全 文 ：植物生理学通讯 第 40 卷 第 3期，2004 年 6 月396
从事植物组织培养工作的点滴经验
郑春明1,* 赵鹂2 徐礼根3
1 台州科技职业学院，黄岩 318020；2 丽水职业技术学院，丽水 323000；3 浙江大学生命科学学院，杭州 310012
收稿 2003-09-16 修定 　 2004-01-15
*E-mail:chunming 863@163.com,Tel:0576-8389986
植物组织培养中常常遇到试管苗的根向上生
长和污染率居高不下的问题。如何解决这一问
题？我们就自己近年来从事组织培养工作所积累的
一些经验作些介绍，以供同行参考。
1 用遮光方法防止根向上生长
植物组织培养中，经常遇到试管苗的根不向
下生长。其原因在于植物组织培养室中，培养架
的搁板多数采用透明玻璃，每个架子少则 4 层，
多则十几层，每层均有 2 盏 40 W 日光灯，这样，
放在玻璃搁板上的培养物既受到上方日光灯(该灯
距培养物的距离较远)的照射，又受到下方日光灯
(该灯距培养物的距离较近)的照射，根的生长同
时受到向地性生长和背光性生长的作用，后者的
作用大于前者时 ，根就会翘向上方生长；反之，
根就会向下生长。我们在菊花和百合等组织培养
时均观察到根向上生长的现象。为了改变根的生
长方向，我们根据根的背光性生长原理，在菊花
培养物的底部用黑色薄膜遮住来自下方的光照，
结果，翘向空中约3 cm的菊花根在第2天就开始
往下生长，到 5 d 就扎入约 2 cm 深的培养基处。
后来，为了改进对根的遮光和减少根对光的吸
收，我们用 2 层布，即下层用白布(增加光的反
射，减少光的吸收)，上层用黑布(以增强对来自
下方光的吸收作用)平铺在玻璃板上，效果非常理
想。虽然也有报道说活性炭能促进根的生长，但
并未谈及解决根向上生长的问题。我们认为，加
活性炭虽然能解决这个问题，但存在很多弊端。
例如，增加了配制培养基的难度(灭菌后的活性炭
·小方法·
易沉淀，必须在培养基凝固前不断摇动才能使活
性炭分布均匀一些)，成本提高；活性炭缺少选择
性吸收，会吸收掉培养基中的有效成分，从而影
响培养物的生长发育。因而，不要轻易使用活性
炭。
2 流水冲洗外植体，降低污染率
污染是植物组织培养中三大难题(污染、褐变
和玻璃化现象)之一。常规的解决方法是先做选择
有较好效果的灭菌剂种类、浓度和灭菌时间的试
验，这对多数植物来说有一定的效果，但对有些
污染率高的就不一定能达到预期效果。我们在水
仙的组织培养中，曾按照这种方法操作，污染率
几乎达到100%。经反复观察污染发生的部位、时
间以及污染的微生物种类，推测是水仙鳞茎形成
过程中有霉菌孢子随雨水进入到鳞茎基部，化学
灭菌剂难以渗透到鳞茎基部而杀死孢子，无论用
哪种灭菌剂，以及如何提高灭菌剂的浓度和延长
灭菌的时间，都难以灭菌。为此，我们改用延
长流水冲洗时间以冲走嵌在水仙鳞叶基部的霉菌孢
子，污染率可降低到 1 0 % 。而且，由于化学灭
菌剂的处理时间比较短，对水仙组织的损害程度
也比较轻，在短短的19 d中就诱导出了较大的小
鳞茎。用此法比一般水仙组培所报道的最低污染
率还要低4%左右，诱导出小鳞茎的时间也缩短约
10 d。