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加拿大一枝黄花的组织培养及植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 4期,2007年 8月738
加拿大一枝黄花的组织培养及植株再生
尹婷 1,查国贤 2,蔡平 1,袁惠燕 1,孙振国 2,郑丽屏 1,*
1苏州大学城市科学学院,江苏苏州 215123;2苏州市植物保护检疫站,江苏苏州 215006
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Solidago canadensis Linn.
YIN Ting1, ZHA Guo-Xian2, CAI Ping1, YUAN Hui-Yan1, SUN Zhen-Guo2, ZHENG Li-Ping1,*
1School of Urbanology, Soochow University, Suzhou, Jiangsu 215123, China; 2The Suzhou Station of Plant Protection & Quarantine,
Suzhou, Jiangsu 215006, China
1 植物名称 加拿大一枝黄花(Solidago canadensis
Linn.)。
2 材料类别 带腋芽的茎段。
3 培养条件 (1)诱导愈伤组织培养基:MS+2,4-D
0.5 mg·L-1 (单位下同); (2)芽分化培养基:MS+6-
BA 1.0;(3)生根培养基:MS。培养基附加 3%
蔗糖、0.7%琼脂,pH 5.8~6.0。培养温度 25~27℃,
光照时间 12 h·d-1,光强 40 µmol·m-2·s-1左右。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织的诱导 切取加拿大一枝黄花的幼嫩
茎段,先在流水下冲洗 30 min,然后在超净工作
台上用 75%的酒精消毒 30 s,0.1%的升汞表面消
毒 10 min,最后用无菌水冲洗 4次,用刀切成带
有 1~2个侧芽的茎段,接种于培养基(1)上。放置
于暗培养箱中培养,10 d后出现淡黄色的愈伤组
织,将愈伤组织转入培养基(2)中,可诱导丛生芽。
4.2 芽诱导与增殖 接种在培养基(2)上的带腋芽茎
段,6 d后腋芽启动,10 d左右长出小芽,14 d后
芽已长至 2 cm。30 d后新芽长至 4~5 cm。将上
述芽苗从原茎段上切下成带腋芽的茎段,转接到
新鲜配制的芽繁殖培养基(2)上,促使幼茎长出更
多的芽苗。多次继代后,不仅芽苗生长随继代数
的增加而增快,增殖率也会逐渐增加。在外植体
继代培养中我们观察到,加拿大一枝黄花的芽增
殖受细胞分裂素的调节控制。
4.3 诱导生根及移栽 将上述芽苗从原茎段上切下
成带腋芽的茎段,转接到新鲜配制的生根培养基
(3)上,促使幼茎长出新根,约 4至 5 d可长出不
定根。20 d后生根率达 90%。待根长至 2~3 cm
时,将试管苗瓶盖打开,室温下(25~30 ℃)炼苗
3 d后,洗去根部琼脂,移栽至盛泥碳土的花盆
中,每周喷 1/2MS营养液,保持 75%以上的相
对湿度,成活率可达 8 0% 以上。
5 意义与进展 加拿大一枝黄花为菊科一枝黄花属
多年生草本植物,原产于北美,20世纪 30年代
作为观赏花卉引种于我国的上海、南京和苏州等
地,20世纪 80年代迅速扩散蔓延成恶性杂草,对
当地的社会经济、自然生态系统和生物多样性均
构成了一定的威胁。加拿大一枝黄花可做观赏切
花、蜜源、饲料、化工及医用,可用于部分天
然色素的生产,也可以用于提炼精油(印丽萍等
2004)。加拿大一枝黄花倍半萜具有类似于抗生
素、性诱剂、外激素等化学制剂的作用,近年
来引起关注。Schmidt等(1999)报道加拿大一枝黄
花倍半萜——吉马烯(germacrene D)对映体的合成
机制,Prosser等(2002)报道吉马烯A合酶的cDNA
的克隆和表达。本试验建立的组培快繁体系,为
加拿大一枝黄花化感作用的研究提供了可能的培养
体系。加拿大一枝黄花的组织培养尚未见报道。
参考文献
印丽萍, 谭永彬, 沈国辉, 姚红梅(2004). 加拿大一枝黄花的研究
进展. 杂草科学, (4): 8~11
Prosser I, Phillips AL, Gitting S, Lewis MJ, Hooper AM, Pickett
JA, Beale MH (2002). (+)-(10R)-Germacrene A synthase
from goldenrod, Solidago canadensis; cDNA isolation, bac-
terial expression and function analysis. Phytochemistry, 60:
691~702
Schmidt CO, Bouwmeester HJ, Franke S, Konig WA (1999).
Mechanisms of the biosynthesis of sesquiterpene enanti-
omers (+)- and (–)-germacrene D in Solidago canadensis.
Chirality, 11: 353~362
收稿 2007-03-07 修定  2007-05-24
资助 苏州市科学技术局农业发展基金(ZN 05 0 3 )。
* 通讯作者( E-mail:lpzheng@suda.edu.cn;Tel:0512-
6 5 8 8 0 2 3 2 )。