全 文 ：植物生理学通讯 第 44卷 第 2期，2008年 4月 291
多花脆兰的离体快速繁殖
高丽，李洪林，杨波 *
中国科学院武汉植物园，武汉 430074
In vitro Propagation of Acampe rigida (Buch.-Ham. ex J. E. Smith) P. F. Hunt
GAO Li, LI Hong-Lin, YANG Bo*
Wuhan Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430074, China
收稿 2007-12-17 修定 2008-02-20
﹡ 通讯作者(E-mai l：ya ngbo@wbgcas.cn；Tel：02 7-
8 7 6 1 7 2 5 0 )。
1 植物名称 多花脆兰[Acampe rigida (Buch.-Ham.
ex J. E. Smith) P. F. Hunt]。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发培养基：(1) MS；(2) 1/2MS
(大量元素用量减半)；( 3 ) K C [成份如下：
MgSO4·7H2O 250 mg·L
-1 (单位下同) ；KH2PO4
250；(NH4) 2SO4 500；Ca(NO3) 2·2H2O 1000；
FeSO4·7H2O 25；MnSO4.4H2O 7.5；肌醇(C6H12O6)
100；盐酸硫胺素(VB1) 1；D-甘露糖醇 12.7%] ；
(4) 1 g·L-1花宝 1号(美国Haponex公司产品，N:
P:K=7:16:9)+2 g·L-1花宝 2号(美国Haponex公司产
品，N:P:K=20:20:20) ；(5) MS+100 g·L-1香蕉汁；
(6) 1/2MS+100 g·L-1香蕉汁；(7) KC+100 g·L-1香
蕉汁；(8) 1 g·L-1花宝 1号 +2 g·L-1花宝 2号 +100
g·L-1香蕉汁。原球茎增殖和分化成苗培养基：(9)
1/2MS+6-BA 1.5+NAA 0.2+100 g·L -1香蕉汁；(10)
1/2MS+6-BA 0.5+NAA 0.05+100 g·L-1香蕉汁；(11)
1 g·L-1花宝 1号 +2 g·L-1花宝 2号 +6-BA 1.0+NAA
0.5+100 g·L-1香蕉汁。生根壮苗培养基：(12) 1/
2MS+NAA 0.5；(13) 1/2MS+NAA 0.5+IBA 0.5；
(14) 1 g·L-1花宝 1号 +2 g·L-1花宝 2号 +NAA 0.5。
以上培养基中均附加 3.0%蔗糖和 0.6%琼脂，pH
5.5~6.0。培养温度为(24±2) ℃，光照时间 12 h·d-1，
光照强度 40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 取成熟尚未开裂朔果，经自
来水洗净后，在超净工作台上，先用 75% 酒精
表面消毒 30 s，再用 0.1%升汞溶液消毒 15 min，
无菌水冲洗 5~6次，无菌滤纸吸干表面水分，用
解剖刀切开荚果，将种子散落到培养基(1 )~(8)
上 。
4.2 种子萌发 接种到培养基(1)~(8)上的种子，暗
培养 20 d左右有白色原球茎长出，随后转绿；移
入光下培养 5周后均有芽长出(图 1)。培养基(3)上
的种子约有 30% 萌发，需 4周左右；培养基(1)
上约 50%的种子萌发，需 25 d左右；培养基(6)上
的种子萌发最快，需 15 d左右，萌发率达 95%；
培养基(8)上的种子萌发率达 90%，需 20 d左右。
可见种子在各培养基上均有萌发，但萌发时间和
萌发率各有不同。且培养基(5)~(8)上的种子萌发
率和萌发速度都较未加香蕉汁的培养基(1)~(4)高，
这表明添加香蕉汁有利于多花脆兰种子萌发。
图 1 多花脆兰的种子萌发
4.3 原球茎增殖和分化成苗 将原球茎和小芽的混
合体转移至培养基(9)~(11)上，原球茎顶端迅速长
出小芽，同时在芽的基部又有新的原球茎产生，
继而又分化出芽(图 2)。其中培养基(9)上形成的
芽有部分玻璃化；培养基(10)中芽颜色鲜绿，小
苗生长健壮；培养基( 1 1 )中小苗有部分黄化死
去 。
4.4 壮苗和生根培养 将小苗分成单株转入培养基
(12)~(14)中培养，生根率可达 95%以上(图 3)。
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养瓶，用自来水轻轻洗净根部的培养基，栽入潮
湿的沙土中。注意保持适宜湿度，温度 20~25 ℃
为宜，以 50%~70%遮荫为好，置于阴凉通风处，
成活率达 85% 以上。
5 意义与进展 多花脆兰为兰科脆兰属附生草本植
物，多生于林中树干上或林下岩石上，分布在海
拔 560~1600 m处，我国云南、贵州、香港等
地均有分布，为国家二级保护植物。多花脆兰果
实状似香蕉，又有“香蕉兰”之称。其花瓣黄
色并嵌有深红色条纹和斑点，唇瓣白色，风韵高
雅(图 4)，是兰科植物中极富观赏性的一种兰花。
另外，多花脆兰还具有较高的药用价值，其叶入
药，外用治跌打损伤、骨折等。一般来说，兰
科植物种子无胚乳，需与真菌共生才能萌发，自
然状况下很难萌发。采用无菌播种技术可加快繁
殖速度，大量繁殖优质种苗。本文结果可供野生
多花脆兰资源的保护和商业性生产开发参考。多
花脆兰的组织培养和快速繁殖未见报道。
图 2 多花脆兰的分化成苗
其中培养基(12)中植株生长较慢，根比较细；培
养基(13)中植株生长健壮，生根率达到 98%，接
种 7 d后开始生根，25 d后平均每株根数约 4条
且根系粗壮；培养基(14)中虽然植株生长较快，
但根系较差。
图 3 多花脆兰的组培苗生根
4.5 移栽 将生根的试管苗密瓶移至室内散射光处
炼苗，1周后去掉瓶盖，3 d后再将小苗取出培 图 4 多花脆兰的植株