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公鸡花的组织培养与植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 3期,2008年 6月 525
公鸡花的组织培养与植株再生
何长信 1,2,马国华 1,*,简曙光 1,胡玉姬 1
1中国科学院华南植物园,广州 510650,2中国科学院研究生院,北京 100039
Tissue Culture and Plant Regeneration of Aristolochia labiata Willd.
HE Chang-Xin1,2, MA Guo-Hua1,*, JIAN Shu-Guang1, HU Yu-Ji1
1South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China; 2Graduate University of Chinese
Academy of Sciences, Beijing 100039, China
收稿 2008-03-25 修定 2008-05-06
资助 广东省种质资源库项目(2004B33301016和 2006B60101034)
及佛山市高明区科技计划项目(20 07 N0 3)。
* 通讯作者( E -m a i l:m a g h @ s c i b . a c . c n;T e l:0 2 0 -
3 7 2 5 2 9 9 3 )。
1 植物名称 公鸡花(Aristolochia labiata Willd.)。
2 材料类别 成熟种子。
3 培养条件 种子萌发培养基:(1) MS;(2) MS+
6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同) ;(3) MS+6-BA 1.0+NAA
0.2;(4) MS+IBA 1.0+NAA 0.2。芽诱导增殖和
继代培养基:(5) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2;(6)
MS+6-BA 1.0+IBA 1.0;(7) MS+6-BA 2.0+IBA 1.0;
(8) MS+6-BA 1.0+NAA 1.0。生根培养基:(9) 1/2MS;
(10) 1/2MS+NAA 1.0;(11) 1/2MS+IBA 1.0。以
上培养基的琼脂和蔗糖含量分别是 0.7%和 3%,
培养基在 121 ℃灭菌 15 min前调整 pH为 5.8。培养
温度为(25±2) ℃。光照强度为 40 µmol·m-2·s-1,光
照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 将新鲜成熟种子在75%酒精
中表面消毒 30 s,无菌水冲洗 2次,再用 0.1%
升汞消毒 8 min,最后用无菌水冲洗 3次。将种
子接种在培养基(1)~(4)上。
4.2 种子萌发和繁芽 接种在培养基(1)~(4)上的种
子 1个月后开始萌发,其中(1)上的种子萌发率最
低,仅3.8%,而(2)上种子萌发率最高,达到37.5%,
(3)次之。70 d后统计发现,培养基(1)上的萌发
率仍然为最低(30.7%),(2)~(4)上的萌发率均超过
80%。说明在公鸡花的种子萌发过程中添加适当
的激素有促进作用。切除萌发苗的胚轴,获得子
叶节,将子叶节接种在培养基(5)上,或者切除胚
根,接种在培养基(6)上。23 d后发现(5)上子叶
节处均有不定芽长出,平均每个子叶节繁芽数为
6.3,但是在子叶节上有些长出致密的绿色愈伤组
织;而(6 )上有些子叶节处没有不定芽长出,平
均每个繁芽数为 3.8。将芽接种在培养基(6)~(8)上
繁芽继代,发现苗长势均好(图 1)。
4.3 生根培养 选取株高在1~2 cm的植株接种在培
养基(9)~(11)上进行根诱导,15 d后各组均有根长
出,55 d后统计发现,培养基(9)上的生根率最
高,为 93 .1%,且根也最长,均长约在 6 cm。
4.4 移栽 移栽前 1 d,将瓶盖打开,在室温下炼
苗 1 d,然后洗净生根苗底部及根上附着的培养
基。栽培基质为蛭石和沙(1 :1 ),置阴棚中,保
持湿润,23 d后统计成活率,达 96.8%。
5 意义与进展 公鸡花原产巴西,现广州等地有引
种栽培,是马兜铃科马兜铃属的一种木质藤本,
叶心形美观,灰绿色,叶质柔软,花姿奇特,
带有栗色、象牙色和褐色网格,是一种园艺价值
高的观赏植物。由于花型奇特,该属植物大多列
为珍稀保护植物,此种也属这类。公鸡花的栽培
繁殖主要是种子播种,组织培养可以提供大量的
图 1 公鸡花的繁芽继代
植物生理学通讯 第 44卷 第 3期,2008年 6月526
繁殖苗。另外,马兜铃属植物含有很多药用成
分,但是具有肾损害和致癌作用的马兜铃酸成分
是马兜铃属植物的重要特征之一,导致很多马兜
铃属的药材不被采用,采用生物技术的手段虽然
可以筛选不含马兜铃酸成分的马兜铃植物,但组
织培养是前提。迄今马兜铃属植物中,A. elegams
(程治英等 1983)、A. contota (杨雪芹和曾庆平
2006)、A. manshuriensis (顾地周等 2008)、A.
indica (Manjula等 1997;Soniya和 Sujitha 2006)的
组织培养已有过报道,而公鸡花的组织培养则未
见报道。
参考文献
程治英, 王锦亮, 刘道华, 吴玉芳(1983). 马兜铃茎段组织培养. 植
物生理学通讯, 5: 44
顾地周, 丛小力, 宋丽利, 王艳萍, 姜云天(2008). 木通马兜铃的
组织培养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 44: 136
杨雪芹, 曾庆平(2006). 马兜铃的组织培养与植株再生. 广州中
医药大学学报, 23 (1): 65~68
Manjula S, Thomas A, Daniel B, Nair GM (1997). In vitro plantlet
regeneration of Aristolochia indica through axillary shoot
multiplication and organogenesis. Plant Cell Tiss Org Cult,
51: 145~148
Soniya EV, Sujitha M (2006). An efficient in vitro propagation of
Aristolochia indica. Biol Plant, 50 (2): 272~274