全 文 ：植物生理学通讯 第 44卷 第 3期，2008年 6月 519
版纳蝴蝶兰的组织培养与快速繁殖
方中明 1,2，吴坤林 1，陈之林 1，段俊 1，曾宋君 1,*
1中国科学院华南植物园，广州 510650；2中国科学院研究生院，北京 100049
Tissue Culture and Rapid Propagation of Phalaenopsis mannii Rchb. F.
FANG Zhong-Ming1,2, WU Kun-Lin1, CHEN Zhi-Lin1, DUAN Jun1, ZENG Song-Jun1,*
1South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China; 2Graduate University, Chinese Acad-
emy of Sciences, Beijing 100049, China
收稿 2008-03-12 修定 2008-05-21
资助 广州市科技计划项目(2007Z3-E0631)和中国科学院知
识创新工程重要方向项目(kscx2-sw-31 9)。
* 通讯作者(E-mail：zengsongjun@scib.ac.cn；Tel：020-
3 7 2 5 2 9 9 0 )。
1 植物名称 版纳蝴蝶兰(Phalaenopsis mannii
Rchb. F.)。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发培养基：(1) MS；(2) MS+
椰子乳 100 mL·L-1；(3) 1/2MS；(4) 1/2MS+椰子
乳 100 mL·L-1；(5) 1/4MS；(6) 1/4MS+椰子乳 100
mL·L-1；(7) 1/2MS+苹果汁 100 mL·L-1；(8) 1/2MS+
椰子乳 100 mL·L-1+苹果汁 100 mL·L-1；(9) VW；
(10) VW+椰子乳 100 mL·L-1；(11) KC；(12) KC+
椰子乳 100 mL·L-1。原球茎增殖与分化培养基：
(13) 1/2MS+6-BA 2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5；
(14) 1/2MS+椰子乳 50 mL·L-1+6-BA 2.0+NAA
0.5；(15) 1/2MS+活性炭 2 g·L-1+6-BA 0.5+NAA 1.0；
(16) 1/2MS+活性炭 2 g·L-1+椰子乳 100 mL·L-1+6-
BA 0.5+NAA 1.0。生根与壮苗培养基：(17) 花宝 1
号 3 g·L-1+蛋白胨 2 g·L-1+活性炭 2 g·L-1+NAA 0.5+
椰子乳 100 mL·L-1+香蕉汁 50 g·L-1；(18) 花宝 1号
1.5 g·L-1+花宝 2号 1.5 g·L-1+蛋白胨 2 g·L-1+活性
炭 1.5 g·L-1+NAA 0.5+椰子乳 100 mL·L-1+香蕉汁
50 g·L-1。以上培养基均附加 2.0%蔗糖和 0.6%琼
脂，pH 5.2~5.4。培养温度为(25±2) ℃，光照
强度 30~40 µmol·m-2·s-1，光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 将版纳蝴蝶兰进行人工授粉，
150 d左右荚果成熟，取略带黄色的蒴果用自来水
洗净后，在超净工作台上用 70%酒精的棉球擦拭
干净蒴果表面，接着于 70%酒精中浸泡 30 s，再用
0.1%升汞消毒 15 min，无菌水冲洗 5次。用无
菌解剖刀将蒴果纵向剖成两半，用无菌滤纸吸干
蒴果表面水分，剪除上下两端，沿中缝线纵向切
开蒴果，刮出种子于无菌水中制成悬浮液，并将
其摇匀后吸取 1 mL滴入培养基(1)~(12)上，使之
