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地灵的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 1期,2004 年 2 月68
收稿 2003-02-26 修定  2003-06-09
*E-mail:gdwei@mail.china.com, Tel:029-87083337
* * 通讯作者(E-mail:chyfeng@mail.china.com, Tel:
029-87093828 )。
地灵的组织培养与快速繁殖
郭东伟1,* 陈耀锋1,** 张俊文2
1西北农林科技大学农学院细胞工程研究室,杨凌 712100; 2宝鸡市植保总站,宝鸡 722100
Tissue Culture and Rapid Propagation of Stachys floridana
GUO Dong-Wei1,*, CHEN Yao-Feng1,**, ZHANG Jun-Wen2
1Cell Engineering Laboratory, Agronomy College, Northwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry, Yangling 712100;
2General Station of Plant Protection of Baoji City, Baoji 722100
1 植物名称 地灵(Stachys floridana),又称银
条 。
2 材料类别 根茎和茎段。
3 培养条件 (1)起始培养基:MB+6-BA 1.0
mg.L-1(单位下同)+KT 1.0+ NAA 0.5;(2)不
定芽诱导培养基:MB+6-BA 1.0+KT 1.5;(3)分
化培养基:MB+IAA 1.0+KT 0.5;(4)生根培养
基:1/2MB+6-BA 1.0+NAA 2.0。上述培养基中均
添加3% 蔗糖、0.55% 琼脂,pH 5.6。培养温度
25~28℃,光照12~14 h.d-1,光照度2 000~3 000
lx。
4 生长与分化情况
4.1 无菌培养系的建立 田间采回的健壮根茎,
用自来水反复冲洗干净,置入250 mL 广口瓶中,
在超净工作台上,用 70% 乙醇消毒 20 s 后,再
用0.1%升汞溶液消毒18 min,无菌水冲洗5~6次。
将消过毒的外植体切成带 1 个节间的茎段,接种
于培养基(1)中。3 d 左右根茎节间的休眠芽
开始萌动、变绿;2 周左右芽长至 4~5 cm,开
始出现分支;在 20~30 d,芽长至 9 cm 时,切
成带 2 个节间的茎段转接于培养基(2)上。
4.2 不定芽的诱导与增殖 茎段转接到培养基
(2)上,7 d 左右基部产生幼小的不定芽丛,15
d 左右不定芽团块直径达到 3~4 cm 即及时转移,
增殖系数4.67;超过 20 d ,不定芽团块便会发
生褐变,影响增殖效率。
地灵不定芽诱导受细胞分裂素的调控,单纯
使用 6-BA,不定芽的增殖效率不高,而且产生
的不定芽团块过于致密,不利于进一步剥离培
养;单纯使用 KT 在 2.0 mg.L-1 以下,增殖效率
不高,超过时又会产生褐变。实验结果表明,
6-BA 1.0 和 KT 1.5 mg.L-1 的配合使用,不仅能
有效降低褐变,而且增殖效率高。
4.3 不定芽的分化培养与生根 在培养基(2)
上产生的不定芽培养15 d左右,生长至0.5~2.0 cm
时,从不定芽团块上剥离,转移至培养基(3)
上;15~17 d后幼苗长至6~8 cm时,再次切成带
1 ~ 2 个节间的茎段,转至培养基(4)上生根。
20 d 左右,幼苗生长至 5~6 cm、带 5~6 条白色
的幼根时炼苗移栽。生根率可达 100 %。
尽管不定芽也可以直接进行生根培养,但由
于芽体很小,单芽切割操作困难;此外由不定芽
团块上剥离的幼芽生长状况不一,由此生根得到
的幼苗整齐程度差,商品苗率低。
4.4 移栽 试管苗揭盖,于室温下炼苗3~7 d后,
取出洗去根上的琼脂,移栽于经多菌灵 500 倍液
处理、砂和园土(3 ∶1 )混合的基质上,保
持充足的水分供应并遮荫,移栽成活率可达 95%
以上。
5 意义与进展 地灵为唇形科,水苏属野生宿根
草本植物。其肉质化的根茎含有丰富的水苏糖。水
苏糖属于寡糖的一种,能有效促进人体内双歧杆菌
等有益菌成倍乃至百倍地自然增殖,可以调节肠道
功能,改善人类最常见的功能性便秘、腹泻等症
状。它还具有抑制肿瘤增长、转移,抑制血糖升高,
降低血脂,抗病毒及调节免疫的生理功能。生产中
水苏糖主要以大豆为原料,通过酶法或化学降解法
制备,工艺较为复杂,且产量和产品纯度低,难以
满足医药原料所需。从天然植物中提取游离的寡糖
是寡糖产品研发的新途径。但地灵野生资源有限,
且根茎长期无性繁殖易引起种性退化,采用试管繁
育地灵种苗,进行人工栽培,可能会有助于保持品
种的种性,为加工提供优质原料。这方面研究国内
外尚未见到报道。