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帝王秋海棠愈伤组织的诱导和植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第43卷 第1期,2007年2月 117
帝王秋海棠愈伤组织的诱导和植株再生
司徒琳莉*,张小军,宗宪春,任如意
牡丹江师范学院基因工程研究所,黑龙江牡丹江157012
Callus Induction and Plantlet Regeneration of Begonia imperialis Lem.
SITU Lin-Li*, ZHANG Xiao-Jun, ZONG Xian-Chun, REN Ru-Yi
Research Institute of Genetic Engineering, Mudanjiang Teachers College, Mudanjiang, Heilongjiang 157012, China
收稿 2006-09-11 修定  2006-12-27
*E-mail:situlinli@163.com;Tel:0453-6511106
1 植物名称 帝王秋海棠(Begonia imperialis
Lem.)。
2 材料类别 幼嫩叶片、茎段(粗约 1 cm)。
3 培养条件 愈伤组织诱导与分化培养基:( 1 )
MS+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;(2)
MS+6-BA 2.0+NAA 0.1。生根培养基:(3) 1/2
MS+6-BA 1.0+NAA 0.1;(4) 1/2MS+6-BA 0.05+
NAA 0.1。以上培养基均附加 3% 蔗糖和 0.6% 琼
脂,pH 5.4~5.8。培养温度为(25±2) ℃,光强30~40
mmol·m-2·s-1,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 外植体用自来水流水洗0.5~
1 h后,用 75%的酒精表面消毒30 s,再以 0.2%
的 HgCl2 溶液消毒4~6 min,最后用无菌水冲洗5
次左右,洗去植体表面的 HgCl2 残液。
4.2 愈伤组织的诱导 将洗净的叶片和茎段接种到
培养基(1)和(2)上,第1次出现愈伤组织的时间较
长,需 2 个月左右,再次用已经再生分化后的幼
叶诱导,则20 d 左右开始形成绿色、淡绿色、白
色的愈伤组织。愈伤组织在同一培养基中20 d 左
右开始出现绿色芽点。将绿芽切下,接种到培养
基(1)和(2)上,2周后形成丛生芽。丛生芽在培养
基( 2 ) 中的诱导频率较高,培养 2 0 d 时,有
50%~ 6 0 % 的芽长出小叶片。在诱导和分化过程
中,如果出现玻璃化现象,可采用增加琼脂含量
(从 0.6% 增加到 0.7%~0.75%)的办法解决。
4.3 生根与移栽 将愈伤组织分化出的芽接入培养
基(3)和(4)上,20 d后开始有锥状突起;继续生
长10 d 后,全部长出5条以上1.0~3.0 cm 长且
粗壮的根,分化苗在生根培养基上的生根频率约
95%。苗继续伸长,达 4.0~5.0 cm。移栽前敞
口炼苗 24 h 后,从培养瓶中取出生根苗,洗净
附着的培养基,移植到河沙、腐殖土、田园土
(3:l:1)混合的基质中,l周内注意保湿,并覆盖薄
膜,2 周后可用 1/4MS 液喷雾施肥,促进生长。
半个月后揭掉覆膜,保持散射光,逐渐可长成健
壮幼苗,供栽培移植。应注意的一点是,定植
土的温度不宜过高,以免烂根。20~30 d 后,成
活率达 95%。亦可无土栽培帝王秋海棠,栽培基
质选用蛭石和珍珠岩为宜。将营养液浇入盆里,
每次营养液浇灌量以盆中基质全部浸湿并且盆底孔
有少量流出为宜。帝王秋海棠性喜湿润的生态环
境,需要充足的水分和较高的空气湿度。土壤栽
培若供水过量,盆内积水,易引起烂根而导致生
长不良,甚至死亡;而无土栽培的斑叶帝王秋海
棠因其栽培基质疏松,不易积水,故而浇水量可
稍大而不必担心烂根。
5 意义与进展 帝王秋海棠属秋海棠科植物,原产
墨西哥,属根茎类秋海棠,室内观叶植物,其
株形美观,从地下茎抽出丰满的彩色叶片,叶丛
生于根茎,斜卵圆形,茂密,叶面浅绿色,叶
脉两侧及叶缘红褐色,典雅秀丽,深受人们喜
爱。但靠自然分株繁殖,速度缓慢,因此,本
文结果为这一问题的解决提供了可能。秋海棠属
中有些种的组织培养和快速繁殖已有过报道(廖俊
杰等2004),而有关帝王秋海棠的组织培养和快速
繁殖的报道尚未见。
参考文献
廖俊杰, 夏时云, 许继勇, 林玉兴, 麦瑜林(2004). 悬垂秋海棠的组
织培养. 植物生理学通讯, 40 (1): 74