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白银寿的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 5期,2008年 10月 951
白银寿的组织培养与快速繁殖
张昊鹏 1, 宋晓涛 1, 张耀 1, 于明冉 1, 田露 1, 李昊阳 1, 左志宇 1,3, 安晓云 1, 杨雪 1,2, 孙涛 1,3,*
1天津 102中学生物教研室, 天津 300161; 2南开大学生命科学学院, 天津 300060; 3天津医科大学基础医学院, 天津 300070
Tissue Culture and Rapid Propagation of Haworthia emelyae var. emelyae V.
Poelln
ZHANG Hao-Peng1, SONG Xiao-Tao1, ZHANG Yao1, YÜ Ming-Ran1, TIAN Lu1, LI Hao-Yang1, ZUO Zhi-Yu1,3, AN Xiao-Yun1,
YANG Xue1,2, SUN Tao1,3,*
1Teaching and Research Section of Biology, Tianjin 102 Middle School, Tianjin 300161, China; 2College of Life Sciences, Nankai
University, Tianjin 300060, China; 3College of Basic Medicine, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China
收稿 2008-06-30 修定 2008-08-21
* 通讯作者(E-mail: st820113@gmail.com; Tel: 13752250461)。
1 植物名称 Haworthia emelyae var. emelyae V.
Poelln, 中文惯称白银寿。
2 材料类别 成年的白银寿春生花茎子房, 实验材
料来源于日本奈良多肉植物研究会。
3 培养条件 (1)启动培养基: MS+6-BA 2 mg·L-1 (单
位下同)+KT 1+NAA 0.2; (2)叶基分化培养基: MS+
6-BA 0.5+KT 2; (3) 继代与增殖培养基: MS+6-BA 0.5+
KT 1+NAA 0.05; (4)复壮与生根培养基: 1/2MS+DPU
(3,3 -二苯基脲) 1+NAA 0.2。以上培养基均加入
3%蔗糖和 0.6%聚合胶(polygel), pH 6.0。培养温
度为(25±2) ℃, 光照时间 8 h·d-1, 光照强度约为 60
µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 选取温室内栽种的成年植株,
取其春生花茎上半部花蕾未开放部分(充分保留花
蕾子房部)后经流水冲洗 30 min以上, 超净台上以
0.1% HgCl2溶液(pH调至中性后加入0.05% Tween-
20)浸泡 7 min, 无菌水再冲洗 6次。将消毒的材料
置于无菌滤纸上, 分离单个花蕾子房部位作为外植
体。
4.2 启动培养 将外植体接入启动培养基(1)上, 30 d
后, 子房部显著膨大但无愈伤组织形成; 40 d后, 子
房部继续膨胀, 基部有芽形成; 60 d后, 膨胀的子房
组织逐渐玻璃化, 但其基部的芽丛逐渐形成完整的
植株形态, 叶片逐渐展开; 将芽的叶片逐一剥离并
扦插于叶基分化培养基(2)中(图 1)。
4.3 分化培养 上述扦插于培养基中的叶片大约经
过7 d可以在基部形成球状隆起, 每片叶子1~10个
隆起(图 2)。20 d后这些球状隆起分别分化为芽,
分离这些芽接种到继代与增殖培养基上。残余叶
片置于原培养基中可以继续产生新的芽, 这样每一
