全 文 ：植物生理学通讯 第 40卷 第 6期，2004年 12月 1
天女木兰的离体培养和快速繁殖
周凌娟1 褚建民2 罗凤霞3,* 李婷4
1中国科学院植物研究所植被数量生态学重点实验室，北京 100093；2中国林业科学研究院林业研究所，北京 100091；
3 北京市农林科学院蔬菜研究所，北京 100089；4 沈阳农业大学林学院，沈阳 110161
In Vitro Culture and Rapid Propagation of Magnolia sieboldii
ZHOU Ling-Juan1, CHU Jian-Min2, LUO Feng-Xia3,*, LI Ting4
1 Laboratory of Quantitative Vegetation Ecology, Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093; 2 Research
Institute of Forestry, Chinese Academy of Forestry, Beijing 100091; 3Institute of Vegetable Research, Beijing Academy of Agricul-
tural and Forestry Sciences, Beijing 100089; 4College of Forestry, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161
收稿 2004-02-13 修定 2004-09-06
* 通讯作者(E-mail：luofx@126.com, Tel: 010-51503028)。
1 植物名称 天女木兰 (Magnolia sieboldii), 又名天
女花、小花木兰、山牡丹。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种胚萌发培养基：(1)B5+6-BA 0.5 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.05。继代繁殖培养基：(2)
B5+TDZ 0.3+NAA 0.03+VC (抗坏血酸)500.0或 AC
(活性炭)500.0；(3)B5+6-BA 2.0+NAA 0.2+VC 500.0
或 AC 500.0。继代苗生根培养基：(4)1/2B5+NAA
0.5+AC 1 000.0+VB (维生素B)20.0。愈伤组织诱
导培养基：(5)B5+6-BA 2.0+2,4-D 0.5+VC 500.0。
以上培养基均附加3.0% 蔗糖、0.6% 琼脂，pH 5.8
~6.0，121~124℃下灭菌20 min。光照度1 000 lx
左右，光照14~16 h·d-1，培养温度白天(23±2)℃，
夜间 2 0℃。
4 生长与分化情况
4.1 无菌体系的建立及初代培养 种子经浓硫酸浸
泡4~5 min，再用无菌水浸泡8~10 h，或直接用
水浸泡 48 h 后去掉假种皮、中种皮、内种皮。
然后以 75% 酒精浸泡 0.5 min，0.1% 升汞消毒 8
min 后，用无菌水洗 3 次，再以无菌水浸泡 4 h，
接种到培养基(1)上。20 d 后出苗，萌发率可达
9 5 % 。幼苗有的生根，有的不生根。幼苗均长
出真叶，苗向高生长。无菌水浸种 4 h 比未浸泡
种子提前 3~4 d 萌发。
4.2 继代增殖培养 将初代培养的无菌苗转入培养
基(2)、(3)上，将有根苗根部切去。培养基(2)上
月增殖率可达3.7，45 d 左右可获得稳定增殖；
(3)上月增殖率1.9，2~3个月后才能较稳定增殖。
培养基(3)中试管苗的长势好于(2)。培养基(2)中
试管苗增殖方式存在个体差异，有丛生芽增殖方
式和腋芽增殖方式。(3)比(2)成本低。试管苗个体
间增殖率有显著差异，部分苗存在生长退化现
象，严重的可导致苗死亡。这使得天女木兰继代
繁殖难以达到较高增殖率。褐化是继代繁殖的重
要障碍，培养基附加抗坏血酸或活性炭能减轻褐
化对试管苗生长的毒害。最佳继代间隔时间为
25~30 d。
4.3 生根诱导 在无菌体系建立阶段，培养基(1)
中有 70% 的萌发苗直接生长为有根的完整植株。
4 周后，根长可达 3 cm，单株根条数最多可达 4
根。经继代繁殖的无根苗分切后转入培养基(4)
中，20 d 后生根，生根率可达 85%。30 d 后，
单株根条数可达到4~6条，根长可达4~5 cm，苗
高 5~6 cm。
4.4 愈伤组织诱导 由于培养基褐化严重，实验只
通过试管苗茎段、根段切成小片置于培养基(5)上
获得了少量愈伤组织，其中胚性愈伤组织占 5%。
4.5 组培苗的移栽 试管苗长到4~6 cm、根长至
4~5 cm时，打开培养瓶封口膜，室内放置2~3 d，
再移入自然光下适应 3~4 d 后，取出小苗，用无
菌水洗净附着在根部的培养基，栽植于温室内苗
床基质上。苗床基质为沙、草炭、壤土按 3 ∶
2∶2混合。定期喷施1/2Hoagland培养液，室内
相对空气湿度为 80~85，温度 20~25℃。2~3 周
后，移入大田栽植。移入初期，要加遮荫网遮
荫，并经常喷水，成活率在 80 以上，生长良好。
5 意义与进展 天女木兰是国家三级保护渐危种，
仅分布在辽宁长白山脉和黄山一带，是木兰科中
最抗寒的品种，具有很高的观赏和经济价值。但
其育苗栽培技术难度大，速度慢, 嫩枝扦插生根也
需要 3 个月以上，因此其种质资源已日趋濒危。
本文建立了天女木兰离体培养快速繁殖体系。无
论从苗木数量还是质量上看，离体培养都比常规
育种优越得多。因此，本文结果对天女木兰的种
质资源保存有一定的参考价值。