殖 在无 6-BA的培养基(1)上,
90%茎段上的侧芽不能长成幼茎, 茎段逐渐变黄、
死亡。培养基(1)中加 6-BA, 培养 5 d后部分茎段
上的侧芽明显生长, 至 20 d时, 一些幼茎长度可达
3 cm以上; 提高 6-BA浓度可促进侧芽萌动, 但浓
度达到5.0 mg·L-1时, 侧芽的伸长受到显著抑制, 幼
茎短而粗, 而且茎段基部形成大量的愈伤组织; 培
养基中添加0.2 mg·L-1 NAA可以诱导茎段基部形成
愈伤组织; 茎段培养效果比较好的培养基为(6) 1/2
MS+6-BA 2.0+NAA 0.2, 在此培养基上, 幼茎形成
率为 86.3%, 平均长度为 3.6 cm。将幼茎再切成
带侧芽或顶芽的小段, 接种到侧芽增殖培养基(8)上,
培养 30 d后, 67.7%的茎段可形成新的幼茎, 并且
有部分茎段基部的愈伤组织上还分化出不定芽, 不
定芽的分化率为 21.4%。
4.3 生根与移栽 将幼茎顶芽切下(长1 cm以上), 接
种在生根培养基(9)上, 10 d后基部开始形成不定
根; 至 30 d时, 平均生根 2.4条, 生根率达 100%。
移栽前先将瓶塞打开, 在培养室内炼苗 2 d后取出
小苗, 用自来水漂去培养基的琼脂, 再栽入泥炭土
和沙(2:1)的混合基质中, 置于50%自然光照强度的
光下, 相对湿度保持在 80%左右, 每天喷水 3~4次,
10 d后每天喷水 2次; 20 d后按常规管理, 每 7 d浇
一次MS大量元素溶液; 1个月后小苗成活率为
74%, 成活的小苗生长正常, 3个月后植株茎有所伸
长。
5 意义与进展 小叶地不容为防己科千金藤属藤本
植物, 民间俗称 “金不换 ”, 块根可入药, 具清热解
毒、健胃止痛、散瘀消肿等功效。小叶地不容
含有多种具有生物活性的生物碱(薛智等 1986; 陈
嬿等 1989), 雌雄异株, 自然结实率比较低。本文
结果对保存其野生资源和快速繁殖优良单株可能有
一定的参考意义。小叶地不容的组织培养和快速
繁殖尚未见报道。
参考文献
陈嬿, 方圣鼎, 磯具, 彰铃木, 昭憲(1989). 千金藤属植物小叶地不
容中的生物碱(VII). 植物学报, 31: 544~548
薛智, 张佩铃, 马建明(1986). 小叶地不容生物碱的研究. 药学学
报, 21: 223~225