全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 4期，2007年 8月 741
黄瓦韦的组织培养
韦景枫 *，陶文丞，张声涛，蒙先举
安顺市林业科学研究所，贵州安顺 561000
Tissue Culture of Lepisorus macrosphaerus var. asterolepis
WEI Jing-Feng*, TAO Wen-Cheng, ZHANG Sheng-Tao, MENG Xian-Ju
Forest Research Institue of Anshun, Anshun, Guizhou 561000, China
收稿 2007-03-28 修定 　2007-07-09
资助 贵州省林业科学技术“十五”研究项目。
* E -m a i l：b z s0 6 5 3 8 @ y a h o o. c o m .c n；T el：0 8 5 3 -
3325990
1 植物名称 黄瓦韦(Lepisorus macrosphaerus var.
asterolepis)，也称大瓦韦。
2 材料类别 带孢子的叶片。
3 培养条件 以MS为基本培养基。(1)孢子萌发培
养基：1/2MS+3 g·L-1活性炭；(2)诱导绿色小球培
养基：MS+6-BA 0.1~1.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA
0.05~0.5；(3)芽诱导和增殖培养基：MS+6-BA
0.1~1.0+NAA 0.05~0.5；(4 )生根培养基：1/2
MS+NAA 0~1.0。培养基(2)、(3)加 30 g·L-1蔗糖和 7
g·L-1琼脂；(1)、(4)加 20 g·L-1蔗糖和 7 g·L-1琼脂。
上述培养基 pH均为 6.0，培养温度为(25±2) ℃，
光照 12 h·d-1，光照度为 24~30 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取黄瓦韦带成熟孢子的叶片，
先用洗洁精泡洗，再用自来水冲洗 20 min，放在
超净工作台上用 75%的酒精浸泡 30 s，无菌水冲
洗 1次，再用 0.1%的升汞浸泡 8 min，无菌水冲
洗 5~6次，用无菌吸水纸吸去表面的水分，切成
0.5 cm×0.5 cm的小块备用。
4.2 孢子萌发 把切成小块的带孢子的叶片接种在
培养基(1)上，60 d后孢子陆续萌发，孢子萌发后
形成原叶体。
4.3 诱导绿色小球 把绿色原叶体切小，转接到培
养基(2)上，培养 20 d后长出绿色小球。
4.4 芽的诱导和增殖 将绿色小球转接到芽诱导培
养基(3)上，小球体逐渐长大，并形成芽，然后
长出小叶片(及华和赵玉芬 2001)，培养 30~40 d
后，丛生苗长满培养基表面。1 cm以下的丛生
苗可作继代培养，1 cm以上的丛生苗则转到生根
培养基中培养。
4.5 根的诱导 丛生苗长到高 1 cm左右时，分成
小丛接种于生根培养基(5)上，培养 30~35 d长出
3~5条棕色的根，根长 1~2 cm，生根率在 90%
以上。
4.6 瓶苗移栽 当生根瓶苗高 2~4 cm，长出 4条
左右根时，把瓶盖打开，静置室内通风处炼苗
2~3 d。移栽前基质(腐质土和素沙 =1:1)严格消
毒，将苗的琼脂洗净后，栽于基质中。保持透
光率低于 50%，湿度 80%左右，温度控制在 20~
25 ℃，每周喷杀菌剂和 1/4MS营养液各 1次，随
后逐渐增强光照，降低湿度，成活率 90%以上。
5 意义与进展 黄(大)瓦韦为水龙骨科瓦韦属植
物，分布于我国西南、陕西、湖北、湖南、安
徽、浙江、江西。小型石生蕨，高 10~25 cm。
黄瓦韦革质条形叶对不良环境有较强的适应性，
孢子囊群大而醒目，有较好的观赏性，适于点缀
假山和山石盆景，或作小型盆栽，或与其他植物
混栽，作室内观叶植物。黄瓦韦还有药用价值，
全草入药，清热解毒，利尿通淋。黄瓦韦多生
于山坡林下，或林缘石上。由于生态环境的破
坏，黄瓦韦数量日益减少。黄瓦韦的组培快繁成
功对其种质资源保护和工厂化生产提供了新的可能，
绿色小球途径繁殖还具有效率高的特点(刘瑞林等
2003)。黄瓦韦的组织培养国内外尚未见报道。
参考文献
及华, 赵玉芬(2001). 大叶凤尾蕨的离体培养及植株再生. 植物生
理学通讯, 37 (4): 308
刘瑞林, 王凤彬, 任如意(2003). 蕨菜植物组织培养研究现状. 中
国林副特产, (2): 13~17