全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第4期,2005年8月 497
台闽苣苔的组织培养和快速繁殖
汤正辉1,2 石雷1,* 陈维伦1 苗琛2 邢全1
1 中国科学院植物研究所,北京 100093;2 河南大学生命科学学院,河南开封 475000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Titanotrichum oldhamii (Hemsl.)
Solereder
TANG Zheng-Hui1,2, SHI Lei1,*, CHEN Wei-Lun1, MIAO Chen2, XING Quan1
1Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093, China; 2College of Life Science, Henan University, Kaifeng,
Henan 475000, China
收稿 2004-10-29 修定 2005-03-17
资助 中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-SW-321)
和国家自然科技资源平台项目(2 00 4 D K A 3 0 4 3 0 )。
*通讯作者(E-mail: shilei67@263.net,Tel: 010-62836270)。
1 植物名称 台闽苣苔[Titanotrichum oldhamii
(Hemsl.) Solereder]。
2 材料类别 幼叶。
3 培养条件 (1)诱导不定芽分化培养基:MS+6-BA
0.1 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1;(2)生根培养基:
1/ 2 M S + 0 . 5 % 活性炭。以上培养基均加入3.0 %
蔗糖和0.7% 琼脂,灭菌前pH 5.8。培养室温度为
(25±2)℃,光照12 h·d-1,光照度2 000 lx左右。
4 生长与分化情况
4.1 不定芽的诱导 取台闽苣苔幼嫩叶片,先用自
来水冲洗,再放入烧杯内,加几滴洗洁精,加
水浸泡并震荡15 min,在此期间用毛笔刷洗叶表
面,除去气泡(叶表面密被绒毛),最后用流水冲
洗 20 min。在超净台上,先用 75% 乙醇灭菌约
20 s,再用 0.1% HgCl2 溶液浸泡3~5 min,之后
用无菌水冲洗 5 次。用解剖刀将叶片切成 0 . 5
cm×1 cm 的小块,接种到诱导芽分化培养基(1)
上。15 d后,外植体的切口处开始膨胀肿胀,并
出现较为致密的愈伤组织,呈翠绿色。约 30 d
后,部分切口处出现不定芽。新增殖的不定芽匍
匐在培养基上,和培养基接触的部位又生出不定
芽。将不定芽丛切下,转移至新配制的培养基(1)
上,不定芽丛继续分化增殖。平均每块外植体上
可生出不定芽 30 个。
4.2 生根培养 选择分化出的高约3 cm、不定芽生
长健壮的苗接种到培养基(2)上。1周后可见叶片
明显增大,且有根发生;1 月内又可长出 2~3 对
叶片,8~10 条根,且较粗壮。之后,从根部还
可生出新的小植株,将其切下后转接入分化培养
基(1)内,可继续分化增殖。经过约2个月的生根
培养,株高约5 cm,生根率可达95% 以上(图1)。
4.3 炼苗及移栽 将生根试管苗小心地从培养容器
中取出,用温水洗净根部残留的培养基,栽入盛
有粗河沙(多菌灵浸泡3~4 h,用自来水多次冲洗)
的浅盆中,用玻璃板覆盖,保持湿度,放置的
位置光不宜太强,温度控制在 24℃左右,每3 d
浇水 1 次。20~30 d 后又有新根长出,此时单株
移栽入盆,盆上覆盖玻璃板,保持湿度。基质
为 3 份松针土、1 份河沙、1 份草炭土。试管苗
栽植不宜太深。移栽成活率可达 8 0 %。
5 意义与进展 台闽苣苔为苦苣台科苔闽苣苔属植
物,该属只有此 1 种,分布于我国福建(南靖、
德化、南平)和台湾,以及日本的琉球群岛。生
于山谷阴处,海拔约 700 m。台闽苣苔分布范围
狭窄,为中国苦苣苔科植物濒危稀有种,北方地
区迁地保育较为困难。它在苦苣苔科系统学研究
中,位置独特,有重要的研究意义。一些研究
者认为该属较早地从苦苣苔亚科中分化出来,在
系统发育上认为是其它苦苣苔亚科类群的姊妹群。
其组织快繁技术研究的成功,为苦苣苔科种质资
源的保存和快速繁殖创造了条件,亦可为系统学
研究提供充足的试验材料。此种的组培快繁尚未
见报道。
图1 台闽苣苔的生根培养