全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第1期，2006年2月 77
云南火焰兰的离体快速繁殖
林丹妮 曾宋君* 陈之林 段俊
中国科学院华南植物园，广州 510650
In vitro Propagation of Renanthera imschootiana Rolfe
LIN Dan-Ni, ZENG Song-Jun*, CHEN Zhi-Lin, DUAN Jun
South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China
收稿 2005-06-14 修定 　2005-09-26
资助 中国科学院知识创新工程重要方向项目(kscx2- sw-
319)、中国科学院华南植物园前沿项目(20023301)、
广州市科技计划项目(2004J1-C0201)。
*通讯作者(E-mail: zengsongjun@scib.ac.cn, Tel: 020-
37252990)。
1 植物名称 云南火焰兰(Renanthera imschootiana
Rolfe)。
2 材料类别 种子和实生苗叶片。
3 培养条件 种子萌发培养基：(1) VW；(2) VW+
椰子乳 100 mL·L-1；(3) 1/2MS；(4) 1/2MS+椰子
乳100 mL·L-1；(5) MS；(6) MS+椰子乳 100 mL·L-1；
(7) VW+椰子乳 100 mL·L-1+活性炭 2 g·L-1。叶片
离体培养基：(8) VW+2,4-D 1.0 mg·L-1 (单位下同)+6-
BA 2.5 +NAA 0.2；(9) VW+2,4-D 2.0+6-BA 5.0+NAA
0.5；(10) MS+2,4-D 2.0+6-BA 5.0+NAA 0.5。原
球茎继代增殖和分化培养基：(11)花宝 1号(美国
Haponex公司，N∶P∶K=7∶6∶19) 1.5 g·L-1+花宝
2 号(美国Haponex 公司，N∶P∶K=20∶20∶20)
1.5 g·L-1+椰子乳100 mL·L-1+6-BA 1.0+NAA 1.0；(12)
VW+ 椰子乳 100 mL·L-1+6-BA 1.0+NAA 1.0。生
根壮苗培养基：(13)花宝1号3 g·L-1+蛋白胨2 g·L-1+
活性炭2 g·L-1+NAA 0.5+6-BA 0.2；(14)花宝1号1
g·L-1+花宝2号1 g·L-1+蛋白胨2 g·L-1+活性炭2 g·L-1+
NAA 0.5+6-BA 0.2。培养基均加1.5%蔗糖和0.6%
琼脂，pH 5.2~5.4。培养温度(25±2)℃，光强30~40
mmol·m-2·s-1，光照 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理和种子萌发 将云南火焰兰自
花或异花人工授粉，150 d 左右荚果成熟，自来
水洗净后，用 70% 酒精消毒 30 s，0.1% 升汞消
毒 15 min，无菌水洗 5 次。吸干水分，切开荚
果，将种子散落到培养基(1 ) ~ ( 7 )上。暗培养
15~25 d 后，均可见白色原球茎突破种皮；转入
光下，1 周后原球茎转绿，5 周后原球茎上端出
芽。培养基(1)、(3)上萌发率 40% 左右，(5)上
30% 左右，(2)上 70% 左右，(4)上 60% 左右，(6)
上为 50% 左右。培养基(2)、(4)、(6)中的萌发和
生长速度比(1)、(3)、(5)中快，说明椰子乳对种
子萌发有较大影响。(7)中加了活性炭，萌发速度比
(2)慢，萌发率降为50% 左右，但苗生长较粗壮。
4.2 叶片诱导原球茎和原球茎增殖 切下种子萌发
形成的实生苗的幼叶，培养在培养基(8)~(10)中。
60 d 左右，(9)中叶片切口形成原球茎，诱导率
50%；(8)中 70 d 左右形成原球茎，诱导率 35%；
(10)中 70 d 左右形成原球茎，但诱导率仅 20%。
原球茎在培养基(11)中继代增殖的效果比(12)好，
50 d左右增殖倍率可达到3.0，(12)中为2.5左右；
原球茎在增殖的同时有芽的分化。
4.3 壮苗和生根培养 将种子萌发和叶片小苗在培
养基(13)、(14)上培养，生根率达 100%。植株生
长旺盛，8 周后形成 3~5 cm 高的小苗。在培养
基(13)上比(14)根系发达，但植株较小，生产中
采用(14)作生根壮苗培养基为宜。
4.4 移栽 将培养瓶置于温棚中炼苗1周后，取出
生根苗，洗净附着的培养基，将白水苔用 1 000
倍多菌灵溶液浸泡 1 h，挤干水分，包裹出瓶苗
根部，种植于0.5 cm 小盆中。保持适宜湿度，置
于阴凉通风处，期间不浇水。2周后移入温棚栽培，
进行正常水、肥、药管理，成活率达 9 8 % 以上。
5 意义与进展 云南火焰兰为兰科火焰兰属植物，
主要分布于我国云南东南部地区。附生于树上，
花序自叶腋长出，着花可达十多朵或数十朵，花
色艳丽，花数众多，远观如火焰般绚丽，观赏
价值高。由于云南火焰兰与本属中的其它种及其
近缘属的种类亲和力较强，可作为杂交育种的亲
本，因而采挖非常严重，处于濒危状态。云南
火焰兰的种子无胚乳，在野外需与真菌共生才能
萌发，发芽率极低，人工栽培中虽然可以用常规
的扦插繁殖，但增殖率也很低。我们采用无菌播
种和组织培养，已生产出10 000 多株试管苗，为
这一物种的保护和开发应用开辟了新途径。云南
火焰兰的无菌播种和利用叶片诱导原球茎再出芽的
组织培养方法未见报道。