全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 2期,2008年 4月 303
萼脊兰的组织培养和快速繁殖
崔波 *,马杰,张仙云,袁秀云
郑州师范高等专科学校生物工程研究所,郑州 450044
Tissue Culture and Rapid Propagation of Sedirea japonica (Linden et Rchb. f.)
Garay et Sweet
CUI Bo*, MA Jie, ZHANG Xian-Yun, YUAN Xiu-Yun
Institute of Bioengineering, Zhengzhou Teachers College, Zhengzhou 450044, China
收稿 2007-12-30 修定 2008-03-13
资助 河南省科技攻关项目(0 52 405 00 05 )。
* E-ma il:laocuibo@163.com;Tel:037 1-65 5010 86
1 植物名称 萼脊兰[Sedirea japonica (Linden et
Rchb. f.) Garay et Sweet]。
2 材料类别 授粉后 120 d成熟蒴果内的种子。
3 培养条件 (1)无菌播种培养基:1/4MS+KT 0.5
mg·L-1 (单位下同)+2 g·L-1蛋白胨+10%椰乳(V/V)+
15 g·L-1蔗糖 +1 g·L-1活性炭;(2)增殖及分化培养
基:1/3MS+6-BA 5+NAA 0.5+10%椰乳 +2 g·L-1蛋
白胨 +20 g·L-1蔗糖 +3 g·L-1活性炭;(3)壮苗及生
根培养基:1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.5+2 g·L-1蛋白
胨 +2 g·L-1活性炭。所有培养基均加 6% 琼脂,
pH 5.2~5.4,培养温度(25±2)℃,光照 12 h·d-1,
光强 54~65 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 启动培养 采集蒴果后,先用 75%的乙醇进
行表面灭菌 30~60 s,再用 0.1%氯化汞溶液进行
表面灭菌 15 min,无菌水冲洗 5次后,将蒴果剖
开,将种子刮入无菌水中,摇匀后用吸管将种子
吸出,注在培养基(1)上进行培养。约 20 d后种
子膨大变绿,40 d后发育形成原球茎状体。
4.2 增殖与分化培养 将无菌播种获得的原球茎转
接到培养基(2)上,10 d后原球茎开始萌动,40 d
后明显增殖,繁殖系数一般在 1 0~ 15。继续培
养,约有 80%的原球茎状体陆续分化成小苗,而
原球茎状体可继续用于继代培养。继代周期约为
90 d。
4.3 壮苗与生根 小苗转入培养基(3)中,进行壮
苗生根培养。经过 80~90 d,生根率可达 100%,
每株有根 4~5条。待植株高达 5 cm以上,根长
3~5 cm时,即可进行炼苗移栽。
4.4 小苗移栽与养护 移栽前 7 d将小苗连同瓶一
道移至温室苗床上,用遮阳网遮盖。移栽时将小
苗取出(图 1),洗净根上粘连的培养基,定植于
水苔为基质的穴盘中,经常喷水,保持温度
18~25 ℃,空气湿度 70%~90%,光照强度 87~110
µmol·m-2·s-1。1个月后移栽成活率达 95%以上。
5 意义与进展 萼脊兰为兰科萼脊兰属植物,产
于我国浙江、云南等地,日本和朝鲜也有分布。
其总状花序长可达 20 cm,下垂,疏生 6~10朵
花,具浓郁的香气;萼片和花瓣白绿色,有红
色的条斑。因其花色清丽,香味芬芳,观赏期
长,养护简单且耐寒,故越来越受到人们的喜
爱。其种子极为细小,胚未分化,不含胚乳,
萌发率很低。但种子在人工培养基上可发育成幼
小植株。采用人工授粉方法,可获得蒴果及大量
的种子,用种子作为组培材料,可在短期内实现
快速繁殖,得到大批的种苗。这对于该物种的保
护和开发具有一定的意义。目前尚未见该种植物
组培快繁的报道。
图 1 出瓶的萼脊兰小苗