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红叶乌桕的离体培养和植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第1期,2006年2月 75
红叶乌桕的离体培养和植株再生
韩珊* 石大兴 王米力
四川农业大学林学园艺学院林学系,四川雅安625014
In vitro Culture and Plantlet Regeneration of Euphorbia cotinifolia Linn. Sp. Pl.
HAN Shan*, SHI Da-Xing, WANG Mi-Li
Forestry Department, College of Forestry and Horticulture, Sichuan Agricultural University, Yaan, Sichuan 625014, China
收稿 2005-05-30 修定 2005-08-16
资助 四川省重点学科建设项目(SZD0419)。
*E-mail: hsslpy_2003@yahoo.com.cn, Tel: 0835-
2882787
1 植物名称 红叶乌桕(Euphorbia cotinifolia Linn.
Sp. Pl.)。
2 材料类别 叶 片 。
3 培养条件 (1)愈伤组织诱导培养基: MS+6-BA
2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5;(2)诱导分化培
养基: MS+6-BA 0.5+2,4-D 0.01+NAA 0.01;(3)继
代增殖培养基:MS+6-BA 0.5+NAA 0.01;(4)生
根培养基:1/2MS+IBA 0.5。上述培养基中附加
琼脂 0.8%;生根培养基中蔗糖为 1.5%,其余为
3%,pH 5.8。培养温度为(25±2)℃,光照时间
12 h·d-1,光强 30~40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取新抽出的幼嫩叶片,带叶
柄剪下,用自来水冲洗干净后,在超净工作台上
先用75% 酒精消毒 30 s,在 0.1% 升汞中消毒10
min 后,用无菌水冲洗5次。将叶片切成1 cm×1
cm 大小的方块,带叶柄接种在培养基(1)上。
4.2 愈伤组织的诱导 将接种叶片的培养瓶放在培
养室培养7 d后,叶片普遍肿胀。20 d左右,将
其在无菌条件下切成1 cm左右,转接至愈伤组织
诱导培养基(1)上进行培养。叶片在培养基(1)中培
养15 d左右开始启动,切口边缘出现红色颗粒状
突起;继续培养后,颗粒状突起扩大,逐渐形
成愈伤组织块。以接种叶片块数为基数,其诱导
率为 70%。叶片愈伤组织诱导中,叶片背面向下
的愈伤组织诱导率比向上的高 27% 左右。
4.3 分化培养与增殖培养 将致密的紫红色或红色
瘤状愈伤组织横切成1 cm 左右(小块可不切),接
种于分化培养基(2)上,在愈伤组织表面出现红色
芽点,再经过 10~15 d 分化成苗,分化率在 60%
左右,生长健壮。当苗长至 3 cm 时可切下转入
新鲜的增殖培养基(3)中扩繁,30 d继代培养1次。
4.4 生根与移栽 当将分化和增殖培养基上形成的
无根苗长至 1.5 cm 以上时,将其剪下,接种于
培养基(4)上诱导生根。11 d后无根苗基部皮层形
成白色不定根,15 d 时,生根率达72%,每株生
根 3 条,根长 2 cm 左右。待幼苗的根长至 5 cm
左右时,在培养室中开瓶 3~5 d,然后洗去根部
培养基,移栽到盛有已配好的炼苗机质的营养袋
中,覆以地膜进行炼苗。起始的 1 周内,试管
苗从异养过渡为自养,是试管苗能否移栽成活的
关键时期。在此时期应精心护理,每天浇水 1
次,并打开地膜透气。待试管苗长出新叶片时,
可去掉地膜。苗长至 10 cm 高时,可移植至户外
排水灌溉良好的大田中,适当遮荫,移栽成活率
为 7 6 % 。
5 意义与进展 红叶乌桕是大戟科大戟属落叶灌木
或小乔木,又名肖黄栌、非洲红、血叶木、紫
锦木。红叶乌桕原产墨西哥及南美洲,我国的广
西、广东、海南、云南、台湾等省(区)有引种。
高2~5 m,树皮红褐色,干、茎有白色乳汁,叶
红色,形似乌桕,故有红叶乌桕之称。红叶乌
桕具有极高的观赏价值与园林用途,叶片终年暗
红色,嫩叶鲜红色,远看似满树红花,与绿色
园景配植,可增加颜色变化,增添喜气,给园
林增添景色。红叶乌桕虽可用扦插或嫁接繁殖,
但繁殖系数低,用组织培养方法可在短期内得到
大量试管苗。红叶乌桕的组织培养和快速繁殖尚
未见报道。