均匀分布。每处理小瓶播种 20瓶，从中取各处
理中小瓶 5瓶于黑暗条件下培养，其他光照培养。
4.2 种子萌发 在光照培养中，1周后原球茎膨大，
30 d后转绿，60 d后原球茎上端出芽。培养基
( 1 )、( 3 )、( 7 )、( 9 )、( 11 )上萌发率在 1 0% 左右，
(2)、(8 )、(10)上为 50% 左右，(12)上为 60% 左
右，(6)上为 70%左右，(5)上仅极少数萌发，(4)上
萌发率最高，达到 85% 左右。培养基(2 )、(4 )、
(6 )、(8)、(10)、(12)中的萌发和生长速度比(1)、
( 3 )、( 5 )、( 7 )、( 9 )、( 1 1 )中快，说明椰子乳能促
进版纳蝴蝶兰种子的萌发。在暗培养中，( 1 )、
(3)、(9)、(10)上的萌发率比光下培养的高 10%左
右，( 4 )、( 6 )、( 1 0 )、( 1 2 )上的萌发率为 6 0 % 左
右。光暗培养比较表明，在培养基(4)上光下培养
有利于版纳蝴蝶兰种子萌发。
4.3 原球茎的增殖与分化 切下种子萌发形成的实
生苗的幼叶后，将其培养在培养基(13)和(14)中均
能进行原球茎的增殖，(14)的效果明显比(13)好，
在(13)中增殖时有部分原球茎死亡，40 d的继代
周期内可达到 2.5倍左右，而(14)中原球茎的增殖
率在 40 d的继代周期内可达到 3倍以上(图 1)。原
球茎在(15)、(16)中能分化成苗，培养基(16)对原
球茎分化效果较好，分化率可达 85% 以上。
4.4 生根与壮苗 将分化出具有1~2片叶长1.0~1.5
cm的小苗转入培养基(17)、(18)上培养，20 d左
右统计，生根率均可达 95%以上，每株有 3~4条
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根，但培养基(18)上的根系更为健壮(图 2)。
4.5 炼苗与移栽 出瓶时，将培养瓶置于温棚中炼
苗 1 周后，取出生根苗，洗净根部附着的培养
基，以 1 000倍多菌灵溶液浸泡 1 h的白水苔为基
质，挤去水分，包住苗根部，种植于直径为 0.5
cm小盆中。保持适宜湿度，置于阴凉通风处，
期间不浇水，2 周后移入温棚中栽培，并正常
水、肥、药管理，成活率达 9 8 % 以上(图 3 )。
5 意义与进展 版纳蝴蝶兰是兰科蝴蝶兰属植物，
生长于海拔 1 350 m的常绿阔叶林中树干上，分
布于我国云南南部、尼泊尔、锡金、印度东北 部、缅甸、越南等地。其花色带紫褐色横纹斑
块，观赏价值高，是重要的野生观赏兰花和杂交
亲本。由于其原生地环境的破坏和过度的人工采
挖，野外种群数量已极为稀少，日益濒危。版
纳蝴蝶兰的种子在自然状态下需与真菌共生才能萌
发，萌发率极低，也很难用其他的传统繁殖方式
进行繁殖。采用无菌播种培养，能够在短时间内
获得大量种苗，对满足市场需要和野生资源的保
护可能有潜在的应用价值。同属植物中虽有蝴蝶
兰的无菌播种(范成五等 2006)和组织培养的报道
(曾宋君等 2 0 0 0；李进进等 2 0 0 0；王再花等
2007)，但版纳蝴蝶兰的无菌萌发和试管育苗尚未
见报道。
参考文献
范成五, 黄燕芬, 芶久兰, 刘建英(2006). 蝴蝶兰无菌播种繁殖试
验. 贵州农业科学, 34 (4): 28~29
李进进, 廖俊杰, 柯丽婉, 蔡佩玲(2000). 蝴蝶兰根段的组织培养.
植物生理学通讯, 36 (1): 37
王再花, 朱根发, 吕复兵, 叶庆生(2007). 蝴蝶兰快速繁殖及花芽
诱导. 亚热带植物科学, 36 (3): 65~66
曾宋君, 彭晓明, 张京丽, 赵逢畔(2000). 蝴蝶兰的组织培养和快
速繁殖. 武汉植物学研究, 18 (4): 344~346
图 3 移栽成活的版纳蝴蝶兰试管苗
图 1 版纳蝴蝶兰原球茎在培养基(14)中的增殖和分化
图 2 版纳蝴蝶兰原球茎在培养基(18)上壮苗生根