全 文 :植物生理学通讯 第43卷 第1期,2007年2月134
杏香兔儿风的组织培养与快速繁殖
龙祥友*,贺定翔,郭德美,郑建立
贵州信邦中药发展有限公司,贵州凯里 560013
Tissue Culture and Rapid Propagation of Ainsliaea fragrans Champ.
LONG Xiang-You*, HE Ding-Xiang, GUO De-Mei, ZHENG Jian-Li
Guizhou Xinbang Chinese Traditional Medicine Development Company Limited, Kaili, Guizhou 560013, China
收稿 2006-11-15 修定 2007-01-05
*E-mail:xylong168@163.com;Tel:0855-2118896
1 植物名称 杏香兔儿风(Ainsliaea fragrans
Champ.)。
2 材料类别 种 子 。
3 培养条件 基本培养基为 MS。(1)种子萌发培养
基:MS+6-BA 0.2 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;
(2)分化培养基:MS+KT 0.75+NAA 0.2;(3)壮苗
培养基:MS+6-BA 0.2+NAA 0.5;(4)生根培养
基:1/2MS+IBA 0.5。以上培养基均附加30 g·L-1
蔗糖和6 g·L-1琼脂,pH 5.8。培养室温度为(25±
2) ℃,光照时间为12 h·d-1,光强为30~40 mmol·
m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取成熟的种子,于自来水下
冲洗 20 min,洗洁精溶液浸泡 15 min,再用自
来水漂洗干净。置于超净工作台上,先用 75% 酒
精浸泡45 s,0.1% 升汞浸泡8~10 min,无菌水
冲洗 5 次以上,用无菌滤纸吸干种子表面的水,
接种于培养基(1)中。培养20 d后种子开始萌发,
32 d 后形成黄绿色颗粒状愈伤组织团。
4.2 愈伤组织分化 将愈伤组织团转接于培养基(2)
中进行培养,20 d 后陆续分化出 3~5 个丛生芽。
反复分切丛生芽,在培养基(2)中进行增殖培养,
可以获得大量的丛生芽。
4.3 壮苗 将增殖后的丛生芽转入到培养基(3),丛
生芽逐渐长大,20 d 时转入生根培养。
4.4 生根 将经过壮苗培养的无根苗切下,转接于
培养基(4)中培养,25 d后平均长出4~9条长0.5~
4.5 cm的白色根,诱导生根率达98%以上(图 1)。
4.5 炼苗及移栽 当大部分苗根长达3 cm以上时,
打开瓶盖,炼苗 2~3 d,用镊子将苗轻轻夹出,
用清水洗去基部残留的培养基,栽于腐殖土和园
土(1:2)混合的苗床中,然后浇透水,适当遮阴,
成活率可达 9 0 % 以上。
5 意义与进展 杏香兔儿风属菊科兔儿风属多年生
草本,具匍匐状较短的根茎。茎直立,高 30~60
c m,具棕色长毛,不分枝。叶 5~6 枚,着生茎
的下部近乎轮生。头状花序细长,有短梗,成
总状花丛。瘦果倒披针状长椭圆形。花期 9~10
月。分布于华东、中南各地。生于山坡阴地。
具有清热,利湿,治虚痨咳血、湿热黄疸等功
效,应用前景广泛。目前,杏香兔儿风主要靠
野生自然繁殖,用种子播种很少萌发。随着市场
上用药量的增加,野生资源开始逐年下降。我们
采用杏香兔儿风种子通过组织培养快繁技术繁殖的
2 万多株试管苗,已经移栽到大田。从植株前期
的生长来看,组织培养苗的长势明显优于野生
苗。杏香兔儿风由野生到工厂化生产成苗,是否
会造成药用成分和含量的变化,尚待进一步研
究。杏香兔儿风的组织培养与快速繁殖尚未见报
道。
图1 杏香兔儿风的生根