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广东石斛的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第4期,2005年8月 491
广东石斛的组织培养
付志惠 李洪林 杨波*
中国科学院武汉植物园,武汉 430074
Tissure Culture of Dendrobium wilsonii Rolfe
FU Zhi-Hui, LI Hong-Lin, YANG Bo*
Wuhan Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430074, China
收稿 2004-09-06 修定   2004-12-22
资助  国家“863”计划项目(2002A241121)和中国科学院
武汉植物园园主任基金项目(05035112)。
*通讯作者(E-mail: yangbo@rose.whiob.ac.cn, Tel: 027-
87510054)。
1 植物名称 广东石斛(Dendrobium wilsonii Rolfe)。
2 材料类别 幼芽。
3 培养条件 (1) 原球茎诱导培养基:1/2MS+6-BA
3.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.5;(2) 丛生芽诱导
及增殖培养基:花宝1号 3 g·L-1+6-BA 1.0+NAA
0.05+椰汁100 g·L-1+活性炭 (AC) 0.5 g·L-1;(3)
壮苗培养基:1/2MS+6-BA 0.5+NAA 0.05+ 椰汁
100 g·L-1+AC 0.5 g·L-1;(4)生根培养基:1/2MS+
IBA 0.5+ 香蕉汁 100 g·L-1。以上培养基中,蔗
糖浓度(1)、(2)和(3)为 3.0%,(4)为 2.0%;琼脂
7.0 g·L-1,pH 5.8。培养温度为(26±2)℃,连续
光照12 h·d-1,光照度为2 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 原球茎诱导培养 将大约3 cm长且生长健壮的
幼芽从母株上采下,自来水冲洗 1 h,去掉外部
叶片,先用 75% 酒精消毒 30 s,再用 0.1% 升汞
溶液(加 1滴吐温)消毒 10 min,无菌水冲洗 6~8
次,用消毒滤纸吸干表面水分,接种到培养基(1)
中。15 d 左右茎节处开始膨大,30 d 以后逐渐
有绿色原球茎长出。
4.2 丛生芽诱导与增殖培养 将获得的原球茎转接
入新鲜培养基(2)中进行丛生芽诱导培养,20 d时
由原球茎上长出绿色丛生芽。将丛生芽转入新鲜
培养基(2)中继续培养,30 d 为 1 个继代增殖周
期,增殖倍数可达 5(图 1)。
4.3 幼苗的生长与生根 将丛生芽接到培养基(3),
丛生芽逐渐长大成苗。将其切割成单个苗接入培
养基(4)中进行生根培养,20 d 时开始生根,30
d 时幼苗生根率达 95%。根数可达 3~4 条,根长
2~3 cm,根系粗壮。
4.4 炼苗与移栽 移栽时特别注意要提前将瓶盖打
开,让组培苗适应一下外界的环境。2 d 后再将
小苗取出,洗净根部琼脂,栽入湿润但拧不出水
的水苔中,不需盖膜保湿,保持环境温度20~25℃
即可,成活率可达 90%。待新根长出后再浇水。
5 意义与进展 广东石斛又名黄草、黄草吊兰花,
为附生植物,生于树上或岩石上,性喜凉爽、湿
润、通风良好的环境,耐寒、畏炎热。全草均
可药用,有化痰、养气之效,亦可做镇静剂。
因其具较高的药用价值,导致非法采挖现象严
重,使原始资源遭到破坏。采用组织培养快速繁
殖技术可获得大量优质种苗,以供应市场所需,
可能是种质资源保护的手段之一。有关广东石斛
的组织培养尚未见报道。
图1 广东石斛的丛生芽诱导培养