全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第4期,2005年8月 495
华南鳞盖蕨的组织培养和快速繁殖
鲁雪华1 郭文杰1,* 刘润东2 林忠宁2
福建省农业科学院1 生物技术中心,2 红萍研究中心,福州 350003
Tissue Culture and Rapid Propagation of Microlepia hancei Prantl
LU Xue-Hua1, GUO Wen-Jie1,*, LIU Run-Dong2, LIN Zhong-Ning2
1Biotechnological Center, 2Azolla Research Center, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou 350003, China
收稿 2004-09-13 修定 2004-12-13
资助 福建省科技厅社会发展处项目(2002Y024-2)。
*通讯作者(E-mail:wenjieguo@eyou.com,Tel:0591-
87108376)。
1 植物名称 华南鳞盖蕨(Microlepia hancei Prantl)。
2 材料类别 幼芽、孢子果。
3 培养条件 以MS为基本培养基。诱导孢子果萌
发培养基:( 1 ) M S 。诱导愈伤组织或继代培养
基:(2)MS+6-BA 2 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.2。
分化培养基:(3)MS+6-BA 0.4;(4)MS+KT 0.5。
诱导生根培养基:(5)MS+IBA 1;(6)MS+NAA
0.5;(7)MS+IBA 0.5+NAA 0.5。上述培养基均添
加 3% 蔗糖和 0.65% 琼脂,pH 6.0,121℃高温、
高压灭菌20 min左右。培养温度为(25±2)℃,光
照度1 500~2 000 lx,光照时间10 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 孢子果萌发试验 将露地种植的华南鳞盖蕨叶
片背面的孢子果小心收集在滤纸上,包成一小
包,用自来水冲洗数遍,再把整个小包放在 75%
酒精中消毒10 s,用0.1% HgCl2溶液浸泡10 min,
无菌水冲洗数遍。打开滤纸,将滤纸上的孢子果
小心刮下,移到培养基(1)上,放在温室内培养。
30 d后孢子果萌动,有绿色小点出现,40 d有绿
色芽丛出现。
4.2 无菌材料的获得 将幼嫩茎段用自来水冲洗,
用洗衣粉水浸泡3 min,再用蒸馏水冲洗10 min。
在超净工作台上用酒精消毒20 s,0.1% HgCl2消毒
15 min,再用无菌水冲洗数次。无菌滤纸吸干表
面水分后,剥取茎尖接种在培养基(2)上。
4.3 愈伤组织的获得及分化培养 接种在培养基(2)
上的茎尖20 d左右,体积膨大,逐渐形成绿色愈
伤组织块。将愈伤组织块转移到同样培养基上,
30 d左右可增殖6~8 倍。若将愈伤组织块转移到
分化培养基(3)、(4)上,40 d 左右有芽丛出现。
4.4 根的诱导 当分化出的芽丛达2~3 cm时,切
割并分成单株接种到培养基(5)~(7)中诱导生根。2
周以后从芽的基部长出褐色的小根,3 周后可有
大量根系出现,呈辐射状,生根率达 1 0 0 % 。
4.5 试管苗的移栽 当根长到3~4 cm、茎高4~5
cm 时,将瓶盖打开,在通风处炼苗 3 d。取出
生根苗,洗去根部培养基,移栽到用 1% 高锰酸
钾溶液消毒过的珍珠岩和泥炭土(1∶1 )混合土
中,湿度保持在90% 以上,薄膜覆盖1周后揭膜,
成活率在 90% 以上(图 1)。移栽时,最适温度控
制在 25℃左右,超过 28℃以上容易引起烂苗。
5 意义与进展 华南鳞盖蕨是碗蕨科鳞盖蕨属的一
种多年生常绿药用蕨类植物,一般分布在海拔
600 m 以下的酸性土壤上。全草可药用,性味微
苦、寒,去湿热,民间多用于治疗黄疸型肝炎
等。本文结果对探讨野生药用蕨类植物的人工驯
化栽培和组织培养快速繁殖均有一定的参考价值。
华南鳞盖蕨的组织培养尚未见报道。
图1 华南鳞盖蕨的移栽苗