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拟南芥直播水培法



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 1期,2004 年 2 月 81
收稿 2003-03-24 修定  2003-06-13
资助 国家自然科学基金课题(30370839)
* 通讯作者(E-mail:pfang@zju.edu.cn, Tel:0571-86980595)。
拟南芥直播水培法
郁晓敏 方 萍* 朱日清
浙江大学环境与资源学院资源科学系, 杭州 310029
A Hydroponic Method for Direct Culture of Arabidopsis thaliana
YU Xiao-Min, FANG Ping*, ZHU Ri-Qing
Department of Resource Science, College of Environmental and Resource Science, Zhejiang University, Hangzhou 310029
提要 在参考国内外水培拟南芥的经验和方法的基础上,采用简易的水培装置,对拟南芥直播水培方法进行了探索。
关键词 拟南; 直播; 溶液培养
拟南芥种子小,幼苗脆弱,目前主要采用移
载法和直播土培法培养。前一方法是将经消毒后
的种子先播于无菌培养基上,置于 4℃冰箱内春
化3~4 d后转入光照培养3~4周,再将小苗移栽
到营养土和蛭石混合的培养介质上继续进行培养。
在移栽过程中拟南芥幼苗易受伤害,同时因生长
介质的环境条件改变,需要经历一定的缓苗期,
因此,移栽后拟南芥幼苗很容易夭折,从而影响
其成活率。后一方法则是种子经消毒后,先放在
湿润的滤纸中,置于 4℃冰箱内春化 3~4 d,之
后将种子直接播种在蛭石上。一般种子直播难以
均匀,浇水时易被冲走,浇营养液时幼苗很容易
被冲倒,因而也影响其成活率。一般来说,水
培法可以严格控制营养液中的离子浓度,提高植
株生长速度,从而培养出健壮而整齐一致的植
株,并能采集到较多的根系。因此,水培法在
拟南芥培养中得到广泛应用。但已经报道的拟南
芥水培方法,通常采用移栽而不是直播。因拟南
芥幼苗弱小,移栽时其根系很容易损伤,而影响
成活率。特别是在进行高通量的拟南芥突变体筛
选时,需移栽成千上万的幼苗,工作量非常大。
因此,有必要建立一种简单而快速的拟南芥直播
水培方法。本文在参考已有的水培拟南芥的经验
和方法的基础上,对拟南芥的直播水培方法进行
了探索。
1 植物材料
材料为拟南芥野生型(Arabidopsis thaliana
Columbia)。
2 种子处理
拟南芥种子用70%乙醇和1%次氯酸钠浸泡消
毒后,用无菌水冲洗干净,再放入 4℃冰箱中春
化 3~4 d,种子用 0.1% 琼脂水溶液悬浮后,用
移液枪将种子点播在尼龙筛网上进行培养。
3 水培装置
在 300 mL 一次性塑料杯(内杯)口上缝一
层尼龙筛网,筛网上放一张剪有15个均匀分布小
孔的滤纸,并剪去杯底,将其置于 500 mL 一次
性塑料杯(外杯)中。再将配好的营养液倒入
杯中,使液面与内杯的筛网齐平。拟南芥种子点
播在铺于筛网上的滤纸的小孔处。为了防止绿藻
产生,在大杯的外面加上一层避光材料(如涂油
漆或粘深色纸)。播后的第 1 周要及时添加营养
液,使滤纸和种子保持湿润,等种子发芽出苗
后,小心移去滤纸。每周更换 1 次营养掖,液
面离筛网 0.5 cm,保持筛网干燥以防止霉菌生
长。
4 营养液成分
KNO3 5 mmol.L-1(单位下同)、Ca(NO3)2.4H2O
2、MgSO4.7H2O 2、KH2PO4 2.5、Na2EDTA 0.5、
FeSO4.7H2O 0.5、H3BO3 0.007、MnCl2 0.01、
ZnSO4.7H 2O 0.001、CuSO 4.5H 2O 0.0005、
CoCl2.6H2O 0.00001。用 NaOH 溶液调 pH 至 5.7。
植物生理学通讯 第 40 卷 第 1期,2004 年 2 月82
5 培养条件
光源为金属卤化物灯泡(200 W),光 / 暗
周期为16 h/8 h,光照度为4 000 lx;温度为22℃
左右。因是水培,湿度毋需严格要求,一般控制
在 5 0 % 以上即可。由于溶液表面与空气充分接
触,根系周围通气状况良好,一般毋需通气,只
要定期更换营养液即可。
6 培养结果 
结果表明,直播水培的拟南芥能够完成整个
生长过程,直到种子成熟。一般来说,拟南芥
种子进行光照培养 2~3 d 后即会萌发,进入营养
生长期。水培初期,特别是前 2 周,拟南芥幼
苗根系较少,其吸收能力和忍耐能力较弱,应及
时添加营养液,尽量使根系完全保持在营养液
中。培养 2 ~ 3 周后,根系已比较发达,其吸收
能力也增强,此时营养液面与筛网之间应有一定
的距离,这样可使筛网保持干燥;否则,筛网
长期在湿润的状态下,表面容易产生藻类和真
菌,影响拟南芥植株特别是根系的生长。
众所周知,水培方法可以提供充足的营养和
水分,产生较大的和更为整齐一致的植株,而且
可以避免其他培养方法中培养介质对根系生长的机
械限制。此外,通过水培方法,还可直观地了
解植株地上部与地下部生长的变化,特别是根系
生长的全过程。本文结果显示,将处理后的种子
直接播种在筛网上,可以避免其他因素对筛选的
影响,特别是在营养突变体的筛选中,可以控制
营养液的组成成分,排除培养基质对筛选过程的
影响。由于营养液与空气能充分接触,而定期更
换营养液,也解决了水培方法中通气不良、需定
时通气的问题。本法培养的植株 3 ~ 4 周后即开
花,比其他方法培养的植株提前 1~2 周成熟;且
植株生长健壮,苗高可达 35~40 cm。
总之,直播水培法,在适宜的光照、温度、
养分等条件下,尤其是相对于一些特殊的栽培要
求来说,可以排除栽培介质的干扰,培养出健壮
的植株,繁育出优质的种子。
参考文献
1 王秀荣, 沈 宏,严小龙.拟南芥室内繁种技术研究. 华南农
业大学学报(自然科学版),2 0 0 2 ,2 3 (3 ):9 4
2 陈 敏, 白书农. 拟南芥培养经验点滴. 植物生理学通讯,
199 5,31(6):43 6~ 4 3 8
3 赵淑清,郭剑波.一种简单快速的拟南芥水培方法的研究.
生物学杂志,2 0 0 0,1 7(6):2 2 ~ 2 3