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刺齿唇柱苣苔的离体快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 2期,2004 年 4 月 211
刺齿唇柱苣苔的离体快速繁殖
汤正辉1,2 陈维伦1 石雷1,* 苗琛2 邢全1
1中国科学院植物研究所, 北京 100093; 2河南大学生命科学学院, 开封 475000
In vitro Micropropagation of Chirita spinulosa
TANG Zheng-Hui1,2, CHEN Wei-Lun1, SHI Lei1,*, MIAO Chen2, XING Quan1
1 Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093; 2College of Life Sciences, Henan University, Kaifeng 475000
收稿 2003-07-29 修定  2003-11-13
资助  中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-SW-
321,KSCX2-3-04)。
* 通讯作者(E-mail:shilei67@263.net, Tel:010-82593616)。
1 植物名称 刺齿唇柱苣苔 (Chirita spinulosa)。
2 材料类别 幼叶。
3 培养条件 (1)诱导不定芽分化培养基:MS+6-BA
0.1 mg.L-1(单位下同)+NAA 0.1;(2)生根培养基:
1/2MS+0.5%活性炭。以上2种培养基均加入3.0%
蔗糖和0.7%琼脂,pH 5.8。培养室室温25~27℃。
光照12 h.d-1,光照度2 000 lx左右。
4 生长与分化情况
4.1 不定芽的诱导 取刺齿唇柱苣苔幼嫩叶片,先
用自来水冲洗,再放入烧杯内,加几滴洗洁净,
加水并震荡15 min,在此期间用毛笔刷洗叶表
面,除去气泡,最后用流水冲洗 30 min。在
超净台上,先用 75% 乙醇灭菌约 20 s,再用
0.1%HgCl2 溶液浸泡3~5 min,之后用无菌水冲洗
5次。用解剖刀将叶片切成0.5 cm×1 cm的小块,
接种到诱导芽分化培养基(1)内。10 d后,外植体
的切口处开始膨胀肿胀,并出现较为致密的愈伤
组织,呈翠绿色。约 25 d 后,部分切口处出现
不定芽。将外植体切口处的不定芽丛切下,转移
至新配制的培养基(1)上,不定芽丛继续分化增
殖。
4.2 生根培养 选择分化出的不定芽高约1 cm、生
长健壮的苗接种到培养基(2)上。1周后可见叶片
明显增大,且有根发生; 20 d内又可长出2~3对
叶片,4~5 条根,且较粗壮。6 周后生根率达
90%以上。
4.3 炼苗及移栽 将生根试管苗小心地从培养容器
中取出,用水洗净根部残留的培养基,栽入盛有
粗河沙(多菌灵浸泡3~4 h,用自来水多次冲洗)的
浅盆中。用玻璃板覆盖,保持湿度,放置的位
置光不宜太强,温度控制在26℃左右, 每隔2 d
浇水 1次。20~30 d 后又有新根长出,此时单株
移栽入盆。盆底垫小鹅卵石,上覆盆土。盆土
为1份河沙,3份草炭土。试管苗栽植不宜太深,
移栽的成活率可达 95%。
5 意义与进展 刺齿唇柱苣苔属苦苣苔科唇柱苣苔
属植物。苦苣苔科是我国植物类群中含特有属最
多的科,为重要的室内花卉育种材料。唇柱苣苔
属约有 140 种,分布于亚洲东南部及南部热带和
亚热带地区。我国有 100 种,其中半数以上为我
国特有种。该属中,唇柱苣苔组( S e c t .
Gibbosaccus)的刺齿唇柱苣苔亚组(Subsect.
Spinulosae)共有2个种,均为我国广西西部所特
有,是世界上独一无二的苦苣苔科叶多肉植物。
其叶形极似百合科的十二卷属(Haworthia), 观赏价
值极高。刺齿唇柱苣苔特产于广西扶绥,其组培
快繁的成功不仅为苦苣苔科植物种质资源的保存开
辟了一条新途径,也为丰富我国园林植物种类提
供了可能。此种的组培快繁尚未见报道。