全 文 ：植物生理学通讯 第43卷 第1期，2007年2月 131
假鞭叶铁线蕨孢子的组织培养
罗顺元，王任翔*
广西师范大学生命科学学院，广西桂林 541004
Tissue Culture of Spores of Adiantum malesianum Ghatak
LUO Shun-Yuan, WANG Ren-Xiang*
College of Life Science, Guangxi Normal University, Guilin, Guangxi 541004, China
收稿 2006-10-30 修定 2007-01-15
*通讯作者(E-mail：WRX05@126.com；Tel：0773-
5846391)。
1 植物名称 假鞭叶铁线蕨(Adiantum malesianum
Ghatak)。
2 材料类别 成熟孢子。
3 培养条件 孢子萌发培养基：1/2MS+30 g·L-1 蔗
糖。原叶体增殖培养基：(1) 1/2MS+30 g·L-1 蔗
糖；(2) MS+30 g·L-1蔗糖；(3) 1/4MS+30 g·L-1蔗
糖；(4) 1/8MS+30 g·L-1蔗糖；(5) MS；(6) MS+10
g·L-1蔗糖；(7) MS+60 g·L-1蔗糖；(8) MS+100 g·L-1蔗
糖；(9) MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同) ；(10)
MS+6-BA 2；(11) MS+6-BA 6；(12) MS+NAA 0.5；
(13) MS+NAA 2；(14) MS+NAA 6；(15) MS+6-
BA 2+NAA 2。所用培养基均添加 7 g·L-1 琼脂，
pH 6.0。培养温度为(25±2) ℃，日光灯光源，光照强
度为30~40 mmol·m-2·s-1，光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 将假鞭叶铁线蕨叶顶端的孢
子刮下，收集在白纸上，除去杂质。把孢子用
滤纸包好，蒸馏水浸泡2 h，75%酒精灭菌30 s，
无菌水漂洗 1 次，再用 5% NaClO 溶液消毒 15
min，无菌水漂洗3次(每次十几秒钟)。然后将消
过毒的孢子接种于孢子萌发培养基上。
4.2 孢子萌发 6 d左右，培养基上可见到零星的
绿色小点，显微镜检验结果为孢子萌发。50 d左
右可见原叶体形成。假鞭叶铁线蕨的配子体在孢
子萌发培养基上生长良好，到原叶体阶段后，原
叶体彼此相联，簇状，几乎没有单个原叶体。
4.3 原叶体的增殖 将原叶体接种到原叶体增殖培
养基(1)~(4)上，发现随着盐浓度的降低，原叶体
长势依次变弱，其中以(2)最好。说明 MS 大量元
素对原叶体的增殖有影响，增殖培养基应以全量
MS 大量元素为宜。在此基础上，再测试蔗糖和
生长调节物质的影响。在培养基(2)、(5)、(6)、
(7)、(8)上，以(6)增殖速度最快，长势最好，60 d
后可增殖 80 多倍；培养基(5)上生长缓慢；培养
基(2)、(7)、(8)上长势依次变差，其中(8)上停止
生长。说明适宜的蔗糖浓度可极大地促进增殖，
过高或过低都不利于生长。在培养基(9)~(15)上，
原叶体的生长与(5)相比没有显著的优势，说明在
蔗糖缺失的情况下，生长调节物质对假鞭叶铁线
蕨原叶体的增殖影响不大。综上所述，影响增殖
最主要的因素是合适的炭氮浓度比，最合适的原
叶体增殖培养基是(6)。
4.4 孢子体的诱导
4.4.1 组织培养无菌诱导 将原叶体接种于培养基
(1)~(15)上，5 个月后培养基干涸，原叶体长满
整个培养基表面，所有培养基上均无孢子体长
出。说明假鞭叶铁线蕨的配子体在试管内很难诱
导出孢子体，或者说明假鞭叶铁线蕨孢子体的形
成与上述因素无关。
4.4.2 常规诱导 取玻璃培养皿，内装河沙，加河水
润湿到倾斜能有水流出状态。取原叶体，蒸馏水
洗掉培养基后置于培养皿内，加盖，放于培养箱
内培养。1 个月内就能见到幼孢子体长出，诱导
率相当高，达 9 0 % 以上，几乎每一个原叶体都
能长出 1 个幼孢子体。
4.5 移栽 培养皿内所有原叶体几乎都长出孢子体
时，打开培养皿盖，炼苗，注意加水保持沙盘
湿润。幼苗长到 3~4 cm 高，根系 2~3 cm 长时，
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移栽入由稻田土和河沙(1:1)混合成的基质中，注
意洒水、遮荫、保温，成活率可达 9 0 % 以上。
5 意义与进展 假鞭叶铁线蕨属于铁线蕨科铁线蕨
属，分布于广东、海南、广西、湖南和贵州等
地，缅甸、越南、泰国和印度等国也有分布。
蕨类植物以奇特的叶形、叶姿和青翠碧绿的色
彩，在园林中显示出令人赏心悦目的景观。铁线
蕨属中的大部分种都具有较高的观赏价值，如著
名的铁线蕨、楔叶铁线蕨等；它们的组织培养和
快速繁殖研究已有报道(彭晓明和曾宋君2004；曾
宋君等 2005)。假鞭叶铁线蕨造型优美，具有很
高的商业观赏潜质。本文用组织培养手段得到的
结果，对未来假鞭叶铁线蕨的商业化生产应用可
能有一定的参考价值。假鞭叶铁线蕨的组织培养
未见报道。
参考文献
彭晓明, 曾宋君(2004). 铁线蕨的组织培养及植株再生. 植物生
理学通讯, 40 (5): 575
曾宋君, 陈之林, 段俊(2005). 楔叶铁线蕨的离体快繁. 植物生理
学通讯, 41 (4): 499