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观音兰的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 2期,2007年 4月316
观音兰的组织培养与快速繁殖
王仁睿 *,刘军,卢昌泰
四川农业大学林学园艺学院,四川雅安 625014
Tissue Culture and Rapid Propagation of Tritonia crocata (Thunb) Ker-Gawl.
WANG Ren-Rui*, LIU Jun, LU Chang-Tai
College of Forestry and Horticulture, Sichuan Agricultural University, Ya’an, Sichuan 625014, China
收稿 2006-12-06 修定  2007-03-05
* E -m a il:wo shia ru i 1 1 2 9 @1 2 6 .co m;T e l:0 8 3 5 -
2889611
1 植物名称 观音兰[Tritonia crocata (Thunb) Ker-
Gawl.]。
2 材料类别 球茎和根。
3 培养条件 (1)球茎诱导芽的分化培养基:MS+
BA 2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5;(2)根诱导愈
伤组织的培养基:MS+BA 0.5+NAA 0.1+2,4-D
2.0;(3)愈伤组织分化培养基:MS+BA 1.0+NAA
0.1;(4)芽增殖培养基:MS+BA 2.0+NAA 0.1;
(5)生根培养基:1/2MS+NAA 1.0+IBA 0.5。以上
培养基中均加入 7 g·L-1琼脂,pH 5.8,培养基(1)~
(4)中加入 30 g·L-1蔗糖,培养基(5)中加入 20 g·L-1
蔗糖,培养温度为(25±1) ℃,光照时间为 12 h·d-1,
光强为 30~40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体处理 切取球茎时,先用手术刀刮去外
层的鳞片,将底部削平,然后放于流水处冲洗
0.5 h,70%酒精浸泡 5~8 s,采用升汞二次消毒
法:0.1%升汞 +1~2滴吐温 -80灭菌 6 min,无
菌水冲洗 2 次,用无菌刀将消毒后的球茎切成
上、中、下 3个部分,每个部分切成约 1 cm×1
cm×1 cm的小块,切下的小块再用0.1%升汞+1~2
滴吐温 -80消毒 1 min,无菌水冲洗 6~8次,接
种到培养基(1)上。切取根时,先切去老的部分,
用含少量洗洁精的水洗净污垢后,放置在流水处
冲洗 15 min,用 70%的酒精浸泡 5 s,0.1%升
汞 +1~2滴吐温 -80消毒 5 min,用无菌水洗 5~6
次,再截成 1~2 cm,接种到培养基(2)上。
4.2 芽的分化 接种 7 d后,球茎的上部最早出现
芽点,30 d后,从上部中分化出的芽长势良好,
分化率为 92%,中、下部芽的分化率分别为 21%
和 8%。根接种 10 d后开始膨大,然后逐渐在切
口部位长出白色、紧密的愈伤组织,平均诱导率
为 82%,将愈伤组织从根上分离后接种到培养基
(3)上, 35 d后愈伤组织上逐渐分化出绿色小芽
点,分化率为 8 7 %。
4.3 芽的增殖 待上面2种途径诱导得到的芽长到2
cm左右即可接种到培养基(4)上进行增殖培养,
35 d后诱导出大量丛生芽,增殖倍数为 6.4,芽
苗生长健壮。
4.4 生根 当丛生芽长到约 3 cm高时,将其分割
转入培养基(5)上,10 d开始生根,30 d时每株
苗长出 4~6条白色粗壮的根,根尖为黄色,生根
率为 100%。
4.5 炼苗及移栽 移栽前,先将封口膜揭开一半,
在人工气候箱中锻炼 3 d,然后将三角瓶移到光照
较强的地方,封口膜全部揭去,炼苗 3~4 d。移
栽时,用镊子小心地把苗从三角瓶中取出,洗净
黏附在根部的琼脂,种植于已消毒的珍珠岩:蛭石
(1:1)的基质中,慢慢地浇透水,移栽后第 1个星
期盖塑料膜保湿,成活率为 95% 以上。
5 意义与进展 观音兰为鸢尾科观音兰属多年生草
本,原产非洲南部,叶基生,2 列,剑形或条
形,穗状花序排列疏松,花生于花序一侧,直
立,花橙红色或粉红色,直径 2.5~3 cm,花期
4~5月。此种植物在四川省雅安市周边地区均有
分布,本试验所用材料均取自四川省雅安市上里
古镇,当地居民喜欢将观音兰栽种在花园里观
赏。观音兰花形美丽,花期长,是一种十分具
有开发价值的草本花卉。迄今观音兰的组织培养
尚未见报道。