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笹之雪的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 4期,2008年 8月 747
笹之雪的组织培养与快速繁殖
韦丽君 *, 吕平
广西亚热带作物研究所, 南宁 530001
Tissue Culture and Rapid Propagation of Agave victoriae-reginae T. Moore
WEI Li-Jun*, LÜ Ping
Guangxi Institute of Subtropical Crops, Nanning 530001, China
收稿 2008-06-05 修定 2008-06-23
* E-mail: weilijun2002@126.com; Tel: 0771-3348689
1 植物名称 笹之雪(Agave victoriae-reginae T.
Moore) , 又名箭山积雪、鬼脚掌、雪簧草。
2 材料类别 茎尖和叶片。
3 培养条件 诱导培养基: (1) MS+6-BA 2.0 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.2;(2) MS+6-BA 2.0+KT 1.0+
NAA 0.2; (3) MS+6-BA 1.0+KT 1.5+NAA 0.2。增
殖培养基: (4) MS+6-BA 0.5+KT 1.0+NAA 0.2。生
根培养基: (5) MS+KT 1.5+NAA 0.5。所有培养基
均附加 30 g·L-1的蔗糖和 7 g·L-1的琼脂, pH 5.8。
培养温度为(25±2) ℃, 除叶片诱导的前 15 d采用
暗培养外, 其他阶段均以日光灯为光源进行光照培
养, 每天连续光照 10~12 h, 光照强度为 30~40
µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 以笹之雪的幼嫩侧芽为材料,
自来水冲洗干净, 饱和洗衣粉水浸泡 5~10 min, 流
水冲洗 1 h, 移到超净工作台上用 75%的酒精消毒
30 s, 无菌水冲洗 1~2次, 再用 0.2%升汞消毒5 min
(滴加 2~3滴吐温 -80), 然后用无菌水冲洗 4~5次,
每次冲洗时间 2~3 min, 无菌滤纸吸干水分。剥下
材料外围的 2~3张叶片(每片叶平均分成叶顶、叶
中、叶基三部分)和带有 1 个小叶的茎尖。
4.2 愈伤组织及芽的诱导 将茎尖接种在培养基(1)
上, 叶片各部分接种在培养基(2)上。在培养基(1)
上接种 15 d后茎尖基部膨大, 25 d后有新芽萌动,
40 d时分化率达 100%, 增殖系数达 4.6。在培养
基(2)上接种 15 d后, 叶基的切口处明显膨大, 20 d
后, 开始产生少量绿色愈伤组织, 50 d时诱导率达
100%, 并且产生少量不定芽; 叶中、叶顶 20 d后
切口处开始膨大, 30 d后开始形成少量淡绿色的愈
伤组织, 50 d时愈伤组织诱导率分别达到 98%和
89%, 但未见不定芽产生。将叶片诱导产生的愈伤
组织接种在培养基(3)上, 30 d时绿色愈伤组织的
分化率达 100%, 不定芽粗壮, 叶色浓绿, 淡绿色愈
伤组织上未见不定芽产生。
4.3 继代增殖和生根壮苗 将上述诱导的不定芽接
种在培养基(4)上, 35 d左右可增殖一代, 增殖系数
达 5.47, 增殖芽有高有矮, 密度适中, 小苗粗壮, 有
效苗多(图 1)。将继代增殖获得的不定芽转移至培
养基(5)上进行生根培养, 15 d时切口处开始膨大,
30 d时已长出少量粗短根, 40 d时根系多且长(图
2), 生根率达 100%。
图 1 笹之雪的增殖培养
图 2 笹之雪的生根培养
植物生理学通讯 第 44卷 第 4期,2008年 8月748
4.4 移栽 待试管苗长至 2~3 cm高、根长 2~3 cm
时即可以炼苗。选取生长健壮的植株, 室温下瓶内
培养 3 d后打开瓶盖炼苗 2~3 d, 小心地将试管苗
从瓶中取出, 用自来水洗净根部的培养基, 移栽到
已消毒过的泥碳土中。应注意遮荫, 控制好温湿
度, 成活率达 80% (图 3)。
图 3 笹之雪的移栽盆苗
5 意义与进展 笹之雪是龙舌兰科龙舌兰属肉质草
本植物, 其种名“victoriae-reginae”是纪念维多利亚
女王, 国外称之为维多利亚龙舌兰、女王龙舌兰、
皇后龙舌兰等。主要用于布置沙漠、城市景观或
庭园、公共绿地及盆栽作高档的观叶花卉, 原产墨
西哥, 我国也有栽培。笹之雪生长缓慢, 数十年才
开花结籽, 结籽后枯萎死亡。笹之雪主要靠分株繁
殖, 速度慢, 成龄植株平均一年长出1~3株小苗, 不
仅受到良种基数的限制, 而且受母株材料和繁殖季
节的影响, 采用组培技术进行繁殖, 具有速度快, 不
受季节影响等特点, 对解决上述问题可能有一定的
希望。同属的剑麻(张毓梅 1982; 彭靖茹等 2003)、
狐尾龙舌兰(李勇等 2003)和无刺番麻(王泽云和林
盛 1994)的组织培养已有所报道, 但笹之雪的组织
培养还未见报道。
参考文献
李勇, 杨建芬, 张朝成(2003). 狐尾龙舌兰的组织培养和快速繁
殖. 植物生理学通讯, 39 (5): 474
彭靖茹, 梁立娟, 梁月群(2003). 剑麻的组织培养和快速繁殖. 广
西热带农业, 89 (4): 19~20
王泽云, 林盛(1994). 无刺番麻组织培养快速繁殖种苗的研究. 热
带作物学报, 15 (S1): 13~18
张毓梅(1982). 剑麻组织培养再生植株研究. 植物生理学通讯, (3): 42