片母叶可以陆续收获3~4批芽, 平均每片叶子可以
获得 20~30个侧芽。同时这样的处理还可以兼顾
分化和增殖。
4.4 芽的增殖 将上述分离获得的芽接种到继代与
增殖培养基(3)中, 芽会在 20 d左右生长成型并基
图 1 白银寿的启动培养
图 2 白银寿的增殖
植物生理学通讯 第 44卷 第 5期,2008年 10月952
部可形成2~3个侧芽, 这些侧芽也可以分离再次转
入增殖培养基中继续扩增, 但增殖倍率较低, 为
2~3倍, 结合叶基分化芽的方式可以提高增殖倍
率。
4.5 壮苗与生根 在增殖培养基(3)上有典型形态的
苗可转入生根培养基(4)中培养1~2个月, 同时适当
辅助散射日光, 待苗健壮并出现明显成株形态时即
可移栽(此时幼苗的新生叶片顶端可以形成此品种
所特有的白色 “窗 ”, 表明壮苗成功), 生根率 90%
以上。生根过程中很难见到丛生根形成, 而多数为
基部出现1~2条粗大的根或根原基隆起, 只要形成
根原基的隆起即可移栽成活。
4.6 移栽 采用日本产颗粒火山岩(赤玉土):稻壳碳
(3:1)作为基质, 高压灭菌后装入苗钵。取出开口炼
苗2 d的出瓶苗, 用洗洁精溶液洗去培养基, 以0.01%
乙蒜素浸泡 15 min后置于通风干燥处风干 3 d后
均匀插入移栽的基质中, 覆盖塑料薄膜以保湿。每
周用 0.005%乙蒜素溶液浇灌一次, 逐渐增加光照,
1个多月后可见生长。出瓶苗适当风干(干法移栽)
对新根萌发有一定的促进作用, 且可缓解白银寿组
培苗的生理性腐烂还可杀菌, 移栽成活率接近100%
(图 3 )。
5 意义与进展 白银寿是百合科瓦苇属的小型多肉
植物, 原产于南非。植株低矮, 叶呈莲座状紧凑排
列, 叶顶端呈夹杂红色纹路的浓白色, 是此品种的
典型特征, 故名 “白银 ”。它是百合科瓦苇属中非
常有代表性的一个种, 同时也是一种非常优秀的杂
交亲本。日本园艺家曾以白银寿为亲本进行属内
杂交, 获得了一系列优秀的杂交后代, 具有很高的
观赏价值。白银寿有极高的观赏和收藏价值, 是植
物园和园艺植物爱好者喜欢收集的珍贵植物。由
于其繁殖率很低, 繁殖大多用分株、叶插和种子繁
殖, 不易成活且生长缓慢, 采用组织培养方法可能
是解决此问题的途径。白银寿因其特殊的组培特
性, 需结合叶基分化和芽增殖双重扩增手段方可提
高增殖倍率, 这也是解决难分蘖多肉植物的一个组
培模式。与白银寿同属的康平寿(孙涛等 2003)、
截形十二卷(孙涛和李德森 2002)、克里克特寿(左
志宇等 2 0 0 7 )、西山寿 (宋晓涛等 2 0 0 7 )、
Haworthia mirabilis (赵昂等2007)和美吉寿(王泉等
2008)等多肉植物的组织培养已有过报道, 但白银寿
的组培和快繁的报道未见。
参考文献
孙涛, 金蕊, 李德森(2003). 康平寿的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 39 (3): 51
孙涛, 李德森(2002). 截形十二卷的组织培养与快速繁殖. 植物
生理学通讯, 38 (6): 47
宋晓涛, 沈萌, 左志宇, 安晓云, 尹晓爽, 孙涛, 杨雪, 李德森(2007).
十二卷属植物西山寿的组织培养与快速繁殖. 植物生理学通
讯, 43 (5): 883~884
王泉, 左志宇, 宋晓涛, 张耀, 张昊鹏, 尹晓爽, 安晓云, 杨雪, 孙涛
(2008). 百合科多肉植物美吉寿的组织培养与快速繁殖. 植
物生理学通讯, 44 (1): 123~124
赵昂, 左志宇, 宋晓涛, 张晓凤, 安晓云, 尹晓爽, 孙涛, 杨雪(2007).
Haworthia mirabilis的组织培养与快速繁殖. 植物生理学通
讯, 43 (6): 1137~1138
左志宇, 李建希, 安晓云, 尹晓爽, 杨雪(2007). 克里克特寿的组
织培养与快速繁殖. 植物生理学通讯, 43 (2): 311~313图 3 白银寿的移栽