全 文 :植物生理学通讯 第43卷 第1期,2007年2月 119
槭叶茑萝的离体培养与植株再生
张晓军*
牡丹江师范学院生物系,黑龙江牡丹江 157012
In vitro Culture and Plantlet Regeneration of Quamoclit sloteri House
ZHANG Xiao-Jun*
Department of Biology, Mudanjiang Normal College, Mudanjiang, Heilongjiang 157012, China
收稿 2006-10-11 修定 2006-12-18
资助 黑龙江省教育厅科学技术研究项目(10553099)。
*E-mail:zxj898@eyou.com;Tel:0453-6511042
1 植物名称 槭叶茑萝(Quamoclit sloteri House),
别名葵叶茑萝。
2 材料类别 带节茎段。
3 培养条件 以MS 为基本培养基。(1)芽诱导培养
基:MS+KT 2.0 mg·L-1 (单位下同)+IBA 0.1;(2)
增殖培养基:MS+KT 1.0+IBA 0.05;(3)生根培
养基:1/2MS+NAA 0.5。上述培养基均添加 30
g·L-1 蔗糖、6 g·L-1 琼脂,pH 5.8。培养温度(25±
1) ℃,光照时间为12 h·d-1,光照强度为27~36
mmol· m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 选取生长健壮的新生幼苗,
剪去叶片留下0.5 cm长的叶柄,流水冲洗30 min。
在超净工作台上,用 70% 酒精浸泡 30 s 后,放
入 0.2% 的升汞溶液中,加入几滴吐温,振荡灭
菌 6 min,无菌水冲洗 4~5 次,吸干水分,切成
1 cm 左右的带有叶柄的单节茎段供诱导培养。
4.2 芽的诱导和继代增殖 将无菌外植体接种于培
养基(1)上进行芽的诱导,接种后先在25 ℃培养箱
中暗培养 3~5 d,而后置于光下培养。光下培养
5 d 后,外植体明显膨大,两端切口及叶腋处形
成浅绿色愈伤组织;10 d后,叶腋处的愈伤组织
形成小突起,分化形成浅绿色芽点;25 d 左右,
不定芽长出 3~4 片叶。经诱导形成的芽中有的形
成花芽,并且作蕾开花。诱导芽萌发的最佳培养
基为 MS+KT 2.0+IBA 0.1。当芽长成不定苗后,
将其切成单节茎段,转接到新鲜的培养基(2)上进
行增殖培养,每次继代时间为25 d 左右,增殖率
为 3~4 倍。
4.3 生根与移栽 选取生长健壮、具有3~4片叶的
组培苗从基部切下转移到培养基(3)中进行生根诱
导,20 d后开始生根,25 d后根系发达健壮,生
根率达 100%。当苗高 3~4 cm 时,打开瓶口炼
苗 2 d。取出小植株,用清水洗净根部,移栽到
已开水灭菌的富含腐殖质、疏松肥沃、保水透气
的土壤中,同时要注意保温、保湿和适度的光照
即可,成活率可达 9 0 % 以上。
5 意义与进展 槭叶茑萝为旋花科茑萝属一年生蔓
性草本植物。叶片呈掌状分裂,裂片披针形,顶
端长锐尖;总花梗粗大,着花 1 ~ 3 朵,花冠高
脚碟状,鲜红艳丽,五角星形;茎秆虬曲盘绕,
是美化庭院、阳台垂直绿化及扎景造型的良好材
料。此外,茑萝可入药,具有清热消肿的功效,
能治疗耳疔和痔瘘等。旋花科植物组织离体培养
方面的研究报道甚少,张晓军和张永乐(2004)曾
经通过腋芽诱导途径获得了日本牵牛的再生植株。
旋花科植物极易形成愈伤组织和分化出根,但难
以分化出芽,而且细胞分裂素和生长素比例的要
求不遵循模式植株的一般规律(张晓军等 1998)。
这种特异性反应可能与旋花科植物的内源激素水平
特性有关,作用机制有待进一步的研究和探讨。
本文结果不仅建立了槭叶茑萝体外再生体系,而
且对旋花科植物体外再生系统的建立也可能有一定
的参考价值。槭叶茑萝的组织离体培养尚未见报
道。
参考文献
张晓军, 李振山, 张永乐(1998). 日本牵牛组织离体培养的器官分
化初报. 牡丹江师范学院学报(自然科学版), (1): 10~11
张晓军, 张永乐(2004). 日本牵牛茎段的离体培养与植株再生. 植
物生理学通讯, 40 (6): 717