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植物组织培养中液体生根培养基的研究与应用



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第3期,2006年6月596
植物组织培养中液体生根培养基的研究与应用
陈银龙* 赖小芳 王伯诚 刘守坎
浙江省台州市农业科学研究院,浙江临海317000
收稿 2005-12-07 修定  2006-03-21
资助  浙江省台州市科技局星火计划项目(32301)。
*E-mail: yinlongchen1973@sohu.com, Tel: 0576-5196705
采用液体生根培养基(不加琼脂)对蚊净香草
(Pelargonium graveolens)进行生根培养,并已应
用于非洲菊的生根培养,得到了很好的效果。现
介绍如下。
选用高度大于 3 cm、生长正常的蚊净香草
(Pelargonium graveolens)不定芽以及生根正常的瓶
苗作为研究材料,用蛭石和泥炭(5∶1)为移栽基
质。以 MS 培养基为基本培养基,共配制 6 种生
根培养基,即:(1) 1/2MS(液体) ;(2) 1/2MS+
NAA 0.05 mg·L-1 (单位下同) (液体) ;(3) 1/2MS+
NAA 0.1 (液体) ;(4) 1/2MS (固体) ;(5) 1/2MS+
NAA 0.05 (固体) ;(6) 1/2MS+NAA 0.1 (固体)。
切下壮苗增殖培养基上的不定芽,将高度大于 3
c m、生长正常的单芽,分别转接至生根培养基
(1)~(6)中,每种培养基接 10 瓶,每瓶接5个不
定芽,7和 14 d 时分别统计生根芽的个数,并计
算生根率。将生根瓶苗从培养室取出后,先拧松
瓶盖,在炼苗房放置2 d,然后打开瓶盖炼苗2~3
d。将炼好的苗用清水冲洗干净(固体培养基培养
的瓶苗洗净根部的琼脂),移栽至蛭石和泥炭的基
质中,遮阴,每天洒水保湿,15 d 时统计成活
株数,计算相应的成活率。采用的生根培养基,
除液体培养基外,其余均用 0.7% 琼脂固化。调
整培养基的pH值为5.8。培养室温度控制在26℃
左右,光照时间12 h·d-1,光强约40 mmol·m-2·s-1。
得到如下结果:
1. 生根培养基(2)、(5)比较适宜生根培养,
其中的瓶苗具有根生长快、粗壮,叶绿、坚挺
等特点,相比之下,其余 4 种生根培养基不适合
生根培养(表 1)。
2. 生根培养基(2)培养的苗,其成活率高达
95% 以上,而生根培养基(5)培养的苗成活率很
低,因此认为前者更适宜用于生根培养(表 2)。
总之,本方法有以下优点:(1)节约试剂用
量,如不用琼脂,且每瓶培养基用量可由 25 mL
减至 10 mL;(2)提高接种密度,每瓶5株可提高
到 10 株;(3)省去培养基的烧煮过程,生根苗清
洗过程明显比固体培养基简单;(4)提高移栽成活
率。此外,我们将蚊净香草的生根培养技术,用
在非洲菊的生根培养也取得很好的效果。将三叶
以上的非洲菊不定芽接种至生根培养基 1/2MS+
NAA 0.1 mg·L-1 (液体)中,14 d后,生根率也达
100%,移栽成活率达 95% 以上。由此看来,液
体生根培养基的生根培养技术,可有望解决组培
苗生产中瓶苗移栽成活率低和生产成本高问题,
从而建立起快速、高效、优质的种苗产业化生产
体 系 。
表1 不同生根培养基中不定芽的生根及其它性状比较
生根率/%
培养基 性状
7 d 14 d
(1) 12 62 根生长慢、粗壮,叶深绿、坚挺
(2) 82 100 根生长快、粗壮,叶绿、坚挺
(3) 78 96 根生长慢、细弱,叶黄绿、略畸形
(4) 16 70 根生长慢、粗壮,叶深绿、坚挺
(5) 86 100 根生长快、粗壮,叶绿、坚挺
(6) 76 100 根生长慢、细弱,叶黄绿、略畸形
  接种不定芽数均为 50 个。
表2 不同生根培养基培养的瓶苗及其移栽成活率比较
培养基移栽 时间(月-日) 苗数/株 成活率/%
(2) 09-12 8 100.0
09-24 400 98.0
10-09 1 000 97.8
10-24 2 000 95.1
(5) 08-13 154 0
08-20 154 0
09-01 468 10.6
09-12 304 10.5
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