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植物组织培养简报摘编



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 3期,2004 年 6 月352
植物材料和外植体 培养条件 结 果 作者(单位)
菠萝( A n a n a s
comosus)台农17号
吸芽
杨本鹏1,﹡ 昝丽梅2
(1中国热带农业科学
院热带生物技术研究
所,海口 57 1 1 0 1;
2海南天香生物工程有
限公司,海口571101)
  (1)芽诱导培养
基:MS+6-BA 2.0
m g ·L -1(单位下同)
+NAA 0.2;(2)丛生
芽增殖培养基:MS +
6-BA 2.0;(3)壮苗
培养基:MS + 6 - B A
1+KT 1.5;(4)生
根培养基:1/2MS+
 NAA 1。以上培养
基均添加 3 % 蔗糖、
7 g·L-1 卡拉胶,pH
为5.8。培养温度为
(26±1)℃,光照时
间 12 h·d-1,光照度
1 000 lx。
  选取果形生长正常的植株上的吸芽,用自来水洗去茎叶上
的泥土及灰尘,小心剥掉叶片,再用0.1% 洗洁精水溶液洗净
整个茎段,吸干水分。于超净台上先在70%酒精中浸泡30 s,
再用0.1%升汞水溶液(含0.1%吐温-20)消毒8~10 min(视老嫩
而定),并用无菌水冲洗3~4次。然后切取1.5 cm长的顶芽茎
段,再纵切成2~4 块(视茎段大小而定),放入培养基(1)中培
养。一般诱导培养7 d 左右,芽就开始萌动,15 d 后芽基部
长出许多白色芽,35 d后1个芽可以分化成5~10个绿色小苗。
将小苗转接到增殖培养基(2)中培养,20 d后,每个小苗就会
形成3~10 株的丛生苗。以后每2~3 株为 1丛转接到增殖培养
基(2)中继续培养,每25~30 d 可以继代 1次,芽的增殖系数
达5~10。把分化苗转入壮苗培养基(3)中培养15~20 d,小苗迅
速长大,同时也长出少量小芽,小芽继续用于增殖,大芽可
用于生根。将大芽转接到生根培养基(4)中培养 15~20 d,便
可长出大量的不定根。随之植株进一步长大,生根率达
100%。把生根的瓶(袋)苗移到自然室温下炼苗 5~7 d,取出
生根苗,洗去根茎上的培养基,用 70% 甲基托布津 1 000 倍
或多菌灵1 000倍液浸泡3 min,然后在荫凉的棚内晾 3~5 h,
再移栽到基质为泥土+河砂+椰糠+牛栏肥+过磷酸钙、pH为
5.0~5.5的疏松透气苗床上,移栽的株行距为8 cm×15 cm,移
栽后淋水,注意湿度(不能太高)。一般1周后即可重新萌发新
根,2 周后开始抽新叶,3 周后可淋施0.3% 的尿素水,5 周后
增加 0.2% 的复合肥一起淋施,以后可适当增加浓度,移栽成
活率达98%以上。一般移栽后3~4个月、苗高15~20 cm可出圃。
收稿 2003-07-28
修定 2004-01-12
* E-mail:yben
peng@hotmail.
com; Tel:0898-
66895555
甘蓝( B r a s s i c a
oleracea)品种中甘
11号
下胚轴
  (1)种子萌发培
养基:1/2MS;(2)
芽 分 化 培 养 基 :
MS+6-BA 1.0 mg·L-1
( 单位下同) + N A A
0.2+AgNO3 4.0; (3)生
根培养基:MS+IAA
0.5。以上培养基均
附加3% 蔗糖、0.7%
琼脂粉,pH值为5.8。
培养温度为 2 5 ℃,
光照16 h·d -1,光照
度2 000 lx。
  预冷处理的种子,流水漂洗 5 min 后,用约 30℃的蒸馏
水浸泡 10 min 左右,转至超净工作台上,加入 75% 乙醇
浸泡 1 min,无菌水冲洗后,再转入0.1%升汞溶液(加 1滴吐
温 -80)中消毒 8 min,无菌水冲洗 6遍后,接种于培养基(1)
中。暗培养 2 d 后,转入光照培养,4 d 后取幼苗下胚轴作
为外植体,接种于培养基(2)中。14 d 后,外植体基部愈伤
组织上可以分化出绿色小芽点,28 d 后芽点即增绿并长大,
形成具5~6个芽的芽丛。切分这些芽丛,继代培养约14 d 后
芽即长大,可转入生根培养基(3)中诱导生根。28 d后白色根
长度能达 3 cm,生根率达 100%。将培养有试管苗的三角瓶
盖子打开,在实验室通风炼苗 7 d,洗去根部培养基,移栽
到装有蛭石的花盆中,成活率达 100 %。
朱艳*(甘肃省农业科
学院生物技术研究中
心, 兰州 730070)
收稿 2003-08-07
修定 2003-12-01
资助 甘肃省科学事
项目(QS022-
C31-48)。
 * E-mail:zhu
yan0102@163.
com,Tel:0931-
3364731
山葵( E u t r e m a
wasabi)品种岛根3

嫩茎、茎尖
  ( 1 ) 起始培养
基:MS+6-BA 0.5
mg· L-1(单位下同)
+ N A A 0.1;(2)分
化 增 殖 培 养 基 :
MS+2-ip 0.5+NAA
0.1;(3)生根培养
基:1 / 2 M S + N A A
0.05。以上培养基均
附加3%蔗糖、0.7%琼
脂,pH值为5.8。培
养温度 18℃,光照
10 h·d-1,光照度为
1 000~1 500 lx。
  从常规人工栽培田间采取生长健壮的茎尖饱满嫩植株,去
掉部分叶片,先用自来水冲洗,再用肥皂水泡洗干净后,在
0.1% HgCl2 溶液中浸泡 5 min,用无菌水冲洗 4 次以上。在
超净工作台上,用单面手术刀切取带腋芽茎段和茎尖,接种
在培养基(1)中。培养 15 d 后,外植体茎尖、带腋芽基部分
化出小芽,形成丛芽,增殖系数 10~12。12 d 后即可进行继
代增殖。取靠近基部生长仍旺盛部分培养在培养基(2)中,当
繁殖到一定数量后,即可转至无激素的MS 培养基上进行壮苗
培养。将生长 20 d 后株高 1~5 cm 以上、外观较粗壮的无根
不定苗,剪去基部后,扦插到培养基(3)中。15 d 后形成根
系,且生根率 98% 以上。生根苗的株高达 5~8 cm,形成有
根试管苗。将生根苗取出,洗去根部培养基,从温室移至珍
珠岩或含细石的砂质土上,1周内注意保湿,成活率可达98%
以 上 。
张丽珍 方琦 丁铭 彭
潞波 张仲凯*(云南省
农业科学院生物技术
研究所,昆明650223)
收稿 2003-09-01
修定 2004-01-12
资助 云南省省院省
核 科 技 项 目
(00YB02)和
北京大学合作
项 目。
* 通讯作者(E-
mail:kai:zhong
99@sina.com,
Tel:0871-
5183204) 。
植物组织培养简报摘编